程晓芳
- 作品数：10 被引量：21H指数：2
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金广西科技基础条件平台建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 广西巴马小型猪Glut4基因克隆和真核表达研究
- 葡萄糖转运蛋白4(Glut4)介导的葡萄糖转运是肌糖代谢的主要限速步骤.本研究旨在克隆广西巴马小型猪Glut4基因,构建真核表达载体,转染细胞研究Glut4功能.以广西巴马小型猪背最长肌组织作为实验材料,通过RT-PCR...
- 刘嘉琪程晓芳周亭亭严雪瑜韦玲静蒋钦杨黄艳娜
- 关键词：葡萄糖转运蛋白4基因克隆真核表达
- 广西巴马小型猪Neuritin基因克隆与生物信息学分析及真核表达载体的构建被引量：1
- 2017年
- 本研究旨在通过克隆广西巴马小型猪的Neuritin基因并进行生物信息学分析,为后续对Neuritin的研究奠定基础。实验成功获得Neuritin基因的编码区序列,并对Neuritin基因编码区序列和预测蛋白序列进行分析。结果表明,广西巴马小型猪的Neuritin基因编码142个氨基酸,其中含有2个磷酸化位点和2个跨膜信号结构以及1个结构保守域。通过双酶切技术成功获得重组质粒pEGFP-N1-Neuritin并转染到N2a细胞中,在24 h拍照发现N2a细胞发出荧光,证明Neuritin真核表达载体构建成功。
- 李龙司景磊夏攀洁何剑雄吴延军程晓芳吴敏徐文文兰干球
- 关键词：广西巴马小型猪
- 蛋白酶抑制剂E-64对猪卵母细胞体外成熟的影响
- 2016年
- 为了研究猪卵母细胞成熟过程中在成熟液中添加蛋白酶抑制剂E-64对猪卵母细胞体外成熟的影响,试验采用在成熟液中添加不同浓度的E-64进行体外培养44 h后统计成熟率,计算卵母细胞的成熟率,确定最佳浓度为10μmol/L。将10μmol/L组、未添加组的卵母细胞进行固定、染色,鉴定卵母细胞核成熟情况。结果表明:在猪卵母细胞成熟液中添加10μmol/L的E-64,成熟率和核成熟率显著高于未添加组,并能显著提高猪孤雌卵母细胞的分裂率和囊胚发育率。
- 司景磊张笠黄玥萌程晓芳李龙龙开旭夏利郭亚芬蒋钦杨
- 关键词：卵母细胞体外成熟蛋白酶抑制剂
- 广西巴马小型猪miR-181b慢病毒表达载体的构建和鉴定被引量：1
- 2016年
- 本试验旨在构建广西巴马小型猪miR-181b慢病毒表达载体,以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,利用PCR扩增miR-181b前体序列,构建重组质粒p LV-miR-181b,经PCR和测序鉴定,阳性重组质粒转染C2C12细胞,荧光倒置显微镜下检测转染效率。结果显示,miR-181b前体序列长度为377 bp,与预期片段序列长度一致。将鉴定为阳性的miR-181b重组质粒转染C2C12细胞48 h后,在荧光显微镜下检测到较强的绿色荧光蛋白的表达,说明重组miR-181b质粒在C2C12细胞中具有较高的表达活性。本研究成功构建了具有高表达活性的miR-181b重组慢病毒表达载体,为研究miRNA-181b调控骨骼肌生长发育的功能机制提供实验基础。
- 吴敏黄建芳徐文文程晓芳郭晓萍杨秀荣郭亚芬兰干球
- 关键词：广西巴马小型猪慢病毒载体骨骼肌
- 广西巴马小型猪miR-423-5p基因慢病毒载体构建和鉴定及其在骨骼肌中的表达被引量：1
- 2015年
- 本试验的目的在于检测广西巴马小型猪骨骼肌中mi R-423-5p基因的表达情况及构建p LV-mi R-423-5p慢病毒载体并在C2C12细胞中进行验证。通过q RT-PCR方法检测背最长肌中mi R-423-5p的表达,设计特异性引物对mi R-423-5p基因的前体序列进行扩增并定向克隆到慢病毒载体p LV-CMV-mcs-3xflag-EF1-GFP(p LV)上,鉴定正确的重组质粒用脂质体转染法转染进C2C12细胞,q RT-PCR检测mi R-423-5p的表达情况。结果表明广西巴马小型猪背最长肌中mi R-423-5p的表达水平随着月龄的增长而不断上升,同时成功构建了p LV-mi R-423-5p慢病毒载体。该项研究为进一步寻找mi R-423-5p基因调控骨骼肌生长发育的机制提供理论基础,对肉质性状分子改良提供有益的线索。
