王姗姗
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
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- 过表达基质细胞衍生因子1基因促进骨髓间充质干细胞增殖和迁移被引量：6
- 2018年
- 背景:基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor,SDF-1)/CXCR4轴不仅能够促进骨髓间充质干细胞向损伤组织迁移,而且具有抑制骨髓间充质干细胞凋亡、增加骨髓间充质干细胞存活率及增殖活性等作用。目的:建立慢病毒介导的稳定过表达SDF-1α的骨髓间充质干细胞系,在体外观察其对骨髓间充质干细胞增殖和迁移的影响。方法:构建过表达SDF-1α重组慢病毒载体(pNL-SDF-1α-IRES_2-EGFP),并以空载体质粒pNL-IRES_2-EGFP、基因沉默质粒GV-118-SDF-1α-siRNA作为实验对照,分别转染293T细胞和骨髓间充质干细胞,建立稳定过表达SDF-1α的骨髓间充质干细胞系:SDF-1α-BMSCs组、null-BMSCs组和siRNA-BMSCs组;采用RT-PCR、Western Blot方法检测SDF-1αmRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测骨髓间充质干细胞的增殖能力;Transwell迁移实验检测SDF-1α对骨髓间充质干细胞迁移能力的影响。结果与结论:(1)成功构建pNL-SDF-1α-IRES_2-EGFP质粒,经测序结果表明pNL-SDF-1α-IRES_2-EGFP重组质粒构建成功;(2)慢病毒转染48 h后可见293T细胞和各组骨髓间充质干细胞强烈表达EGFP;(3)SDF-1α-BMSCs组高效表达SDF-1α,siRNA-BMSCs组SDF-1α表达明显被抑制;(4)SDF-1α-BMSCs组的细胞增殖能力增强,SDF-1α可明显促进骨髓间充质干细胞的跨膜迁移。在抗SDF-1α多抗作用后各组细胞迁移指数明显下降;(5)结果可见,慢病毒载体可介导外源性基因SDF-1α在大鼠骨髓间充质干细胞中高效表达,并促进骨髓间充质干细胞的增殖和迁移。
- 陈少强吴碧莲王姗姗黄海辉
- 关键词：趋化因子CXCL12慢病毒感染细胞运动
- 过表达SDF-1α促进骨髓间充质干细胞迁移的体外研究
- 目的： 研究表明，SDF-1/CXCR4轴不仅能够促进移植后的BMSCs向损伤组织迁移，而且具有抑制BMSCs凋亡、增加BMSCs的存活率及增强BMSCs增殖活性等作用，从多方面提高BMSCs向损伤组织的归巢效率。因此...
- 王姗姗
- 关键词：基质细胞衍生因子1转基因技术
- 文献传递
