王欢欢
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
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- 2016年
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- 2016年
- 目的
研究叉头状转录因子O1（FoxO1）调节高糖下小鼠足细胞上皮间质转分化及与转化生长因子β1（TGF-β1）/Smad3信号通路的关系。
方法
分别将持续激活突变型FoxO1慢病毒载体（LV-CA-FoxO1）、FoxO1短发夹样RNA慢病毒载体（LV-FoxO1-shRNA）和空慢病毒载体（LV-NC）转染足细胞。实验分5组：正常糖浓度组（5.6 mmol/L，A组）、高糖组（25 mmol/L，B组）、高糖＋LV-CA-FoxO1组（C组）、高糖＋LV-FoxO1-shRNA组（D组）、高糖＋LV-NC组（E组）。各组培养24、48、72 h后，实时荧光定量PCR、免疫印迹法检测FoxO1、TGF-β1、Smad3、nephrin、desmin的表达水平；细胞免疫荧光法观察FoxO1在足细胞中的定位；酶联免疫吸附法检测72 h上清中TGF-β1水平。
结果
与A组相比，B组FoxO1 mRNA及蛋白表达无变化（均P〉0.05），磷酸化FoxO1（p-FoxO1）/FoxO1升高，TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达升高，p-Smad3/Smad3升高，nephrin表达减少，desmin表达增多，且nephrin及desmin变化呈时间依赖性（均P〈0.05）。与B组相比，C组FoxO1 mRNA及蛋白表达升高，p-FoxO1/FoxO1降低，TGF-β1表达减少，p-Smad3/Smad3降低，nephrin表达增多，desmin表达减少（均P〈0.05）。D组与B组相比，FoxO1 mRNA及蛋白表达降低，p-FoxO1/FoxO1降低，TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达升高，p-Smad3/Smad3降低，nephrin表达降低，desmin表达升高（均P〈0.05）。
结论
FoxO1可通过抑制TGF-β1/Smad3传导通路的激活，抑制高糖下足细胞发生上皮间质转分化。
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