- 黄建芳吴敏程晓芳徐文文吴延军蒋钦杨杨秀荣郭亚芬兰干球
- 关键词：广西巴马小型猪骨骼肌MI慢病毒载体
- 广西巴马小型猪MCP-1、MMP-9基因启动子区SNP位点与动脉粥样硬化相关血清指标的关联分析被引量：2
- 2015年
- 本研究目的是分析广西巴马小型猪MCP-1和MMP-9基因启动子区SNP位点与血清指标的关联性,筛选可能与动脉粥样硬化相关的高风险分子标记,为后续培育广西巴马小型猪动脉粥样硬化疾病模型易感家系打下基础。采用PCR-RFLP对90头正常饲喂的广西巴马小型猪的MCP-1和MMP-9基因启动子区SNP位点进行分型,统计该位点的基因型频率和等位基因频率,比较分析基因型频率与动脉粥样硬化相关血清指标的关联性。结果显示,广西巴马小型猪MMP-9基因-1267位点、-1287位点和MCP-1基因-1782位点均存在3种基因型:AA型、AG型和GG型。MCP-1基因-1782位点和MMP-9基因-1267位点以GG型为优势基因型,MMP-9基因-1287位点以AG型为优势基因型。MMP-9基因两个突变位点的各基因型个体的血清指标及其分析值之间差异均不显著。MCP-1基因-1782位点AG型个体血清LDL平均值和LDL/HDL比值均显著高于GG型个体(p<0.05),AG型个体HDL和TC浓度均值、AI值稍高于GG型个体,但差异均不显著。MCP-1基因AG型个体患动脉粥样硬化疾病的风险高,可作为培育建模易感家系的分子标记。
- 周亭亭徐文文程晓芳宋少锐蒋钦杨郭亚芬兰干球蒋和生
- 关键词：广西巴马小型猪MCP-1MMP-9动脉粥样硬化
- 陆川猪脂联素基因的克隆及生物信息学分析被引量：5
- 2016年
- 脂联素(AdipoQ)是脂肪组织分泌的一种有活性的物质,其在调节脂肪代谢、脂肪沉积以及对抗胰岛素抵抗、炎症反应、动脉粥样硬化等方面发挥着重要的作用。本研究以Gen Bank家猪脂联素基因序列为参考,利用Oligo7自行设计一对引物,以广西陆川猪皮下脂肪组织cDNA为模板,克隆获得了AdipoQ基因编码区序列(CDS)。序列分析结果显示,陆川猪AdipoQ基因CDS区长为732 bp,可编码242个氨基酸,分子量为26 400.7 Da。信号肽预测显示陆川猪Adipo Q蛋白含有编码17个氨基酸的信号肽,这一预测结果也印证了前人的研究,进一步证实了脂联素为一种分泌蛋白的说法。与GenBank已公布的长白猪(DQ164208.1)、大白猪(DQ164207.1)、广西巴马小型猪(JF730719.1)、梅山猪(DQ164209.1)这四种猪AdipoQ基因CDS区进行序列比较,发现不同猪种间略有差异,而同源性均达98.9%以上。本研究还对克隆获得的陆川猪AdipoQ基因编码蛋白进行了高级结构预测,为后期研究AdipoQ基因调控陆川猪脂肪沉积和肌肉生长发育的分子机制提供理论基础。
- 程晓芳李莉周亭亭韦玲静黄艳娜蒋钦杨郭亚芬兰干球
- 关键词：陆川猪脂联素克隆生物信息学分析
- 聚乙烯醇和卵泡液添加方式对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
- 2015年
- 本试验研究目的在于探讨在猪卵母细胞体外成熟(IVM)过程中,聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)和猪卵泡液(porcine follicular fluid,PFF)添加方式对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活早期胚胎发育的影响。卵母细胞、卵丘细胞复合体(COCs)在含有HCG和PMSG的改良TCM-199+10%FBS+10%猪卵泡液(PMH-PFF)或改良TCM-199+10%FBS+0.1%PVA(PMH-PVA)成熟液中培养22~23 h;再移至无HCG和PMSG的PM-PFF或PM-PVA的成熟液中成熟培养至44 h。