李志强
- 作品数：19 被引量：38H指数：4
- 供职机构：新疆医科大学更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 泡球蚴腹腔感染小鼠肝脏组织中MAPK通路相关分子表达分析
- 2021年
- 探讨α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA,α-SMA)、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、P38MAPK在泡球蚴腹腔感染小鼠肝脏中的表达及意义。将Balb/c小鼠分为对照组、EM-1组(青海株)、EM-2组(新疆株),将泡状棘球蚴原头节经腹腔注射接种于Balb/c小鼠,对照组腹腔注射等体积的生理盐水。对肝脏标本进行HE染色和Masson染色,检测各组小鼠肝脏组织中α-SMA、ERK1/2、P38MAPK的表达。结果显示,EM-1组、EM-2组均有不同程度的肝损伤,胶原纤维明显增多,EM-1、EM-2组α-SMA、ERK1/2蛋白和mRNA水平高于对照组(P<0.05)。结果表明,新疆株、青海株来源的泡球蚴感染后,小鼠肝组织发生了病理性损伤,伴有大量胶原纤维化的标志物α-SMA的阳性表达,泡球蚴激活了MAPK信号转导途径。
- 杨晨晨李志强熊鑫鑫寿玺段明军魏琴姜涛
- 关键词：Α-平滑肌肌动蛋白细胞外调节蛋白激酶泡球蚴肝脏
- 单核细胞趋化蛋白-1对大鼠心房成纤维细胞增殖及活化的作用被引量：2
- 2023年
- 目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)对大鼠心房成纤维细胞增殖、活化的作用,最佳有效浓度及处理时间。方法取成年SD大鼠心房组织,采用酶消化法分离心房成纤维细胞,观察细胞形态。取第2代对数生长期心房成纤维细胞培养48 h,采用免疫荧光染色法检测波形蛋白(vimentin)、心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、盘状结构域受体2(discoidin domain receptor 2,DDR2)表达。取第2代对数生长期心房成纤维细胞,分为MCP-1对照组和5、10、25、50、100μg/L MCP-1组,5、10、25、50、100μg/L MCP-1组分别加入5、10、25、50、100μg/L重组MCP-1,MCP-1对照组加入等体积DMEM培养基,处理24、48、72、96 h时采用CCK-8法检测6组细胞增殖吸光度(optical density,OD)值。选择细胞增殖OD值最高的处理72 h的50μg/L MCP-1组细胞和MCP-1对照组细胞,采用Western blot法检测α-SMA蛋白相对表达量。结果分离的大鼠心房成纤维细胞呈长纺锤形或多边形,符合成纤维细胞形态学特征。培养48 h,成纤维细胞vimentin和DDR2呈阳性表达,α-SMA呈阴性表达,cTnT呈阴性表达,提示心房成纤维细胞分离成功。处理72 h的50μg/L MCP-1组细胞增殖OD值高于处理24、48、72、96 h其他各组细胞(P<0.05),α-SMA蛋白相对表达量(1.581±0.079)高于MCP-1对照组(1.186±0.084)(t=3.402,P=0.007)。结论大鼠心房成纤维细胞应用50μg/L浓度的重组MCP-1处理72 h时增殖效果最佳,MCP-1可促进大鼠心房成纤维细胞增殖并活化为肌成纤维细胞。
- 王红丽李志强唐婧李秋林高晓明
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1肌成纤维细胞
- 玫瑰黄酮提取物对高脂血症大鼠血脂及单核细胞趋化因子1表达的影响被引量：11
- 2018年
