何振
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症小体在草酸钙结石肾组织中的表达及意义被引量：4
- 2016年
- 目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（nod-like receptor protein 3,NLRP3）炎症小体在草酸钙结石患者及大鼠模型肾组织中的表达及其临床意义.方法 收集2008年1月至2014年12月因肾结石行肾切除的肾组织标本20例为实验组,同期因肾细胞癌行根治性肾切除术标本中距肿瘤＞2 cm且经病理证实为正常肾组织20例为对照组,应用免疫组化染色分别检测NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）及白细胞介素-1β（IL-1β）的表达水平.动物实验：将14只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,每组7只;实验组采用乙二醇饮水法诱导建立草酸钙结石大鼠模型,对照组予蒸馏水饲养;饲养6周后留取大鼠的肾组织,通过HE及Pizzolato染色法观察实验组大鼠肾组织内结石形成情况,通过蛋白质印迹法和RT-PCR检测两组大鼠肾脏组织中NLRP3、Caspase-1及IL-1β的蛋白表达水平和mRNA表达水平.结果 NLRP3、Caspase-1及IL-1β在草酸钙结石患者的肾组织中呈强阳性表达,而在正常肾组织中呈弱阳性表达.动物实验结果显示实验组均成功构建草酸钙结石大鼠模型,在大鼠肾小管管腔内可见结石晶体形成,对照组肾组织内未见结石晶体.蛋白质印迹法检测结果显示,实验组NLRP3、Caspase-1及IL-1β的蛋白表达量分别为1.40±0.13、1.38 ±0.13、1.35±0.07,对照组分别为1.00±0.09、1.00±0.02、1.00±0.01,两组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）.RT-PCR检测结果显示实验组NLRP3、Caspase-1及IL-1β的mRNA表达量分别为1.00±0.15、1.29±0.27、3.46±0.72,对照组分别为0.44±0.08、1.00±0.12、1.00±0.15,两组比较差异均有统计学意义（均P ＜0.05）.结论 草酸钙结石患者及大鼠模型肾组织中存在NLRP3炎症小体的过表达,NLRP3炎症小体为研究草酸钙结石形成的分子机制提供了新的思路.
- 齐士勇何振姜行康杨雄张昌文张志宏徐勇
- 关键词：草酸钙结石
- 草酸诱导HK-2细胞核苷酸结合寡聚化结构域样受体3炎症小体的激活在草酸钙肾结石形成中的作用及机制被引量：5
- 2017年
- 目的探讨高浓度草酸作用于人肾小管上皮细胞HK-2后核苷酸结合寡聚化结构域样受体3（NLRP3）炎症小体在草酸钙肾结石形成过程中的激活作用机制。
方法通过测定细胞培养基中乳酸脱氢酶（LDH）的含量、4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色法分析草酸对HK-2细胞的毒性及损伤；使用相差显微镜观察高浓度草酸作用于HK-2细胞后细胞表面晶体黏附；通过Western blot法和实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）分别检测高浓度草酸作用于HK-2细胞后NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）及白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白和mRNA表达量的影响，同时检测高浓度草酸作用于HK-2细胞后对透明质酸合酶1（HAS1）、透明质酸合酶2（HAS2）、透明质酸合酶3（HAS3）、骨桥蛋白（OPN）以及CD44 mRNA表达的影响，并采用二氯荧光黄二乙酸酯（DCFH-DA）检测活性氧自由基（ROS）；Western blot和FQ-PCR法分别检测使用ROS抑制剂N-乙酰基半胱氨酸（NAC）预处理HK-2细胞后高浓度草酸作用于细胞后NLRP3的蛋白及mRNA的表达水平变化；使用RNA干扰技术，将NLRP3-小干扰RNA（siRNA）和阴性对照（NC）转染HK-2细胞后，相差显微镜观察晶体黏附变化，FQ-PCR法分别检测HAS1、HAS2、HAS3、OPN以及CD44 mRNA表达水平变化。
结果使用不同浓度的草酸处理HK-2细胞24 h，测定LDH含量结果显示当草酸浓度为0.8 mmol/L时，细胞培养基中LDH开始比草酸浓度为0.6 mmol/L时显著增加[（528.37±25.65）比（300.55±17.18） mmol/L，P＝0.001]，DAPI染色法显示不同浓度草酸侧细胞数量分别为：55.67±3.30、52.33±6.13、52.33±2.05、58.00±9.09、50.00±1.63、47.33±2.05、33.67±3.30、20.33±2.05，当草酸浓度为1.0 mmol/L时，细胞数量开始比草酸浓度为0.8 mmol/L时明显减少（33.67±4.04比47.33±2.52，P＝0.008）；相差显微镜观察高浓度草酸＋一水草酸钙（COM）作用于HK-2�
- 齐士勇何振徐勇张志宏
- 关键词：草酸草酸钙结石HK-2
- 前列腺恶性间叶性软骨肉瘤1例并文献复习被引量：1
