罗维
- 作品数：12 被引量：17H指数：3
- 供职机构：北京体育大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 重复离心运动防治代谢性疾病研究进展
- 2023年
- 通过梳理重复性离心运动(eccentric exercise,ECC)与代谢性疾病防治相关研究,厘清重复性ECC在代谢性疾病防治中的应用成果、适应机制以及应用风险防范。ECC初期,一次不适应的ECC诱发的骨骼肌超微结构损伤和暂时性胰岛素抵抗是机体的代偿性保护机制;重复性ECC可实现在相对较低心血管负担下进行高负荷肌肉运动,在人体代谢、骨骼肌质量与功能、身体成分、心血管功能、炎症、日常生活自理能力、运动依从性等方面产生有益影响,是心血管系统、呼吸系统、运动能力等受限的代谢性疾病患者及其风险人群有效且相对安全可行的理想运动方式。这一代谢性疾病防治效应是机体各系统产生适应的结果。未来研究需进一步针对代谢性疾病患者及其风险人群探究更高依从性且功效更大化的ECC干预方案,并深入探索其机制。
- 罗维罗维周越
- 关键词：离心运动代谢性疾病骨骼肌再生
- 小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型的建立和验证被引量：4
- 2019年
- 目的:建立稳定可重复的骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,促进胰岛素抵抗病理机制的探索及药物的研发与筛选。方法:采用小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12为研究对象,分别以正常分化液及含40和60 mmol/L葡萄糖的分化液诱导分化,每天用相差显微镜观察不同浓度葡萄糖处理对细胞汇聚、融合和形成多核肌管的影响;分别在分化1、3、5和7 d后应用2-NBDG法检测不同处理对细胞基础糖摄取和胰岛素刺激糖摄取的影响;在分化5 d和7 d后应用Western blot法检测不同干预对葡萄糖转运子4(glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表达的影响;分化5 d后应用免疫荧光组化法检测不同干预对GLUT4蛋白分布的影响。结果:形态学结果显示,经60 mmol/L葡萄糖(高糖)处理3 d后明显抑制C2C12细胞的生长分化;葡萄糖摄取结果表明高糖处理5 d和7 d后均明显抑制C2C12的基础糖摄取和胰岛素刺激的糖摄取( P <0.01),且处理5 d后胰岛素刺激的糖摄取与基础糖摄取的差异无统计学显著性( P >0.05);Western blot检测结果表明高糖处理5 d和7 d后,胰岛素刺激的GLUT4表达与基础GLUT4表达的差异无统计学显著性( P >0.05),而对照组差异显著( P <0.05);免疫荧光组化检测结果表明高糖处理5 d后明显减少C2C12细胞胞膜上GLUT4蛋白分布水平( P <0.01)。40 mmol/L葡萄糖处理也在一定程度上发挥作用,但效果不如60 mmol/L葡萄糖明显和稳定。结论:通过高糖刺激可成功构建较为稳定的小鼠骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗模型,以60 mmol/L葡萄糖刺激5 d效果最好,通过形态学观察并检测基础和胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力和GLUT4蛋白表达与分布能较好地评价骨骼肌细胞离体胰岛素抵抗水平。
- 罗维罗维艾磊李显周越
- 关键词：C2C12细胞胰岛素抵抗模型建立葡萄糖转运子4
- 共培养体系下小鼠巨噬细胞RAW264.7与骨骼肌细胞C2C12间的相互作用被引量：2
- 2019年