- 目的探讨玫瑰黄酮提取物对高脂血症大鼠血脂及单核细胞趋化因子1(MCP-1)表达的影响。方法SPF级健康SD大鼠60只,随机分为对照组、阳性药物组、模型组及玫瑰黄酮提取物低、中、高剂量组,每组10只。对照组大鼠以标准基础饲料喂养,其余各组均给予高脂饲料喂养12w。药物干预:阳性药物组大鼠给予4mg/kg体质量辛伐他汀,对照组和模型组大鼠给予同等体积生理盐水,玫瑰黄酮提取物高、中和低剂量治疗组大鼠分别给予24、12和6mg/kg玫瑰黄酮提取物进行灌胃,每日1次,连续1个月。检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)的含量。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清MCP-1水平。结果与对照组比较,余5组TC、TG、LDL-C水平均明显升高,HDL-C水平明显降低(P <0.05)。玫瑰黄酮提取物中、高剂量组TC、TG水平明显低于模型组,HDL-C水平明显高于模型组(P <0.05);高剂量组TC明显低于低剂量组,中剂量组LDL-C明显高于高剂量组(P <0.05)。6组间MCP-1水平经比较差异有统计学意义(F=4.187,P <0.05)。与对照组比较,模型组大鼠血清MCP-1含量明显升高(P <0.05)。阳性药物组及玫瑰黄酮提取物中、高剂量组MCP-1水平明显低于模型组,玫瑰黄酮提取物低剂量组MCP-1水平高于阳性药物组,玫瑰黄酮提取物中、高剂量组MCP-1水平明显低于玫瑰黄酮提取物低剂量组(P <0.05)。结论玫瑰黄酮提取物能抑制MCP-1的表达,调控脂质代谢,抑制MCP-1参与的炎症过程。
- 贺家勇魏琴李志强魏志勇
- 关键词：高脂血症大鼠
- 犬心房肌细胞分离方法的改良及影响因素探讨被引量：1
- 2020年
- 目的建立高效稳定的犬心房肌细胞分离方法,获得高质量的心房肌细胞,为研究离子通道疾病提供合格的单个细胞。方法健康成年犬12只,一种方法在心脏左回旋支处插管,剪去左右心室以及室间隔组织,含钙台式液灌流(改良方法),另一种方法在心脏左回旋支处插管后固定,无钙台式液灌流,再剪去多余组织(传统方法),灌注胶原酶分离心房心肌细胞。倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态变化,台盼蓝染色法检测细胞存活率,膜片钳技术检测起搏电流。结果两种方法比较,改良方法心房肌细胞的成活率显著高于传统方法(P<0.05),细胞的自主收缩率显著低于传统方法(P<0.05);胶原酶的消化时间显著减少(P<0.05),并且胶原酶的使用量少(P<0.05)。改良方法分离的心房肌细胞形态呈杆状,边缘锐利,横纹清晰状态良好,并可以记录到完整的起搏电流。结论改良方法操作简单,分离心房肌细胞成活率高,可以记录到稳定、完整的起搏电流,节约实验成本和时间,为心房离子通道疾病相关研究提供良好的细胞模型。
- 王红丽李志强范平张格格郭玉君
- 关键词：心房肌细胞细胞分离
- 血小板衍生生长因子BB促进SD大鼠骨髓间充质干细胞的增殖被引量：7
- 2021年
- 背景:研究报道小鼠前破骨细胞分泌的血小板衍生生长因子BB可以促进成骨细胞和成血管细胞形成,而应用血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的最佳浓度及最佳时间尚不明确。目的:探讨血小板衍生生长因子BB对SD大鼠骨髓间充质干细胞增殖作用的最佳干预质量浓度及最佳干预时间。方法:体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,第3代细胞经流式鉴定其表面标记物CD45、CD29和CD34,选用纯度较高的骨髓间充质干细胞进行干预实验。