孙云
- 作品数：20 被引量：25H指数：3
- 供职机构：海南大学海洋学院海南省热带水生生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：海南省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- 卵形鲳鲹IgM蛋白的纯化和抗血清的制备
- 2018年
- 为了获得卵形鲳鲹血清免疫球蛋白(Ig M),笔者首先采用硫酸铵二次盐析法对Ig M进行粗提,然后利用蛋白A亲和层析法进行纯化,并以纯化后的Ig M蛋白为抗原,制备该蛋白的多克隆抗体,最后利用酶联免疫吸附(ELISA)方法和Western blot技术检测所获抗血清的效价及效果。结果表明:用饱和硫酸铵二次盐析法提取的蛋白除了重链和轻链2条电泳带外,杂蛋白较多;利用蛋白A亲和层析法可获得纯度较高的Ig M重链和轻链。用纯化的卵形鲳鲹Ig M免疫小鼠,ELISA方法检测获得的多抗血清效价高达1∶25 600。Western blot结果显示,本实验制备的鼠抗卵形鲳鲹Ig M血清可结合显示出目标条带,说明卵形鲳鲹Ig M多克隆抗血清制备成功,为卵形鲳鲹的后续研究工作奠定了基础。
- 张胜楠吴莹孙云曹贞洁周永灿
- 关键词：卵形鲳鲹多克隆抗体
- 基于响应面法分析乌梅和抗生素对哈维氏弧菌的协同抑制作用被引量：1
- 2018年
- 为了给哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)疾病防治新手段的开发提供基础实验数据,筛选了协同抗哈维氏弧菌的乌梅(Fructus mume)水提液与抗生素复合物。首先绘制药物浓度对数对抑菌圈直径标准曲线,采用全组合法筛选与乌梅水提液具有协同抗菌活性的抗生素,然后采用中心组合设计法(CCD)结合响应面法(RSM)分析乌梅水提液与筛出抗生素复合后两两药物间的交互作用,并确定最佳复合配比。全组合法筛出的四环素、土霉素、金霉素和强力霉素分别与乌梅水提液具有协同抗菌作用,RSM分析显示将这4种药物复合后,乌梅水提液与土霉素对哈维氏弧菌存在显著协同抗菌作用;土霉素分别与金霉素和强力霉素存在交互抑制作用;乌梅水提液、土霉素、金霉素和强力霉素最佳复合配比为45∶0.12∶0.00∶0.00 (mg·mL^(–1))。模型预测最优复合物对哈维氏弧菌的抑菌圈直径为18.54 mm,琼脂扩散法平行3次测得该复合物的抑菌圈直径为(19.03±0.07) mm,相对误差为2.6%,表明该方法结果可靠,为考察药物间的交互作用提供了新思路。
- 钟志鸿王菲陈永贵邓恒为邓恒为孙云王世锋孙云陈雪芬
- 关键词：哈维氏弧菌乌梅抗生素响应面分析法
- 网络环境下海洋生物数字实验教学资源建设
- 2021年
- 随着计算机、电子信息、多媒体和网络技术的快速发展,网络化数字教学已成为实验教学的重要方式和手段。海洋生物国家级实验教学示范中心(海南大学)开展数字化实验教学管理,将现有的传统教学资源数字化并融合创新,逐步地建设基础实验教学资源、仪器设备使用操作教程、实验操作教程和拓展性实验教学资料的数字化资源,并将这些资源通过中心网站进行应用与共享,提高中心实验教学质量。
- 郭伟良周永灿孙云王永强李红齐兴柱王嫣陈雪芬
- 关键词：海洋生物实验教学质量
- 循环水养殖系统构建及其在水产养殖学专业实践教学中的应用被引量：3
- 2017年
- 水产养殖学是一门应用性和实践性较强的学科.为了扩充水产养殖校内实践教学资源,本研究结合海南热带海洋地域特点和海南高校水产养殖的实际教学需要,规划、设计和构建循环水养殖系统.该系统包括室外储水系统以及贝类增养殖循环水养殖系统、水产养殖动物病害循环水养殖系统和鱼类增养殖循环水养殖系统三个室内独立养殖系统,可承担贝类增养殖学、水产养殖动物病害学、鱼类增养殖学、水产养殖动物营养与饲料学、生物饵料培养及水产动物遗传与育种学6门水产养殖学专业实验课程.为学生提供高水平生产实践训练环境,解决因教学与生产脱节而造成所培养人才职业适应差等问题,确实提高学生实践动手能力.
- 刘春胜郭伟良顾志峰万逸孙云
- 关键词：水产养殖实践教学循环水养殖系统
- 基于自主创新实验设计的《水产微生物学实验》教学改革与实践
- 2022年
- 为培养创新型、综合型高素质水产养殖学专业人才,本文对《水产微生物学实验》的教学内容和模式进行了改革与实践探索。充分利用海南热带、海洋水产微生物资源优势,以热带海洋微生物为对象,增设自主创新性特色实验项目;优化验证性、综合性和自主创新性实验类型设置的比例;制作自主创新实验示教片等形式多样的特色实验教学资源;并采用以学生为主体的实验教学模式,充分调动学生的主观能动性,提高实验教学质量。
- 曹贞洁郭伟良周永灿孙云
- 关键词：教学资源
- 溶藻弧菌TssJ基因的原核表达及多克隆抗体制备被引量：2
- 2016年
- Tss J是溶藻弧菌Ⅵ型分泌系统(T6SS)的一个重要基因.为了制备Tss J基因的多克隆抗体,以溶藻弧菌HN08155菌株的DNA为模板,扩增Tss J基因后利用表达载体PET-32a(+)和大肠杆菌BL21(DE3)原核表达,分离纯化后免疫大鼠获得Tss J基因的多克隆抗体.结果显示,37℃、IPTG终浓度1 mmol·L^(-1)是较适宜的表达诱导条件,表达的融合蛋白是存在于细胞内的包涵体,与预期的分子量42 k D一致,并且免疫大鼠后血清的多克隆抗体效价很高,为1∶32 768.制备的溶藻弧菌Tss J高效价多克隆抗体有助于进一步开展Tss J的定位和功能研究.
