张守华
- 作品数：19 被引量：89H指数：6
- 供职机构：江西省儿童医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 橙汁与巧克力载体铁剂改善缺铁性贫血的实验(英文)被引量：1
- 2006年
- 背景:缺铁性贫血是全世界发病率最高的营养缺乏性疾病之一,其中婴幼儿为易发人群之首。缺铁性贫血已成为目前急待解决的最为重要的营养问题之一。目的:观察巧克力载体铁剂加橙汁对缺铁性贫血模型大鼠的复健作用。设计:随机对照动物实验。单位:南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养卫生实验室。材料:实验于2006-03/06在南方医科大学公卫学院营养卫生实验室完成。选用健康清洁级SD大鼠60只,由南方医科大学动物中心提供(许可证号:2002-0092005A047)。方法:①缺铁性贫血模型建立:在60只大鼠中随机数字表法抽取20只(雌雄各半)作为对照组,其余40只为模型组。对照组食常规鼠饲料,饮自来水;模型组采用AOAC改良的低铁饲料配方辅以尾静脉放血建立缺铁性贫血模型。喂养3周后,模型组平均血红蛋白浓度降至90g/L左右,提示模型建立成功。两组大鼠分别按随机数字表法处死10只(雌雄各半)。实验前及实验3周后称大鼠体质量,测其血红蛋白浓度(氰化高铁血红蛋白法)、红细胞计数(直接法)、血清铁(微粒子免疫发光法及配套试剂盒)及血清转铁蛋白受体(ELISA法及配套试剂盒)浓度。②恢复实验:对照组余下的10只大鼠作为正常对照组;喂常规鼠饲料,饮自来水。将模型组余下的30只大鼠按随机数字表法分为3组,每组10只,雌雄各半,分别为模型对照组、硫酸亚铁组及巧克力橙汁组。模型对照组每日以蒸馏水灌胃;硫酸亚铁组每日以硫酸亚铁溶液灌胃;巧克力橙汁组每日以巧克力载体铁剂加橙汁灌胃。其中后两组灌胃液的含铁量均为6mg/(kg·d)。干预40d后,终止实验。测大鼠血红蛋白浓度、红细胞计数、血清铁、血清转铁蛋白受体含量及细胞浆蛋白质的顺乌头酸酶活性(原子吸收分光光度法)。并计算巧克力载体铁剂加橙汁的生物利用率。主要观察指标:①各组大鼠实�
- 雷蕾罗海吉邓红朱航张守华
- 关键词：贫血饮料抗坏血酸
- 酒精性肝病105例临床分析被引量：11
- 2007年
- 目的:探讨酒精性肝病(ALD)的发病特点、临床表现及预后。方法:回顾性分析105例ALD患者的临床资料。结果:ALD患者以男性为主,日饮酒量45～600g,平均年限21年。酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化发病年龄均在41～50岁达高峰。ALD的血清酶学水平有不同程度的异常,以AST、GGT、AST/ALT升高显著。结论:ALD发病有逐年增多趋势、临床表现无特异性,对于有饮酒嗜好的病人,应定期对AST、AST/ALT、GGT、TBIL等生化指标进行监测,从而争取早期诊断、早期治疗、改善预后。
- 苏俊廖彩仙周杰唐浩张春兴张守华
- 关键词：肝疾病酒精性
- 小鼠骨髓CD90+、CD34+、CD117+和Sca-1+细胞的肝干细胞潜能比较被引量：3
- 2006年
- 目的比较的小鼠CD90+Lin-、C34+Lin-、CD117+Lin-和Sca-1+Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能。方法供体为纯系BALB/C雄性小鼠,应用免疫磁珠分选法获取CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-和Sca-1+Lin-骨髓细胞。