倪方方
- 作品数：10 被引量：55H指数：5
- 供职机构：浙江中医药大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金中医药行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程农业科学更多>>
- 通过改变土壤pH及菌群结构缓解杭白菊连作障碍被引量：5
- 2017年
- 目的:寻找缓解杭白菊连作障碍的方法并阐明其缓解障碍的微生态机制。方法:实验分为6组,即连作组、轮作组、蚕沙发酵肥组、蚕沙未发酵肥组、市售菌肥组及石灰组,于收获期统计杭白菊的存活率、产量、株高以及分枝数,采用Miseq测序技术对6个处理组的杭白菊根际土壤细菌群落多样性及结构进行分析。结果:连作杭白菊的存活率、产量、株高以及分枝数均为最低;土壤酸化严重,p H仅4.79;根际土壤酶活性及细菌多样性水平也最低。而施用蚕沙发酵肥、蚕沙未发酵肥、市售三矩灌金液菌肥、石灰均能有效改善白菊连作障碍,其存活率、产量、株高以及分枝数显著提高。比较土壤理化性质后发现,无论是施用菌肥还是石灰,土壤p H、酶活性以及细菌多样性水平均显著上升,有机质含量则没有显著性差异。比对前20个优势菌属发现,3个菌肥组中的优势菌属种类差异不大,主要表现在含量上的差异。菌肥的施用促进了土壤中一些优势细菌类群数量的增长,如Gp1、Rhizomicrobium、Pseudolabrys、Gp2、Burkholderia、Bradyrhizobium、Devosia、Bacillus、Sphingomonas、Chitinophaga等,其中Devosia、Bradyrhizobium、Bacillus、Burkholderia、Sphingomonas与Chitinophaga均是益生菌。石灰组中的细菌组成与菌肥组差异较大,其中一些益生菌如Arthrobacter、Paenibacillus、Nitrosospira、Ohtaekwangia、Tepidamorphus、Dongia仅在石灰组中特有。结论:无论施肥还是改变土壤p H均可提高杭白菊产量,增加存活率,其微生态机制主要是通过提高土壤p H、酶活性以及细菌多样性水平,增加有益菌的种类和数量,从而达到缓解杭白菊连作障碍的作用。
- 倪方方彭三妹徐建中王博林徐红梅宋腾蛟袁小凤
- 关键词：杭白菊根际微生物连作
- 大连化工废弃地的植被组成及植物对重金属元素的积累影响被引量：3
- 2019年
- 通过大化集团废弃地重金属污染状况及其优势植物体内元素分布的研究,探索重金属污染对植物的影响,并筛选超富集植物。采集5块样地的植物与土壤,利用ICP-OES检测土壤与植物中元素的含量与分布。土壤pH在7.71～8.43之间,呈弱碱性,有机质含量3.91～9.07 g/kg之间,低于土壤肥力3级水平。5块样地的Zn、As、Cd均超标5倍以上,个别样地还有Pb超标;11种植物中Cu均超标;合成氨厂的何首乌和向日葵中As超标,可见土壤重金属污染对植物的元素分布产生影响。刺藜中Cr、Cu、As及Cd的转移系数均居11种植物之首,其次是龙葵和葎草;但所有植物的重金属富集系数均小于1。虽未筛选到超富集植物但也可以看出刺藜、龙葵和葎草的富集和转移重金属能力较强。大化集团废弃地的Cd-As-Zn的复合污染严重,对生长的植物造成了不同程度的重金属污染。为修复该地污染的土壤,建议引入Cd、Zn、As的超富集植物蜈蚣草和东南景天,并配合当地生长的耐性植物刺藜、龙葵、葎草,构建复合生态屏障。
- 宋腾蛟杨远强徐红梅倪方方袁小凤
- 关键词：重金属土壤重金属污染超富集植物ICP-OES
- 纳米银颗粒的毒性效应及作用机制研究进展被引量：4
- 2016年
- 纳米银（AgNP）是指粒子直径在1～100nm的金属银单质,现已广泛应用于多个领域.研究发现,AgNP的毒性特征与其粒径大小有一定的关系,粒径越小,毒性越强,一般来说20nm左右毒性最强.进入机体后在体内各器官均有分布,但浓度有明显差异,有的在肾脏中还表现出性别差异.AgNP进入生物机体各器官会产生一定的毒性效应.AgNP对体外细胞的毒性往往表现出剂量效应,而体内实验中,其毒性效应会随着作用对象及作用方式的不同而不同.此外,AgNP还会产生一定的生殖毒性,使亲代生殖特性降低,并可通过母体胎盘传递到子代体内,对子代的生长发育造成一定的影响.AgNP毒性作用机制主要通过产生自由基导致器官的氧化应激损伤;药酶代谢活力降低导致代谢障碍;亦有相关基因表达的缺陷,及某些分子如转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）所致的蛋白酶表达异常.总之,AgNP可对生物有机体产生毒性,我们在应用的同时要对其生物安全性进行评价,最大程度地减少甚至避免其对我们的损害.