将筛选好的细胞接种于96孔培养板中,对照组骨髓间充质干细胞用α-MEM完全培养基培养,其余各组在此基础上加入6.25,12.5,25,50,100μg/L血小板衍生生长因子BB。干预1,3,5,7 d采用CCK-8法检测细胞增殖情况,筛选出血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的最佳时间及质量浓度。结果与结论:①经流式鉴定:CD29呈阳性表达(94.6%),CD45呈阴性表达(3.3%),CD34呈阴性表达(0.2%),得到纯度较高的大鼠骨髓间充质干细胞;②采用重复测量方差分析,不同时间点间血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的吸光度值改变不同,第3天增殖效果最强,差异有显著性意义(F=27.773,P<0.001),进一步采用LSD法对分组因素进行两两比较,25μg/L血小板衍生生长因子BB组与其他5组比较差异均有显著性意义(P<0.05);③结果表明,25μg/L血小板衍生生长因子BB干预第3天对骨髓间充质干细胞有明显促增殖作用,血小板衍生生长因子BB质量浓度大于50μg/L会促进细胞凋亡。
- 姜涛吴硕李志强寿玺马依热·努尔买卖提马创魏琴
- 关键词：干细胞骨髓间充质干细胞血小板衍生生长因子细胞增殖
- 血小板衍生生长因子BB诱导骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化被引量：4
- 2021年
- 背景:关于血小板衍生生长因子BB促进骨髓间充质干细胞成血管的研究报道较少,而新生血管网提供的营养、生长因子和细胞因子对于骨组织生成具有至关重要的作用。目的:探讨血小板衍生生长因子BB诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的效果。方法:①体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,第3代细胞经流式鉴定其表面标记物CD45、CD29和CD34的表达,选用纯度较高的骨髓间充质干细胞进行血小板衍生生长因子BB干预实验;②第3代骨髓间充质干细胞经25μg/L血小板衍生生长因子BB诱导3 d,进行Matrigel基质胶细胞管腔形成实验,FITC-UEA-1和DIL-ac-LDL以及CD31免疫荧光染色鉴定,流式细胞术检测CD31的表达,最后采用RT-PCR检测血管内皮生长因子的mRNA水平。结果与结论:血小板衍生生长因子BB诱导后的细胞与Matrigel基质胶混匀接种后,可形成明显的管状结构;血小板衍生生长因子BB诱导后的细胞FITC-UEA-1和DIL-ac-LDL以及CD31表达均为阳性;血小板衍生生长因子BB诱导后细胞中血管内皮生长因子的mRNA表达均高于未诱导骨髓间充质干细胞(P <0.05)。结果表明,大鼠骨髓间充质干细胞经血小板衍生生长因子BB诱导后可以分化为具有功能的血管内皮细胞。
- 姜涛马磊李志强寿玺段明军吴硕马创魏琴
- 关键词：干细胞骨髓间充质干细胞血小板衍生生长因子血管内皮细胞流式细胞术
- 互助献血的现状与利弊分析被引量：2
- 2015年
- 目的:本文对互助献血中临床用血现状、互助献血利与弊、开展互助献血的策略等几个方面进行总结,互助献血虽然可以解决一部分血液制品的不足,但效果有限,要从根本上解决血液制品问题,需要加大宣传,保护血液资源,并将重心放在如何多采集安全的血液上。
- 李志强李清
- 体外诱导心肌样细胞中HCN4过表达对起搏电流特性的影响被引量：1
- 2018年
