郭丽娜
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：河北医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省医学科学研究重点课题河北省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学轻工技术与工程石油与天然气工程更多>>
- 靶向抑制髓系抑制性细胞调控肿瘤微环境对神经母细胞瘤荷瘤小鼠免疫疗效的影响被引量：4
- 2020年
- 目的探索靶向抑制髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)调控神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)肿瘤微环境对增强效应细胞体内杀伤效应、提高NB免疫治疗效果的作用和机制。方法以BALB/c小鼠为实验对象,利用NB细胞注射建立荷瘤小鼠模型。按随机数字表法将小鼠随机分为多柔比星(doxorubicin,DOX)2.5 mg/kg组、DOX 5 mg/kg组、多巴胺(dopamine,DA)50 mg/kg组和对照组进行药物筛选,每组20只。分别于NB细胞接种后第7天和第12天注射DOX、DA,于NB细胞接种后第14、17、23天检测比较各组小鼠瘤体内MDSC数量分布及凋亡率、T细胞周期、Treg水平和TAM分布,MDSC培养上清中Arg-1、iNOS、ROS、IL-10、TGF-β含量,比较各组肿瘤生长曲线。根据抑瘤效果选择抑制MDSC最佳药物及浓度。制备NB抗原特异性CTL。按随机数字表法将荷瘤小鼠随机分为DOX组、CTL组、抗GD2组、DOX+CTL组、DOX+抗GD2组和对照组进行免疫治疗对比研究,每组20只。在抑制MDSC基础上实施NB荷瘤小鼠免疫治疗,检测比较各组肿瘤生长曲线,对比各组瘤体中浸润CTL、颗粒酶和穿孔素表达,外周血IL-2和IFN-γ水平。采用SPSS 26.0软件进行统计学处理。结果随时间变化,各药物筛选组和对照组比较,MDSC增长比例显著降低(P=0.001),瘤体中T细胞增殖和对照组比较先升(P<0.001)后抑(P>0.05);TAM由M1型向M2型极化减弱;Treg水平受抑;MDSC培养上清中Arg-1、iNOS、ROS和IL-10含量和对照组比较均降低,且差异均有统计学意义(P均<0.05);不同药物筛选组肿瘤体积比较,差异有统计学意义(P=0.018)。以上各指标均以DOX2.5组表现最为显著,肿瘤生长最缓慢,抑制MDSC作用最强。小剂量DOX干扰后荷瘤小鼠实施免疫治疗,和对照组比较,各组瘤体浸润CD4+、CD8+淋巴细胞比例上升,颗粒酶、穿孔素浓度上升,外周血IL-2、IFN-γ浓度上升,且差异均有统计学意义(P均=0)。以上各指标均以DOX2.5+抗GD2组�
- 徐伟立时保军李索林于风雪李萌郭丽娜周辉
- 关键词：神经母细胞瘤小鼠
- 小鼠肺部TMEM16A基因表达沉默模型的建立
- 2016年
- 目的 构建小鼠TMEM16A-shRNA慢病毒载体,通过气管内注射慢病毒载体,局部部分沉默小鼠肺部TMEM16A基因的表达,为后续在体研究TMEM16A在肺部作用提供基础.方法 ①构建小鼠TMEM16A-shRNA慢病毒载体;②免疫荧光法验证LA795小鼠肺腺癌细胞膜上TMEM16A的表达,体外行慢病毒感染实验,确定感染的最佳条件,最后体外实验确定慢病毒的干扰效率;③链霉菌抗生素蛋白-过氧化物酶连接法（streptavidin-perosidase,SP）法验证肺组织中TMEM16A的表达;④气管内注射慢病毒2周后行支气管肺泡灌洗,BAC法检测灌洗液中蛋白及酶联免疫吸附法测定（ELISA）法检测炎症因子肿瘤坏死因子α（tumornecrosisfactor-a,TNF-α）、IL-1β及IL-10的浓度;⑤气管内注射慢病毒2周后取材肺组织提取蛋白用蛋白印迹法（Western blot）验证在体TMEM16A-shRNA慢病毒载体的沉默效率.结果 ①LA795细胞膜上存在TMEM16A的表达,LA795细胞在5 mg/L的Eni.S＋ polybrene条件下容易被感染,病毒感染复数（MOI）为20;②Western blot进一步显示体外细胞慢病毒shRNA的沉降效率约81.35％（P＜0.05）;③气管内注入Lenti-Neg-shRNA后BALF的蛋白含量无增加,细胞因子TNF-α、IL-1β及IL-10的浓度无明显变化（P＞0.05）;光镜下肺组织结构正常,未造成病理损伤;④气管内注入Lenti-TMEM16A-shRNA后,Western-blot结果显示TMEM16A表达水平降低（P＜0.05）,达到在肺部部分沉默TMEM16A的目的.结论 本研究成功构建小鼠TMEM16A-shRNA慢病毒载体,体内实验证实慢病毒气管内注射是比较安全,未增加肺组织的蛋白渗漏及病理损伤,并能有效转染气道及肺泡上皮细胞并在局部表达,成功沉默肺部TMEM16A的表达.
