- 游离二氧化硅诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化的Western blot鉴定
- 目的：探讨游离二氧化硅诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN)发生上皮间质转分化的细胞表面标志物蛋白表达情况.方法：提取SPF级SD大鼠原代巨噬细胞,并常规培养巨噬细胞和RLE-6TN.CCK-8细胞活性实验确定SiO...
- 陈慧婷姚武李娟暴磊王迪岳中正李一平张淼曲雅倩张建会于兴浩郝长付
- 采用MeDIP-seq检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变
- 【目的】采用MeDIP-seq的方法检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变,探讨表观遗传学变化在肺成纤维细胞转分化过程中的机制。【材料和方法】使用组织块法取SD大鼠肺成纤维细胞进行原代培养至6-8代,肺...
- 侯建永陈慧婷李娟刘素娜张红义王迪姚武郝长付
- 关键词：二氧化硅肺成纤维细胞转分化
- 文献传递
- 游离二氧化硅诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化的Western blot鉴定
- 目的：探讨游离二氧化硅(SiO2)诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN)发生上皮间质转分化的细胞表面标志物蛋白表达情况.方法：提取SPF级SD大鼠原代巨噬细胞(AM),并常规培养AM和RLE-6TN.CCK-8细胞染...
- 张健会陈慧婷姚武李娟暴磊王迪岳中正李一平张淼郝长付
- 关键词：游离二氧化硅上皮间质转分化肺泡巨噬细胞
- 采用MeDIP-seq检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变
- [目的]采用MeDIP-seq的方法检测二氧化硅诱导的肺成纤维细胞转分化前后的特异甲基化改变,探讨表观遗传学变化在肺成纤维细胞转分化过程中的机制。[材料和方法]使用组织块法取SD大鼠肺成纤维细胞进行原代培养至6-8代,肺...
- 侯建永陈慧婷李娟刘素娜张红义王迪姚武郝长付
- 关键词：二氧化硅肺成纤维细胞转分化
- 大鼠实验性矽肺中树突状细胞及其相关细胞因子分布规律
- 目的:树突状细胞(dendritic cell,DC)是已知功能最强的抗原呈递细胞,且与巨噬细胞有相近、交叉的结构与功能,推测DC在矽尘识别与摄取、矽肺获得性免疫应答中很可能也是极其重要的效应细胞。初步探讨其在矽肺发生发...
- 于兴浩暴磊郝长付李娟张林王迪陈慧婷李一平张淼岳中正张建会曲雅倩姚武
- 关键词：矽肺树突状细胞细胞因子
- 文献传递
- 大鼠实验性矽肺中树突状细胞及其相关细胞因子分布规律
- 目的：树突状细胞(dendritic cell,DC)是已知功能最强的抗原呈递细胞,且与巨噬细胞有相近、交叉的结构与功能,推测DC在矽尘识别与摄取、矽肺获得性免疫应答中很可能也是极其重要的效应细胞。初步探讨其在矽肺发生发...
- 暴磊郝长付李娟张林王迪陈慧婷李一平张淼岳中正于兴浩张建会曲雅倩姚武
- 大鼠实验性矽肺中树突状细胞分布规律
- [目的]树突状细胞(dendritic cell,DC)是已知功能最强的抗原呈递细胞,且与巨噬细胞有相近、交叉的结构与功能,推测DC在矽尘识别与摄取、矽肺获得性免疫应答中很可能是极其重要的效应细胞.初步探讨其在砂肺发生发...