- 2015年
- 目的分析前列腺恶性间叶性软骨肉瘤的诊疗特点。方法回顾性分析1例前列腺恶性间叶性软骨肉瘤患者的临床资料,并结合文献分析其临床表现、影像学检查、病理特点、治疗及预后。结果患者男,59岁。因尿频、进行性排尿困难于外院诊断为前列腺增生,行经尿道前列腺电切术治疗,术后病理示前列腺恶性间叶性肿瘤。B超检查示膀胱内中等回声团块,未见明显移动,前列腺显示不清,右侧盆腔内可见囊性混合型结构。全身骨扫描检查未见明确骨转移征象。前列腺MRI检查示盆腔内近盆底区可见多发结节状、团块状软组织信号影,较大者位于膀胱右侧。患者于全麻下行根治性膀胱切除术+盆腔淋巴结清扫术+双侧输尿管皮肤造口术,术后病理检查可见片状未分化的原始间叶细胞,其间散在小岛状高分化的软骨细胞,软骨细胞有轻度异型性。免疫组化:波形蛋白和软骨区域胞核S-100均阳性,未分化细胞区域S-100、平滑肌肌动蛋白、CD34、细胞角蛋白CK7、CK8均为阴性。病理诊断为前列腺恶性间叶性软骨肉瘤。患者术后拒绝接受化疗和其他进一步治疗,于术后3个月死亡。结论前列腺恶性间叶性软骨肉瘤患者临床表现以尿频、进行性排尿困难为主,需根据患者的临床表现、影像学检查、组织病理学与免疫组化等综合诊断,治疗首选手术根治切除,术后应针对性给予放疗或化疗。
- 何振徐勇张志宏杨宇明刘冉录齐士勇
- 关键词：免疫组织化学染色病理检查
- 尿路上皮癌伴鳞状分化对TURBT术后pT1期患者预后的影响被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨尿路上皮癌伴鳞状分化对初次经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)术后p T1期患者预后的影响。方法:回顾性分析初次经TURBT手术、术后病理诊断为T1期的531例膀胱尿路上皮癌患者的临床病理资料。根据患者的术后病理诊断将患者分为2组:A组为尿路上皮癌(单纯型)441例,B组为尿路上皮癌伴鳞状分化90例,应用SPSS 20.0统计软件,运用KaplanMeier法分析两种临床病理特点对无复发生存期(RFS)和无进展生存期(PFS)的影响,并用Log-rank检验比较生存曲线;运用COX回归模型单因素和多因素分析膀胱尿路上皮癌伴鳞状分化与初次TURBT术后p T1期患者预后之间的关系,评估影响其RFS和PFS的因素。结果:A组单纯尿路上皮癌441例(83.05%),B组尿路上皮癌伴鳞状分化90例(16.95%)。B组与A组比较更易具有高级别肿瘤(P<0.001),同时B组较A组有较高的复发率(P=0.018)、较短的无复发生存期(P<0.001)以及较高的进展率(P=0.001)、较短的无进展生存期(P<0.001)。B组与A组比较,年龄(P=0.185)、性别(P=0.135)、吸烟(P=0.728)、肿瘤大小(P=0.436)、肿瘤数目(P=0.112)和膀胱灌注(P=0.054)等差异均无统计学意义。COX多因素生存分析显示:吸烟(HR 1.34,95%CI 1.00-1.79,P=0.048)、鳞状分化的伴发情况(HR 1.43,95%CI 1.02-2.00,P=0.040)以及病理分级(HR 1.51,95%CI 1.13-2.01,P=0.005)等因素显著增加TURBT术后p T1期患者的复发风险;同时,吸烟(HR 1.80,95%CI 1.17-2.76,P=0.008)、鳞状分化的伴发情况(HR 2.07,95%CI 1.32-3.24,P=0.001)以及病理分级(HR 1.90,95%CI 1.24-2.92,P=0.003)等因素显著增加TURBT术后p T1期患者的进展风险。结论:尿路上皮癌伴鳞状分化是TURBT术后p T1期患者的预后独立影响因素,复发率及进展率较高,需密切随访。
- 何振徐勇齐士勇杜娥沙楠朱冰
- 关键词：膀胱尿路上皮癌TURBT复发
- 基于Keap1基因多态性的肾透明细胞癌分子标志物的研究被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨Keap1基因单核苷酸多态性与肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)的相关性,为临床诊疗提供有效的分子靶点。方法:采集ccRCC组织108例与正常对照肾组织86例,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)和基因测序技术检测Keap1基因单核苷酸多态性,判读两组样本基因型,实时荧光定量PCR法检测Keap1基因在两组中的表达情况。结果:Keap1基因rs1048289的不同基因型与等位基因频率在肿瘤组和对照组之间的分布不同,差异均有统计学意义(P<0.05)。AA基因型及A等位基因携带者患肾透明细胞癌的风险明显升高,AA基因型(OR=2.292,95%CI:1.159~4.533,P<0.05)及A等位基因(OR=2.067,95%CI:1.280~3.342,P=0.001)为肾透明细胞癌患病的危险因素。肿瘤组Keap1基因表达量比对照组明显降低(P<0.05),但不同基因型样本间Keap1基因表达量无明显差异(P>0.05)。结论:Keap1基因rs1048289与肾透明细胞癌患病显著相关,有望成为肾透明细胞癌早期诊断与基因治疗的有效分子靶点。
- 李燕妮齐士勇颜艳何振徐勇邹慧儒
- 关键词：单核苷酸多态性肾透明细胞癌分子标志物基因治疗