- 李宏林阎锡新张会然郭丽娜
- 关键词：RNA干扰慢病毒LA795
- BALB/c裸鼠血管瘤模型的建立及普萘洛尔对其瘤体的抑制作用
- 2020年
- 目的建立BALB/c裸鼠血管瘤模型,探讨普萘洛尔对血管瘤裸鼠移植瘤瘤体生长的影响。方法手术切除血管瘤患儿血管瘤组织,经皮肤切口移植于40只BALB/c裸鼠建立血管瘤模型。移植后第45天将40只荷瘤小鼠随机分为5组:治疗组1,腹腔注射0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组2,腹腔注射0.05%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组3,腹腔注射0.1%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组4,经口灌胃0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;对照组,腹腔注射无菌生理盐水0.4 mL;各组给药均为1次/d,持续1周。于干预前及干预后第7、14、21天测量各组瘤体体积和小鼠体质量并进行比较;干预第22天切取瘤体行HE染色观察对比病理变化。结果干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3、4瘤体体积均较干预前小,且治疗组1、2、3较对照组瘤体体积小(P均<0.05)。干预后第14、21天,治疗组3较治疗组1、2瘤体体积小(P均<0.05),治疗组1较治疗组4瘤体体积小(P均<0.05)。HE染色后光镜下可见各治疗组血管瘤内皮细胞分散凌乱、界限不清,且普萘洛尔浓度越高,对内皮细胞增殖抑制作用越明显。干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3及对照组两两相比,治疗组1与治疗组4相比,裸鼠体质量比较差异无统计学意义。结论成功建立BALB/c裸鼠血管瘤模型;普萘洛尔可抑制模型裸鼠瘤体生长,对裸鼠机体无明显损害,且腹腔注射较灌胃效果显著。
- 安雯婷郭丽娜房克峰姜乐徐珊高志嵩徐伟立
- 关键词：普萘洛尔血管瘤BALB/C裸鼠
- 慢性神经退行性疾病转基因小鼠模型的研究进展
- 慢性神经退行性疾病以神经元变性缺失为主要病理特征，最终表现出运动和功能障碍。其发病机制尚不清楚，无有效治疗药物。慢性神经退行性疾病转基因小鼠模型为这类疾病的机制研究和治疗药物筛选提供了依据，本文将介绍几种主要的慢性神经退...
- 高志嵩安雯婷郭丽娜姜乐徐珊于风雪
- 关键词：神经退行性疾病阿尔兹海默症帕金森症肌萎缩性侧索硬化症转基因动物模型
- 2011计划实施的机制和体制建设探讨
- 本文就2011计划实施过程中的关键问题:机制和体制建设,从重要性、建设原则和措施等方面进行了较为深入的探讨,旨在加强协同创新中心的运转效率,保障协同创新中心的持续、良性运转。
- 张朝军于风雪张瑛安文婷郭丽娜
- 文献传递
