李瑞
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：北京大学药学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生文学更多>>
- FRET技术研究PEG-PCL胶束跨MDCK细胞单层转运的完整性被引量：5
- 2016年
- 本文旨在研究聚乙二醇-聚ε-己内酯[poly(ethylene glycol)-co-poly(ε-caprolactone),PEG-PCL]胶束跨犬肾极性上皮细胞(madin-darby canine kidney,MDCK)单层转运后的完整性。通过化学键合的方法将异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate isomer I,FITC)连接于PEG-PCL上,制备荧光标记的载体材料PEG-PCLFITC,并采用荧光光谱法进行鉴定。采用薄膜水化法制备两种荧光标记的胶束:一种是同时物理包载荧光共振能量转移(F?rster resonance energy transfer,FRET)荧光对3,3'-dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate(DiO)与1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate(Di I)的胶束(DiO-DiI-M);另一种是含有部分PEG-PCL-FITC载体材料并物理包载Di I的胶束(FITC-DiI-M)。采用动态光散射法测定胶束的粒径,荧光光谱法测定胶束在孵育介质中的稳定性。采用激光共聚焦扫描显微镜和FRET技术研究这两种荧光标记的胶束跨MDCK极性上皮细胞单层的完整性。结果表明,FITC与PEG-PCL被成功连接。DiO-DiI-M与FITC-DiI-M的粒径大小一致,均约为30 nm,多分散度良好,且两种胶束在4 h内可在孵育介质中以稳定形式存在,基本无释放。通过比较Transwell层和接收层的FRET效率和皮尔森共定位系数(Person’s coefficient)可知,1 h时,两种胶束的FRET效率与Person’s系数在Transwell层和接收层间基本不变,但4 h时,接收层FRET效率与Person’s系数明显下降,同时FITC-DiI-M下降的幅度大于DiO-DiI-M,说明1 h时胶束基本保持完整且能以完整形式从极性上皮细胞基底侧排出并被接收室中的细胞摄取,4 h时部分胶束已在与细胞单层相互作用的过程中被破坏,以完整形式跨膜的比例有所下降。
- 李瑞宋晓宁张华代文兵何冰郑颖张强王学清
- 关键词：胶束完整性荧光共振能量转移
- pH和靶头密度对FcBP修饰的PEG-PCL胶束在Caco-2细胞上摄取与外排的影响被引量：2
- 2017年
- 利用小肠上皮细胞顶膜侧和基底侧pH的差异以及新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor,FcRn)与其配体结合的pH依赖特性可能增加配体修饰的纳米载体从小肠上皮细胞顶膜侧向基底侧的转运,从而促进药物的吸收。本课题制备了靶向于FcRn的短肽FcBP(IgG Fc段结合肽,IgG Fc domain-binding peptides)修饰的聚乙二醇-聚ε-己内酯[poly(ethyl ethylene phosphate)-co-poly(ε-caprolactone),PEG-PCL]胶束并在人克隆结肠腺癌细胞(human colon adenanocaricinoma cell lines,Caco-2)上考察了pH和靶头密度对胶束摄取与外排过程的影响。采用薄膜水化法制备不同靶头修饰密度的包载香豆素6(coumarin 6,C6)的PEG-PCL主动胶束和被动胶束,并用激光粒度测定仪测定其粒径,透射电镜观察其形态,流式细胞术测定各主、被动胶束在不同pH值下的摄取和外排以及FcRn在胶束摄取中的作用。结果表明,PEG-PCL胶束的粒径约为30 nm,FcBP的修饰不影响胶束的粒径。pH和靶头密度都对FcBP修饰的PEG-PCL胶束的摄取有影响。主动胶束在pH 6.0的摄取量显著高于在pH7.4的摄取量,并且在两种pH下主动胶束的摄取量都表现出随靶头密度的增大先增大后减少的趋势。进一步研究胶束的外排表明,胶束在pH 6.0下摄取后可以在pH 7.4环境中外排,外排量与靶头密度有关,其中靶头密度10%的主动胶束外排量最大,显示出较强的跨膜转运递送的潜力。同时,竞争性抑制实验验证了胶束的摄取与配体和受体的作用有关。本研究为应用FcBP修饰的PEG-PCL胶束进行跨膜转运药物打下一定的基础,为纳米载体的设计提供了一定的参考。
- 宋晓宁李瑞张华代文兵何冰郑颖张强王学清
- 关键词：胶束PH