- 倪方方王博林宋腾蛟袁小凤
- 关键词：纳米银颗粒粒度特性毒性效应氧化应激NRF2
- 高通量测序揭示杭白芍根际真菌群落年际变化被引量：7
- 2016年
- [目的]通过研究杭白芍根际真菌群落年际变化探讨真菌对杭白芍生长的影响。[方法]采用田间实验，收集不同种植年份的白芍根际土壤及非根际土，提取宏基因组DNA，利用真菌引物进行PCR，再利用454焦磷酸测序检测1~4年生杭白芍的根际土真菌多样性和组成。[结果]测序结果表明，杭白芍根际真菌多样性Shannon指数由高到低依次为：2年生＞3年生＞4年生＞1年生。虽然1年生的最低，但多样性并不是逐年递增。无论种植年限如何，杭白芍根际的真菌均由子囊菌、毛霉、担子菌、球囊菌、壶菌、梳霉以及捕虫霉等真菌组成，其中子囊菌占绝对优势，其相对丰度均在71.4%以上，说明子囊菌与白芍的生长关系密切。比较后发现，尽管种植年限不同，但其优势真菌的种类在门、纲、目、科、属等层次都差别不大，说明种植年限对杭白芍根际的影响不大。比较根际与非根际土的差异，说明杭白芍的根际真菌组成主要由物种和土壤因子共同决定，与种植年限无关。[结论]杭白芍根际真菌群落的年际变化不受种植年限影响，其真菌的种类组成主要由杭白芍与土壤因子共同决定。
- 徐红梅倪方方宋腾蛟袁小凤朱君华
- 关键词：杭白芍根际年际变化
- 生防菌对白术根腐病的防治作用及机制研究
- 倪方方
- 蚕沙发酵肥在制作过程中的微生物结构变化被引量：1
- 2018年
- 目的比较蚕沙发酵肥在发酵前后的微生物结构变化,阐明蚕沙发酵肥的微生物多样性。方法蚕沙发酵肥由基底土和蚕沙按一定比例混合后发酵30d而来,因此实验共分为4个处理组,分别为基底土组、蚕沙组、蚕沙发酵肥30d组和蚕沙发酵肥90d组。分别采集基底土、蚕沙以及发酵30d后的蚕沙发酵肥进行MiSeq高通量测序,比较蚕沙发酵肥与发酵前的基底土、蚕沙之间的细菌多样性变化,并采集发酵90d的蚕沙发酵肥进行测序,比较不同发酵时间对发酵肥细菌多样性的影响。结果蚕沙发酵肥30d组的细菌多样性指数最高,蚕沙最低,说明蚕沙在与基底土混合发酵后细菌多样性水平升高。β多样性结果显示蚕沙发酵肥的稳定性好,且发酵肥与蚕沙的近缘关系较与土壤的更近。比较优势菌属发现,蚕沙发酵肥30d组有10种优势菌属,分别为Sphingobacterium、Parapedobacter、Ochrobactrum、Flavobacterium、Bordetella、Brucella、Rhizobium、Olivibacter、Devosia和Paracoccus;发酵肥90d组中的优势菌属有70%与30d组相同;蚕沙组中仅有5种优势菌属,分别为Parapedobacter、Bacillus、Pseudomonas、Flavobacterium和Sphingobacterium,其中Parapedobacter、Flavobacterium和Sphingobacterium也为发酵肥30d组的优势菌属;基底土的优势菌属大部分为酸杆菌门,分别为Gp1、Gp2、Gp3、Bradyrhizobium、Rhizomicrobium和Rhodoplanes,它们在经发酵后含量大大下降。蚕沙发酵肥中的大部分优势菌属均为具有生防作用的生防菌,其中部分优势菌属也存在于施用了发酵肥的连作白菊根际土中。结论蚕沙与基底土混和发酵制成蚕沙发酵肥后细菌多样性发生显著变化,生防菌种类显著增加,同时蚕沙发酵肥中的这些生防菌来源于蚕沙并非基底土。蚕沙发酵肥缓解连作障碍的机制之一可能是由于蚕沙发酵肥中存在的大量生防菌。
- 王博林宋腾蛟徐红梅倪方方李昌煜袁小凤
- 关键词：连作障碍微生物多样性高通量测序生防菌
- 生防菌对白术根腐病菌的拮抗作用及盆栽防治效果被引量：19
- 2017年
- [目的]探究生防菌对白术根腐病菌的拮抗作用及盆栽防治效果,为新型、高效的生物杀菌剂的研发提供理论基础。[方法]从浙江磐安根腐病发病的白术中分离出根腐病致病菌尖孢镰刀菌,采用平板对峙法检测四株益生菌枯草芽孢杆菌、哈茨木霉菌、荧光假单胞菌和苏云金芽胞杆菌对尖孢镰刀菌的抑菌作用,同时测定菌株发酵滤液中细胞壁水解酶活性及吲哚乙酸含量,之后扫描电镜观察拮抗性代表菌株对病原菌菌丝生长及形态的影响;通过盆栽试验,将枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌配置成1.0×108 CFU·m L-1的菌液加入到白术根部,对白术干重、鲜重、株高及存活率进行统计。