- 目的建立巨噬细胞RAW264.7和成肌细胞C2C12共培养体系,检测该共培养体系下培养不同时长RAW264.7和C2C12间的相互作用。方法 Transwell小室内以成肌分化培养基共培养RAW264. 7和C2C12,相差显微镜观察细胞形态,共培养1、3、5 d后,CCK-8法检测细胞增殖能力,Western blot法检测Myf5、MyoD、myogenin、iNOS和Arg-1蛋白水平,ELISA法检测培养细胞上清液IL-1β和IL-10分泌量。结果①共培养对C2C12的影响:加快成肌分化进程、促进多核肌管形成,与同时间点对照组相比,共培养1 d即抑制Myf5蛋白表达(P<0.05),增加MyoD(P<0.05)和myogenin(P<0.01)蛋白表达;共培养3 d抑制Myf5蛋白表达(P<0.01),增加MyoD蛋白表达(P<0.01);共培养5 d降低细胞活性(P<0.05)并降低Myf5蛋白表达(P<0.01),增加肌管面积(P<0.01)。②共培养对RAW264.7的影响:共培养对细胞形态无明显影响,与同时间点对照组相比,共培养1 d抑制iNOS蛋白表达(P<0.01)和IL-1β分泌(P<0.05),增加Arg-1蛋白表达(P<0.01);共培养3 d抑制iNOS蛋白表达和IL-1β分泌(P<0.01),增加Arg-1蛋白表达(P<0.01)和IL-10分泌(P<0.05);共培养5 d细胞簇集更加明显,促进细胞增殖(P<0.05),抑制iNOS蛋白表达和IL-1β分泌(P<0.01),增加IL-10分泌(P<0.05)。结论 C2C12和RAW264.7共培养促进成肌细胞的成肌分化以及巨噬细胞的增殖和M2型极化。
- 罗维罗维李显艾磊艾磊
- 关键词：成肌细胞细胞共培养成肌分化
- 重复离心运动防治代谢性疾病：现状·机制·风险防范
- 研究目的:传统意义上,离心运动（Eccentric Exercise,ECC）主要适用于运动员和健康人群提高肌肉力量,且目前国内运动科学研究领域关于ECC研究多以其作为诱导骨骼肌损伤的干预手段。然而近来,ECC以其"低代...
- 罗维汤强周越
- 关键词：离心运动代谢性疾病运动处方
- 慢性高糖作用下小鼠骨骼肌成肌细胞对巨噬细胞极化的影响被引量：2
- 2020年
- 目的研究高糖环境下小鼠骨骼肌成肌细胞对巨噬细胞极化的影响。方法Transwell小室内共培养RAW264.7和C2C12细胞并给予高糖处理,相差显微镜观察RAW264.7细胞形态,共培养1 d和3 d后收集RAW264.7细胞及上清液,CCK-8检测RAW264.7细胞增殖能力,流式细胞术检测RAW264.7细胞表面F4/80、CD86和CD206阳性率,Western blot检测IL-1β、IL-10、iNOS和Arg-1蛋白表达,ELISA检测上清液IL-1β和IL-10分泌量。结果正常糖浓度下,C2C12与RAW264.7共培养1 d和3 d对RAW264.7细胞形态、细胞增殖无明显影响,促进RAW264.7活化为成熟巨噬细胞,提高CD206和F4/80双阳性率(P<0.01),促进IL-10和Arg-1蛋白表达增加(P<0.01),可促进IL-10分泌增加(P<0.01);高糖干预时,出现长梭形和多突形RAW264.7细胞,抑制细胞增殖(P<0.05),降低CD206和F4/80双阳性率并提高CD86和F4/80双阳性率(P<0.05),促进iNOS蛋白表达和IL-1β分泌,抑制IL-10蛋白表达和分泌(P<0.05);高糖作用下与C2C12共培养时,与共培养对照组和单独培养高糖组相比,出现较多长梭形和多突形RAW264.7细胞,且细胞体积变大,CD86和F4/80双阳性率增加(P<0.01),CD206和F4/80双阳性率降低(P<0.01),IL-1β蛋白表达和分泌增加(P<0.05),IL-10蛋白表达和分泌下降(P<0.05),Arg-1蛋白表达下降(P<0.05)。结论与C2C12共培养促进巨噬细胞M2型极化,但60 mmol/L葡萄糖作用下这一促进作用被逆转甚至进一步诱导巨噬细胞M1型极化。
- 罗维罗维艾磊周越
- 关键词：共培养高糖RAW264.7C2C12
