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共刺激分子程序性死亡配体-1在急性肺损伤中的作用及机制初探被引量：7: 2016年; 目的探讨程序性死亡配体-1（PD-L1）表达在急性肺损伤（ALI）中的作用机制。方法清洁级健康雄性C57BL／6小鼠20只，PD～L1基因敲除雄性小鼠20只，分别按随机数字表法分为假手术组（Sham）和ALI组，每组10只。采用失血性休克／脓毒症双重打击方法制备ALI小鼠模型，Sham组仅显露双侧股动脉并结扎但不放血、仅分离盲肠但不结扎穿孔。于制模后24h处死小鼠，取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）。用实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测肺组织PD-LI的mRNA和蛋白表达；光镜下观察肺组织病理学改变，测定BALF中蛋白含量；用流式细胞仪检测粒细胞分化抗原1（Grl）阳性细胞数及肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肺组织和BALF中促炎因子白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及趋化因子角化细胞源性趋化因子（KC）、巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP～2）水平。结果与Sham组相比，ALI组C57BL／6小鼠肺组织PD-L1的mRNA和蛋白表达均明显升高[PD-L1mRNA（2-△△Ct）：3．20±0．76比1．01±0．03，PD-L1蛋白（4值）：0．98±0．16比0．15±0．04，均P〈0．05]；光镜下显示，ALI组C57BL／6小鼠肺泡壁间隔增厚、充血水肿和点状出血，肺组织有大量炎性细胞浸润，BALF中有明显的蛋白渗漏（ng／L：0．18±0．06比0．05±0．01，P〈0．05）；而PD-L1基因敲除小鼠肺损伤程度及BALF中蛋白渗漏较ALIC57BL／6小鼠明显减轻（ng／L：0．11±0．02比0．18±0．06，P〈0．05）。与相应Sham组比较，ALI小鼠肺组织Grl阳性细胞数、MPO活性，肺组织和BALF中促炎因子及趋化因子水平均明显增高；但PD-L1基因敲除ALI小鼠肺组织和BALF中上述指标均较ALIC57BL／6小鼠明显降低[肺组织Grl阳性细胞数：（39．0±4．0）％比（45．0±8．0）％，MPO活性�; 包晓玮孙宏杨倩刘显东陈春香白建文唐伦先; 关键词：肺损伤程序性死亡配体-1 程序性死亡受体-1 中性粒细胞

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陈春香

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