- 暴磊郝长付李娟张林王迪陈慧婷李一平张淼岳中正于兴浩张建会曲雅倩姚武
- 关键词：矽肺树突状细胞
- 采用ChIP-chip技术分析大鼠肺成纤维细胞转分化前后全基因组蛋白H3K4三甲基化水平的改变被引量：2
- 2016年
- 目的研究经二氧化硅(Si O_2)染毒的肺成纤维细胞(LF)转分化前后全基因组蛋白H3赖氨酸4(H3K4)三甲基化(met3)水平的改变。方法原代培养大鼠肺泡巨噬细胞(AM)和LF,采用transwell共培养,建立共培养模型,用100 mg·L^(-1)游离Si O_2粉尘染毒AM 24 h,收集LF细胞,免疫组织化学法对转分化后的LF进行表型鉴定。采用染色质免疫共沉淀联合芯片技术(Ch IP-chip)对LF全基因组蛋白H3K4met3进行高通量筛选,采用染色质免疫共沉淀-实时荧光定量聚合酶联反应技术(Ch IP-q PCR)验证芯片结果,采用定量逆转录聚合酶联反应技术(q RT-PCR)检测H3K4出现显著差异的m RNA表达水平。结果通过对经Si O_2染毒前后LF全基因组蛋白H3K4met3水平的对比,共筛选出1815个基因存在H3K4显著性差异(Cy3/Cy5比值>2.0或<0.5,Nimble Scan V2.5软件),其中518个基因出现H3K4met3程度增高,1297个基因H3K4met3程度降低。随机挑选2个差异表达基因nfib和kpna3,以Ch IP-q PCR和q RT-PCR方法验证,取得与Cp G岛芯片一致的结果。结论经Si O_2染毒的LF转分化前后全基因组蛋白H3K4met3水平存在显著改变。Ch IP-chip技术有利于进一步揭示矽肺纤维化发生的分子机制,有助于发现新的蛋白标志物和基因干预靶点。
- 刘素娜姚武暴磊李娟张红义侯建勇王迪陈慧婷郝长付
- 关键词：甲基化
- 离二氧化硅诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化的Western blot鉴定
- 目的:探讨游离二氧化硅（SiO2）诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（RLE-6TN）发生上皮间质转分化的细胞表面标志物蛋白表达情况。方法:提取SPF级SD大鼠原代巨噬细胞（AM）,并常规培养AM和RLE-6TN。CCK-8细胞染...
- 张健会陈慧婷姚武李娟暴磊王迪岳中正李一平张淼郝长付
- 关键词：游离二氧化硅上皮间质转分化肺泡巨噬细胞
- 文献传递
- TGF-β1致人胚肺成纤维细胞转分化差异基因的生物信息学分析被引量：4
- 2018年
- 目的分析转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人胚肺成纤维细胞(IMR-90细胞)微阵列芯片差异表达基因(DEGs),筛选与成纤维细胞转分化相关的潜在关键基因和信号通路。方法从高通量基因表达数据库下载TGF-β1刺激IMR-90细胞的基因表达微阵列芯片数据集GSE17518,采用GENE-E软件进行DEGs筛选,将DEGs导入DAVID网络数据库进行基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析;同时采用相互作用基因库检索工具数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,筛选核心基因,并构建蛋白交互作用模块。结果共筛选出394个刺激相关DEGs,其中,上调基因223个,下调基因171个。GO分析显示,DEGs广泛参与细胞质、细胞膜、细胞外基质(ECM)以及外泌体等组分构成,调控ECM形成、细胞迁移与粘附、细胞增殖与凋亡等生物学功能;KEGG通路分析结果显示,DEGs主要富集于细胞的黏着斑、ECM-受体相互作用、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)等信号通路;PPI网络筛选出10个核心基因分别为核仁抗原2(NOP2)、琥珀酸脱氢酶B、谷氨酰-脯氨酰-tRNA合成酶(EPRS)、FtsJ同系物3(FTSJ3)、前折叠蛋白亚基4、Ras相关型C3肉毒杆菌毒素基质2、信号识别颗粒受体β亚单位、琥珀酸-辅酶A-GDP结合蛋白β亚基、短小杆菌RNA结合家族成员3(KIAA0020)、一般性囊泡转运因子p115;其中NOP2、EPRS、FTSJ3、KIAA0020主要分布于M1模块,NOP2是M1模块中节点数最高的核心基因。结论共筛选出与TGF-β1刺激相关的10个核心差异基因以及7条信号通路,其中黏着斑、ECM-受体相互作用、PI3K-Akt信号通路以及基因NOP2、EPRS、FTSJ3、KIAA0020可能为包括矽肺在内的多种肺纤维化疾病发生发展过程中成纤维细胞异常激活的机制研究提供新的方向。
- 岳中正暴磊王迪张淼李一平于兴浩曲雅倩张建会姚武郝长付
- 关键词：肺纤维化转化生长因子-Β1差异表达基因
