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曾丁
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1
被引量:1
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重庆医科大学附属第二医院
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相关领域:
医药卫生
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吴皓
重庆医科大学附属第二医院
龚建平
重庆医科大学附属第二医院
刘勇
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2016
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骨髓间充质干细胞表达肿瘤坏死因子刺激蛋白-6对大鼠肝脏移植排斥反应的影响
被引量:1
2016年
目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)表达肿瘤坏死因子刺激蛋白-6(TSG-6)在大鼠原位肝移植排斥反应的作用。方法Kupffer细胞(KCs)和BMSC分离培养,慢病毒载体(LV3-shTSG-6)感染下捌TSG-6的表达,RT-P衄以及Westernblot检测BMSC的TSG-6mRNA以及蛋白表达情况,KCs与BMSC共培养,检测上清液TNF-α、TSG-6含量;建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,术后1d、5d、7d处死3只受体,检测血清AST、ALT、TBIL、γ-GGT、TNF-α、IL-6、IL-4含量,RT-PCR以及Westernblot检测肝组织TSG-6mRNA以及蛋白表达情况,苏木精-伊红染色观察肝组织结构,各组剩余大鼠观察术后生存率。结果BMSC慢病毒转染率〉70%;KCs和BMSC共培养,TSG-6-shRNA—BMSC+KCs组各时间点分泌TSG-6明显低于BMSC+KCs组和TSG-6-NC—BMSC+KCs组(P〈0.05),BMSC-4-KCs组和TSG-6-NC—BMSC+KCs组分泌TNF-α于6h达高峰,12h与6h比较明显降低(P〈0.05),但TSG-6-shRNA—BMSC+KCs组12h分泌TNF-0【明显高于BMSC+KCs组和TSG-6-NC—BMSC+KCs组(P〈0.05);移植术后,TSG-6-shRNA—BMSC组ALT、AST、TBIL、γ-GGT、TNF-α、IL-6明显高于TSG-6-NC—BMSC组和BMSC组(P〈0.05),与PBS组比较差异无统计学意义;TSG-6-shRNA—BMSC组、TSG-6-NC—BMSC组和BMSC组IL-4明显高于PBS组(P〈0.05),而TSG-6.shRNA-BMSC组IL-4低于TSG-6-NC-BMSC组和BMSC组(P〈0.05);在肝脏病理中,TSG-6.shRNA-BMSC组与PBS组肝组织排斥反应程度明显较高,Banff评分Ⅱ~Ⅲ级;TSG-6-shRNA-BMSC组与PBS组大鼠肝移植术后存活时间分别为(16.6±4.6)d、(15.4±6.7)d,明显低于TSG-6-NC—BMSC组(69.6±28.1)d和BMSC组(69.2±28.2)d(P〈0.05)。结论BMSC分泌表达TSG-6在-定程度上具有减轻肝移植急性排斥反应的作用。
刘勇
吴皓
曾丁
吴涯昆
龚建平
陈先锋
关键词:
间质干细胞
肿瘤坏死因子类
肝移植
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