试验:(1)处理组1:使用PMH-PFF培养22~23 h后,更换PM-PFF继续培养至44 h;(2)处理组2:使用PMH-PFF培养22~23 h后,更换PM-PVA继续培养至44 h;(3)处理组3:使用PMH-PVA培养22~23 h后,更换PM-PVA继续培养至44 h;(4)处理组4:使用PMH-PVA培养22~23 h后,更换PM-PFF继续培养至44 h。将在不同成熟体系中IVM 44 h后的卵母细胞进行固定染色,鉴定卵母细胞核和细胞质成熟情况;对在不同处理组的成熟液中成熟培养44 h的卵母细胞进行孤雌激活后放入PZM-3中培养,分别于第2天、第7天统计分裂率和囊胚发育率。结果表明:经44 h成熟培养后,处理组1卵母细胞核成熟率(42.00%)显著低于处理组2(64.67%)、处理组3(69.00%)、处理组4(64.33%)核成熟率(p<0.05)。处理1、处理2、处理4的卵母细胞皮质颗粒分布类型Ⅲ比例(62.00%/54.67%/46.67%)均高于处理组3(28.67%),且处理组1、处理组2卵母细胞皮质颗粒分布类型Ⅲ比例显著高于处理组3卵母细胞皮质颗粒分布类型Ⅲ比例(p<0.05)。处理组1、处理组2、处理组4孤雌分裂率(81.92%/76.00%/73.33%)均高于处理组3(69.00%)。处理组3孤雌激活囊胚率(9.67%)显著低于处理组1(23.33%)、处理组2(25.00%)、处理组4(23.00%)(p<0.05)。结果表明,在本研究条件下,处理组2的各项指标均优于其它组,IVM液中添加猪卵泡液培养22~23 h后更换添加有PVA的IVM液继续培养至44 h,更有利于促进IVM猪卵母细胞核成熟、胞质成熟以及早期孤雌胚胎发育。
- 张笠沈开元黄玥萌司景磊程晓芳蒋钦杨刘庆友郭亚芬郭亚芬兰干球
- 关键词：卵母细胞体外成熟
- 广西巴马小型猪Glut4基因克隆和真核表达被引量：1
- 2016年
- 葡萄糖转运蛋白4(Glut4)是调控肌肉葡萄糖代谢的关键因子。本研究旨在克隆广西巴马小型猪Glut4基因,构建真核表达载体,转染C2C12细胞,研究Glut4功能。以广西巴马小型猪背最长肌组织作为实验材料,通过RT-PCR技术扩增出Glut4基因编码序列,连接入PMD18-T克隆载体,测序鉴定正确后提取克隆质粒。用Bam HⅠ和HindⅢ限制性内切酶双酶切克隆质粒,获得Glut4片段,连接至p EGFP-N1载体上,构建p EGFP-N1-Glut4表达载体,提取p EGFP-N1-Glut4重组质粒转染至C2C12细胞,观察细胞荧光表达情况,并检测转染24 h和48 h时培养液的葡萄糖水平。实验结果表明:广西巴马小型猪Glut4基因编码区序列长1 530 bp,编码509个氨基酸,与参考序列(序列号为EU590115.1)的同源性为99.7%;重组质粒转染C2C12细胞能表现出绿色荧光。转染24 h和48 h时,p EGFP-N1-Glut4组细胞培养液的葡萄糖浓度均显著低于空载体组(16.08±0.49 vs.17.13±0.13,4.93±0.19 vs.6.28±0.12,p<0.01)。在C2C12成肌细胞中过表达广西巴马小型猪Glut4基因,能增加细胞的葡萄糖摄入量。
- 刘嘉琪程晓芳周亭亭严雪瑜韦玲静司景磊蒋钦杨黄艳娜
- 关键词：广西巴马小型猪基因克隆真核表达
- 山羊产羔性状相关基因研究进展被引量：10
- 2018年
- 随着生活水平的不断提高,人们膳食营养结构也发生了很大的改变,对肉类制品的种类和数量的需求也逐渐加大。山羊肉因其营养价值高、纤维细嫩而逐渐受到人们的喜爱。山羊的产羔性状是山羊繁殖性状中重要的经济性状,直接关系到养羊产业的经济收益,但肉羊生产的繁殖成本较高,且产羔数普遍偏低,严重制约着养羊产业的发展,因此通过有效的育种技术提高山羊的产羔数是山羊育种工作的重点。山羊产羔性状是由多基因控制的数量性状,遗传力较低,采用传统的育种技术对其改良的效率低、准确性差、成本高、耗时长,很难取得显著的效果。而分子辅助育种技术因对单核苷酸多态性位点（SNP）的筛选操作简便,统计检验效率和准确率高,结果便于实践应用且适用范围广,被国内外许多育种学家所热衷。文章对近年来国内外学者报道的羊多羔性状相关基因及其分子标记进行概述,为后续通过分子辅助育种技术培育多羔的山羊品种提供参考。
- 邹辉崔悦悦夏琴程晓芳吴延军张名媛廖顺连韦英明蒋钦杨
- 关键词：山羊产羔性状分子育种