受体为35Gy全肝照射处理后的同龄同系BALB/C雌性小鼠,A、B、C、D组小鼠分别接受CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-骨髓细胞移植。移植后30天活杀小鼠,取肝进行Y染色体原位分子杂交与白蛋白免疫组织化学联合检测。结果各组小鼠肝组织中都可以检测到Y染色体和白蛋白均呈阳性的双阳性细胞,C组的双阳性细胞数量显著多于其它各组。结论CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-骨髓细胞都具有肝干细胞潜能,其中CD117+Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能最大、形成肝细胞的能力量强。
- 廖彩仙唐浩周杰苏俊张春兴张守华
- 关键词：小鼠骨髓细胞骨髓源性肝干细胞
- 高铁小鼠模型的构建及铁代谢相关指标的观察(英文)被引量：6
- 2007年
- 背景:近年来,流行病学研究发现运铁蛋白饱和度或血清铁蛋白水平升高与癌症、冠心病、糖尿病、帕金森病、肝病和免疫系统疾病的发病有关。由此提出摄入过量的铁可能对人体健康产生不利影响。目的:采用全价颗粒饲料辅以定期定量腹腔注射右旋糖酐铁快速建立高铁动物模型,观察动物体内铁水平的高低及脏器系数的变化。单位:南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系。材料:实验于2006/05在南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系实验室进行。选择昆明小鼠40只,SPF级,雌雄各半,体质量18～22g,由南方医科大学动物实验中心提供。随机分为对照组(腹腔注射生理盐水)和高铁模型组(腹腔注射生理盐水),其中对照组10只,高铁模型组30只。高铁模型组又分为低剂量(腹腔注射质量浓度6.25g/L的右旋糖酐铁),中剂量(腹腔注射质量浓度12.5g/L的右旋糖酐铁)和高剂量(腹腔注射质量浓度25g/L的右旋糖酐铁)3个亚组,每组10只。全价颗粒饲料,含铁量为370mg/kg,购自南方医科大学动物实验中心。右旋糖酐铁制剂,规格为2mL含50mg元素铁,浙江瑞安市制药厂出品,批准文号为国药准字H33021758。SOD、MDA试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。方法:将各组小鼠雌雄分养于塑料不锈钢笼内,室内温度(23±3)℃,自由进食,喂以去离子水。低剂量组,中剂量组和高剂量组小鼠分别以不同质量浓度的右旋糖酐铁隔日腹腔注射,0.8mL/次;对照组小鼠隔日腹腔注射生理盐水,0.8mL/次。注射6周。观察小鼠的营养状况。6周末,将所有小鼠处死。用原子吸收光谱法和全自动生化仪分别测定小鼠心、肝、脾、肺、肾各脏器中铁的含量和血清中铁的含量,并对各脏器做病理组织学检查,计算肝和脾的脏器系数,测定血清中的丙二醛的含量以及超氧化物歧化酶的活性。主要�
- 朱航罗海吉邓红雷蕾张守华
- 关键词：动物模型病理状态脂质过氧化作用
- 免疫磁珠分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit^+lin^-被引量：4
- 2007年
- 目的:利用免疫磁性细胞分选系统分离纯化骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-。方法:实验于2006-07/08在南方医科大学实验动物中心完成。6～8周龄的SPF级纯系BALB/C雄性小鼠10只,体质量18～20g。收集小鼠股骨骨髓细胞,利用免疫磁性细胞分选系统,通过两步法分选纯化c-Kit+lin-:将获取的lin-细胞悬液8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按80μL/107加入Buffer重悬细胞。