- 范雪亭许悦孙云周永灿王世锋谢珍玉
- 关键词：溶藻弧菌原核表达多克隆抗体
- 卵形鲳鲹TNFSF6的原核表达、纯化与多克隆抗体的制备被引量：1
- 2020年
- 为了研究卵形鲳鲹肿瘤坏死因子配体6(TNFSF6)的功能,本研究构建了TNFSF6的原核表达载体并制备了其多克隆抗体,首先通过PCR扩增技术扩增获得了TroTNFSF6的开放阅读框序列,并构建了原核表达重组质粒pET-TroTNFSF6,随后将重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株BL21中,进行原核表达并获得重组蛋白rTroTNFSF6.结果显示,重组蛋白rTroTNFSF6大小约46.5 kDa,其最适诱导温度为20℃,诱导时间为8 h,IPTG的最佳浓度为0.6 mmol/L.可溶性分析表明,重组蛋白rTroTNFSF6主要在沉淀中,以包涵体的形式存在.将纯化后的重组蛋白rTroTNFSF6免疫小鼠以制备多克隆抗体,ELISA检测结果表明其效价高达1∶32000.本研究为进一步探究卵形鲳鲹TNFSF6的功能奠定了基础.
- 王鹭李海平周永灿孙云孙云
- 关键词：卵形鲳鲹原核表达多克隆抗体
- 和厚朴酚自微乳给药系统制备工艺响应面法优化及质量评价研究被引量：9
- 2022年
- 目的优化和厚朴酚自微乳给药系统(HN-SMEDDS)制备工艺,并对其质量进行评价。方法采用拟三元相图法筛选HN-SMEDDS的辅料。在此基础上,以微乳粒径大小为评价指标,应用星点设计-响应面法优化HN-SMEDDS处方。然后采用电导率法对最优处方的HN-SMEDDS进行结构表征,并对其质量进行体外评价。结果优化后HN-SMEDDS配方为聚山梨酯80 71.54%,PEG200 14.62%,花生油10.56%,蓖麻油3.28%;在该配方下,和厚朴酚载药质量浓度为60 mg/mL,用纯水将其稀释3倍以上可形成水包油(O/W)微乳液,其平均粒径为(16.83±0.35) nm,多分散系数(PDI)为0.189±0.021,Zeta电位为(-15.530±0.205) mV。HN-SMEDDS在5~400倍稀释形成的微乳液稳定性良好,分散介质类型对其粒径无显著性影响,在-20℃或在室温条件下贮存15 d仍可稀释形成稳定微乳液。该自微乳可显著延长和厚朴酚在人工胃液中的释放时间和提高其在人工小肠液中的释放度。结论优化的HN-SMEDDS制备工艺简单、微乳粒径小、PDI小、稳定性好、制备成本低、能有效提高和厚朴酚在水中的溶解度和在人工小肠液中的释放度。
- 李桂华赵子晨蒋满意王世锋孙云张冬冬李建龙郭伟良周永灿
- 关键词：和厚朴酚自微乳给药系统拟三元相图星点设计-响应面法电导率法
- 《水生动物免疫学》课程思政的设计与实践
- 2022年
- 在当前国家大力提倡培育当代大学生三农情怀的背景下,《水生动物免疫学》课程在培养人才和社会服务等方面有着重大的责任和使命,如何在专业教学过程中“落实立德树人根本任务,发展素质教育”,成为了本门课程亟需探索的新路径。课程教学团队始终秉持“以生为本”、“德才兼备”的培养理念,拟结合课堂讲授、讨论、演示、辩论等多元化的教学方法,认真分析课程内容,充分挖掘课程中蕴含的思政元素,将其自然融合到专业知识的讲授中,力求专业课与课程思政同向同行,培养学生爱国热情、民族自豪感、工作责任意识、创新精神,以及正确的人生观、价值观等,努力培养国家需要、社会满意的高素质人才。
- 曹贞洁周永灿孙云
- 关键词：水产养殖
- 卵形鲳鲹MHC Ⅱα及MHC Ⅱβ组织特异性表达分析被引量：1
- 2018年
- 为了从蛋白水平和mRNA水平上比较和分析MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中的表达情况,本研究构建了重组载体p ET32a(+)/M-Ⅱα和p ET32a(+)/M-Ⅱβ来诱导其表达,并制备了多克隆抗体,而且通过qRT-PCR技术分析了MHC Ⅱ类基因在卵形鲳鲹正常组织中的表达.结果显示,本研究成功表达了卵形鲳鲹MHC Ⅱα和MHC Ⅱβ基因的融合蛋白,并制备出了效价高和特异性强的多克隆抗体;在利用Western Blot技术分析MHC Ⅱα或MHC Ⅱβ基因在卵形鲳鲹不同组织中对蛋白的表达情况时,均检测到一条大小约70k Da的疑似MHC Ⅱαβ二聚体的单一条带,且该MHC Ⅱαβ二聚体在脾脏、头肾、肠道、鳃中的表达量较高,而在胃、心、脑、肝中的表达量稍低.qRT-PCR的分析结果一致表明,MHC Ⅱ类基因广泛分布在不同组织中,尤其在与免疫相关的组织(脾脏、头肾、肠道、鳃)中,其具有较高表达量.
- 张小其孙云孙云周永灿
- 关键词：卵形鲳鲹MHC原核表达多克隆抗体