- 目的体外构建具有表达功能性的起搏心肌样细胞,并检测起搏心肌样细胞中起搏电流的特性。方法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌样细胞。构建携带人HCN4基因的重组腺病毒载体(rAd/GFP/HCN4)和绿色荧光蛋白的腺病毒载体(rAd/GFP),转染至心肌样细胞分为rAd/GFP/HCN4组和rAd/GFP组,不做任何处理作为对照组。Western blot检测各组HCN4蛋白表达,全细胞膜片钳技术记录各组中起搏电流情况。结果荧光显微镜观察到长梭形心肌样细胞,PCR鉴定重组腺病毒载体rAd/GFP/HCN4和rAd/GFP构建成功;rAd/GFP/HCN4组HCN4蛋白相对表达量(1.31±0.02)高于rAd/GFP组(0.55±0.02)和对照组(0.52±0.03)(P<0.05),rAd/GFP组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);膜片钳实验在转基因细胞中检测到起搏电流,而rAd/GFP组和对照组中未检测到起搏电流。结论 rAd/GFP/HCN4转染到心肌样细胞中,心肌样细胞中HCN4蛋白表达增加且可检测到起搏电流,从而使心肌样细胞具有自主搏动,为体外构建生物起搏器提供研究基础。
- 王红丽李志强周贤惠李耀东汤宝鹏
- 关键词：心肌样细胞
- GPR97、HuR和Sema3A蛋白在细粒棘球蚴感染小鼠肝脏中的表达
- 2022年
- 目的探究G蛋白偶联受体97(GPR97)、人抗原R(HuR)和脑信号蛋白3A(Sema3A)蛋白在细粒棘球蚴感染小鼠肝脏中的表达。方法采用门静脉注射法建立细粒棘球蚴感染C57BL/6小鼠模型,在感染第2周和第8周时采集小鼠肝脏标本,通过苏木精-伊红染色法(HE)和天狼星红染色观察肝脏病灶和纤维化程度,采用免疫组织化学法观察GPR97、HuR和Sema3A表达情况。结果感染第2周时,小鼠肝组织结构完整、肝索排列整齐、少量纤维细胞增生,有肉芽肿形成和成型纤维化包囊;感染第8周时,小鼠部分干细胞被破坏、肝索排列紊乱,有炎性病灶且包囊空泡化、外囊外膜层纤维化组织增生且致密;与感染2周时比较,感染第8周时细粒棘球蚴感染小鼠肝内囊生发层细胞、外囊外膜层细胞,周围肝组织细胞的GPR97、HuR和Sema3A蛋白表达免疫评分均升高(P<0.05)。结论GPR97、HuR和Sema3A在细粒棘球蚴感染小鼠第2周和第8周的肝脏空泡化包囊中均有不同程度的阳性表达,可能参与感染相关炎症反应。
- 王勃陈瑞花王昆李志强魏琴姜涛张春
- 关键词：细粒棘球蚴肝脏
- 中国西部不同地区泡球蚴对小鼠的感染性研究被引量：1
- 2021年
- 目的建立不同地区泡球蚴腹腔感染小鼠动物模型,分析并比较3种不同地区泡球蚴对小鼠的感染性。方法 40只BALB/c小鼠分为4组:对照组(10只)、EM-1组(青海株,10只)、EM-2组(新疆株,10只)和EM-3组(四川株,10只),建立小鼠腹腔感染动物模型,180 d后称重,处死,计算感染率,分离原头蚴,将各组小鼠的肝脏用4%多聚甲醛固定,HE染色,统计原头蚴个数,分别于感染后7 d,1、3、6个月采用小鼠眼内眦静脉取血,测定天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、嗜酸性粒细胞(EOS)水平和白细胞(WBC)、红细胞(RBC)及血小板(PLT)的含量。结果 3种不同地区的泡球蚴腹腔感染小鼠血常规和肝功能指标差异无统计学意义。不同地区的泡球蚴对小鼠的致病性存在差异,其中EM-2感染小鼠后,肝脏原头蚴数量最多;EM-3的原头蚴数量最少。EM-2组小鼠感染率最高(77.8%);EM-3感染率最低(62.5%)。经HE染色后,实验各组的肝组织低倍镜下可见散在的大小不等的囊泡,EM-2感染小鼠肝细胞坏死最为明显,肝脏坏死损伤面积大。结论该研究成功建立了3个不同地区的泡球蚴腹腔感染动物模型,不同地区的泡球蚴对小鼠的致病性存在差异,其中以新疆株的感染力最强,四川株的感染力最弱。
- 杨晨晨杨晨晨吴熙然李志强李志强张春张春魏琴
- 关键词：泡型包虫病原头蚴腹腔感染