按20μL/107加生物素抗体磁珠,混匀,4℃冰箱孵育15min,按1mL/107加入Buffer洗细胞1次,8℃条件下1500r/min离心10min,弃上清,按500μL/108加入Buffer重悬细胞。Buffer500μL润MS柱,悬液过柱后,Buffer500μL/次洗柱3次,柱子脱离磁场,加1mLBuffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit+lin-细胞,收集到c-kit+lin-细胞,细胞计数。取2.0×106个细胞分成10等份,流式细胞仪分析c-Kit+lin-细胞纯度,计算回收率,评估纯化效率,苔盼兰染色检测纯化前后的细胞活力。计算活细胞的百分率。细胞纯度和细胞回收率的计算:细胞纯度=分离产物中的阳性细胞数/分离细胞的总细胞数×100%,细胞回收率=分离产物中的阳性细胞数/起始标本阳性细胞总数×100%。结果:10只小鼠均进入结果分析。利用免疫磁性细胞分选系统分选出的骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-细胞纯度和回收率分别为(77.98±2.34)%,75.40%,纯化前后细胞活力不受影响。结论:免疫磁性细胞分选系统能有效分选骨髓衍生肝干细胞亚群c-Kit+lin-,纯度和回收率高,且不影响细胞活力。
- 张春兴廖彩仙张守华苏俊周杰朱槿肖菊花
- 关键词：骨髓免疫磁珠
- 白细胞介素3对c-kit^+Lin^-细胞的增殖作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨在无血清无基质的条件下,白细胞介素3(IL-3)和因子组合的不同浓度对扩增c-kit+Lin-细胞的影响。方法采用免疫磁珠法分离小鼠骨髓c-kit+Lin-细胞,在干细胞因子(SCF)、肝细胞生长因子(HGF)、FLt-3配基(FL)、促血小板生成素(TPO)和白血病抑制因子(LIF)组合中添加不同浓度的IL-3培养7d,检测细胞总数、c-kit+Lin-细胞扩增倍数及细胞凋亡率。结果未加IL-3(A组),10ng/mlIL-3(B组),20ng/mlIL-3(C组)和40ng/mlIL-3组(D组)均可显著扩增c-kit+Lin-细胞,扩增倍数7～19倍不等。随剂量加大,虽然细胞总数上升,但是超过一定浓度后c-kit+Lin--细胞扩增反而不明显。D组细胞总数扩增245.41倍,但c-kit+Lin-细胞扩增仅为15.80倍,明显低于C组(扩增c-kit+Lin-细胞为18.75倍)(P<0.05)。但D组细胞凋亡率最低,仅为4.66%。结论IL-3能协同SCF+HGF+FL+TPO+LIF有效的扩增c-kit+Lin-细胞,其表型并不受影响;但过高剂量反而促使干细胞分化。
- 张春兴廖彩仙张守华苏俊赖勇强周杰
- 关键词：肝细胞生长因子干细胞因子
- 富硒酵母对铜负荷导致小鼠肝损伤的保护作用被引量：9
- 2009年
- 目的探讨富硒酵母对小鼠铜负荷致肝损伤的保护作用。方法采用过量(512mg/kgbw·d)硫酸铜灌胃致小鼠肝损伤后,给予低、中、高(20、40、60mg/kgbw·d)的富硒酵母4w,观察补硒对肝脏丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及血清和肝组织中铜含量的影响,并进行肝脏病理组织学检查和肝细胞凋亡检测,同时测定血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性。结果过量硫酸铜能导致小鼠肝脏损伤,与低、高剂量富硒酵母添加组相比,补充中剂量富硒酵母能显著缓解这种损伤,表现为血清和肝组织的铜含量显著降低,肝组织中SOD、GSH-Px活性增强,MDA含量减少,肝细胞凋亡显著减少。结论适量的富硒酵母能降低铜负荷导致的小鼠肝功能损伤,其机制可能与减轻铜离子介导的脂质过氧化有关。