[结果]经平板对峙实验,细胞壁水解酶活性及吲哚乙酸含量检测,4种菌均可对白术根腐病病原菌产生抑制作用,其中枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌综合抑菌效果较好,平板对峙抑菌率达50%以上,发酵滤液中蛋白酶、纤维素酶、几丁质酶活性及吲哚乙酸含量较高;扫描电镜观察发现,枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌均使致病菌的菌丝生长及形态产生了影响,菌丝体发生相互缠绕、扭曲变形、褶皱、折叠、断裂、干瘪,甚至菌丝表面炸开溶解等现象;盆栽实验表明,枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌均可有效促进白术生长,降低发病率,提高生物量。[结论]枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌在室内拮抗及盆栽防治均表现出较好的抑菌防治效果,这为白术根腐病的生物防治及菌种资源的应用奠定了理论基础。
- 倪方方徐红梅宋腾蛟王博林徐建中袁小凤
- 关键词：根腐病盆栽实验扫描电镜
- 蚕沙发酵肥对连作白术产量和品质的影响被引量：8
- 2016年
- [目的]探究施用蚕沙发酵有机肥对白术连作障碍的缓解效果,以及蚕沙发酵肥对连作白术有效成分含量的影响。[方法]田间试验共设6个处理组,依次为连作组、轮作组、蚕沙发酵高剂量组、蚕沙发酵低剂量组、蚕沙未发酵高剂量组、蚕沙未发酵低剂量组。在苗期和花期测量白术株高并计算存活率,在收获期收集白术,计算产量,利用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定各处理组白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ的含量。[结果]连作使白术存活率和产量降低,与连作组比,轮作组、蚕沙发酵高剂量和蚕沙发酵低剂量组分别使产量提高了10.69倍、10.41倍和4.83倍,而未发酵蚕沙对产量无影响。施用蚕沙有机肥后显著提高了白术有效成分含量,其中蚕沙发酵高剂量组的白术内酯Ⅰ含量最高(0.5570mg·g^(-1));蚕沙未发酵低剂量组的白术内酯Ⅲ含量最高(0.0867mg·g^(-1)),其次为轮作组(0.0748mg·g^(-1)),均明显高于连作组含量;蚕沙未发酵高剂量组对白术的品质无明显影响。[结论]连作降低了白术的产量和品质,施用蚕沙发酵肥则能够缓解连作障碍,且发酵高剂量组的效果优于低剂量组;而未发酵蚕沙不能缓解白术的连作障碍。
- 王博林倪方方徐建中袁小凤
- 关键词：白术连作HPLC
- 枯草芽孢杆菌等益生菌对白术白绢病的防治研究被引量：9
- 2017年
- 前期工作中发现蚕沙发酵肥能有效缓解白术的连作障碍,并从发酵肥中筛选到4株可能缓解白术连作障碍的益生菌。为进一步探讨蚕沙有机肥缓解杭白术连作障碍的微生物作用机制,从致病白术根际分离并培养白绢病致病菌齐整小核菌(Sclerotium rolfsii),利用平板对峙实验将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、荧光性假单胞菌(Psdeuomnoda fluoerncnet)、类芽孢杆菌(Paenibacillus Ash)和黄杆菌(Flavobacterium mizutaii)4种菌与齐整小核菌进行拮抗,并通过盆栽实验验证。对峙实验结果表明,黄杆菌对齐整小核菌的抑菌率为43.6%;枯草芽孢杆菌的抑菌率为67.6%;荧光性假单胞菌的抑菌率为52.5%,而类芽孢杆菌的抑菌率为12.4%其中枯草芽孢杆菌的抑菌效果最为显著,说明黄杆菌、枯草芽孢杆菌和荧光性假单胞菌能够有效拮抗白绢病病菌,而类芽孢杆菌效果不佳。在致病白术土壤中添加这3种有效益生菌,也能够有效提高白术存活率,而且存活率随着益生菌浓度增加而增加,高浓度(2×108CFU/m L)枯草芽孢杆菌效果最明显,达到100%,另外2种益生菌均为80%。结论:从蚕沙发酵肥中筛选出的3种益生菌均能抑制白绢病病原菌的生长,且枯草芽孢杆菌的防治效果最好,可提高病株的存活率及改善病株生长,提示可以用于生物菌肥的开发。
- 胡朝晖陈秋强王博林倪方方徐红梅宋腾蛟袁小凤
- 关键词：白术白绢病枯草芽孢杆菌