- 李万立张守华查龙应罗海吉
- 关键词：富硒酵母脂质过氧化凋亡
- 小鼠骨髓源性肝干细胞筛选及其分化潜能的研究被引量：5
- 2007年
- 目的从骨髓细胞中筛选肝干细胞。方法供体为纯系BALB／C雄性小鼠，从其骨髓细胞中分离CD34^＋Lin^-、CD90^＋Lin^-、CD117^＋Lin^-、Sca-1^＋Lin^-细胞。受体为35Gy全肝照射预处理的同龄同系BALB／C雌性小鼠，A、B、C、D组分别为CD34^＋Lin、CD90^＋Lin^-、CD117^＋Lin^-、Sca-1^＋Lin^-细胞移植。术后30d活杀小鼠，取肝作小鼠Y染色体性别决定基因Sry的原位分子杂交和白蛋白的免疫组化染色，镜下观察并记录双阳性细胞数量。结果A、B、C、D组小鼠肝组织中均检测到双阳性细胞，其中C组的双阳性细胞数量显著多于其它各组。结论CD34^＋Lin^-、CD90^＋Lin^-、CD117^＋Lin^-、Sca-1^＋Lin^-细胞都含有骨髓源性肝干细胞、都有分化形成肝细胞的潜能，但CD117^＋Lin^-细胞分化形成肝细胞潜能最大。
- 廖彩仙唐浩周杰苏俊张守华张春兴
- 关键词：骨髓源性肝干细胞分化潜能细胞筛选
- 构建适合骨髓衍生肝干细胞移植的小鼠酒精性肝纤维化模型被引量：2
- 2007年
- 目的:建立适合骨髓衍生肝干细胞移植的小鼠酒精性肝纤维化模型,为移植骨髓衍生肝干细胞对酒精性肝损伤修复的研究提供进一步探讨的价值。方法:实验于2006-02/06在南方医科大学实验动物中心完成。取Balb/c雌性小鼠100只,SPF级,5～6周龄,体质量15～18g,随机区组法分为造模组92只,对照组8只。用白酒灌胃法建立小鼠酒精性肝纤维化模型。造模组于灌胃的第4,8,12,16周末分别随机选取6只小鼠,眼球采血后,颈椎脱臼处死,取出肝脏,以100g/L的甲醛固定,石蜡包埋切片,苏木精-伊红染色和苦味酸-酸性复红染色,光镜观察病理变化。血标本用于测定生化及肝纤维化指标。对照组以等量的蒸馏水灌胃,于实验的第16周末处死,处理同造模组。组间比较采用单因素方差分析。结果:纳入Balb/c雌性小鼠100只,实验中造模组共23只小鼠死亡,多为急性和亚急性死亡。对照组全部成活。①灌胃初期,造模组小鼠出现精神萎靡等现象,实验开始4周后上述症状减轻,对照组小鼠则食欲正常,无嗜睡现象。②在实验刚开始1周时小鼠体质量(15.67±0.98)g,与实验开始时(16.38±0.58)g相比呈明显负增长(P<0.05)。第4,8,12,16周称质量时,造模组小鼠体质量[(16.17±0.91),(17.23±1.39),(18.27±0.85),(19.31±0.95)g]均明显低于对照组[(18.31±0.57),(19.52±0.85),(20.56±0.86),(21.41±0.95)g],(P<0.05)。③对照组小鼠肝脏表面光滑细润、色红等。造模组小鼠肝脏色泽较正常肝脏暗淡,表面充血,肝脏呈增大趋势。造模组小鼠的肝重比(肝脏湿重/小鼠体质量×100%)均大于对照组。④造模组4周时可见轻度酒精性脂肪肝病理改变,12周时酒精性肝炎改变加重并出现了纤维组织增生,16周时肝纤维化已明显形成。⑤不同时间点与对照组相比,血清中天冬氨酸氨基转氨酶、丙氨酸氨基转氨酶、天冬氨酸氨基转氨酶/丙氨酸氨基转氨酶、三酰甘油均呈升高的
- 苏俊廖彩仙周杰唐浩张守华张春兴
- 关键词：肝纤维化病理学
- 骨髓衍生肝干细胞亚群Thy-1.2^+lin^-细胞的免疫磁珠分选被引量：2
- 2008年
- 张春兴廖彩仙张守华苏俊周杰
- 关键词：免疫磁珠纯化