- 慢性高糖抑制小鼠RAW264.7巨噬细胞AKT磷酸化并促进其Ml型极化被引量：6
- 2019年
- 目的研究慢性高糖对小鼠巨噬细胞的影响及机制.方法以正常生长液和含(40、60)mmol/L葡萄糖的生长液培养小鼠RAW264.7巨噬细胞1、3、5、7 d,相差显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖能力,Western blot法检测细胞白细胞介素1β(IL-1β)和IL-1O蛋白水平,ELISA检测培养细胞上清液IL-Iβ和IL,-10分泌量;实时定量PCR法检测细胞蛋白激酶B(AKT)mRNA水平,Western blot法检测细胞AKT、磷酸化的AKT(p-AKT)蛋白水平.结果60 mmol/L葡萄糖处理1 d即出现较多长梭形细胞,可见伸展的伪足,且随时间延长数量增加、体积变大;处理1 d即明显抑制细胞增殖,随时间延长抑制效果有所改善;处理3,5,7d后,IL-1β蛋白水平增加、IL-10蛋白水平降低;处理1 d后IL-1β分泌显著增加,但处理3d后IL-10分泌显著减少且随时间延长进一步减少;处理3,5,7 d后,AKT蛋白磷酸化被抑制,但AKT mRNA水平未见明显变化.40 mmol/L葡萄糖处理在一定程度上发挥作用,但不如60 mmol/L葡萄糖显著和稳定.结论长期高糖刺激诱导巨噬细胞向促炎性M1型转变,诱发巨噬细胞的持续慢性炎症反应,其机制可能与抑制AKT蛋白磷酸化激活有关.
- 罗维罗维艾磊李显周越
- 关键词：慢性炎症RAW264.7细胞
- 高糖条件下小鼠巨噬细胞对骨骼肌细胞成肌分化和胰岛素敏感性的影响被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨高糖环境下小鼠巨噬细胞对骨骼肌细胞成肌分化和胰岛素敏感性的影响。方法:Transwell小室内共培养小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12细胞和单核巨噬细胞RAW264.7细胞并给予60 mmol/L葡萄糖处理,结合培养条件随机分为单独培养对照组(SC组,n=12)、共培养对照组(CC组,n=12)、单独培养高糖组(SH组,n=12)和共培养高糖组(CH组,n=12)。相差显微镜观察细胞形态,共培养1 d和3 d后收集C2C12细胞,CCK-8检测细胞活性,免疫荧光技术检测细胞融合率和基础与胰岛素刺激的GLUT4蛋白表达,实时定量PCR检测成肌调节因子Myf5、MyoD和myogenin基因表达,2-NBDG法检测细胞基础和胰岛素刺激的糖摄取。结果:正常糖浓度下,与RAW264.7细胞共培养促进C2C12细胞肌管形成,促进E-MHC蛋白表达(P<0.01),促进MyoD和myogenin基因表达(P<0.05),提高胰岛素刺激的2-NBDG摄取(P<0.05),提高基础GLUT4水平(P<0.05)。高糖刺激抑制C2C12细胞肌管形成,抑制成肌调节因子基因表达,抑制2-NBDG摄取,抑制GLUT4表达(P<0.05)。高糖环境下与RAW264.7细胞共培养时未见明显肌管形成,与共培养对照组和单独培养高糖组相比,细胞活性、E-MHC蛋白水平、成肌调节因子基因水平、2-NBDG摄取和GLUT4蛋白水平均明显下降(P<0.05)。结论:与RAW264.7共培养促进C2C12成肌分化并提高胰岛素敏感性,高糖条件处理这一作用可逆转,抑制C2C12成肌分化的同时诱发C2C12细胞胰岛素抵抗。
- 罗维罗维艾磊王俐颖甘彦明周越
- 关键词：高糖共培养骨骼肌细胞成肌分化胰岛素敏感性小鼠
- 小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞电穿孔转染条件的建立和验证被引量：2
- 2020年
- 目的筛选并验证RAW264.7细胞中电穿孔转染TRIB3过表达质粒和TRIB3 siRNA的条件,建立适用于RAW264.7细胞的最佳电穿孔转染方案。方法通过改变脉冲电压、脉冲时长和质粒浓度等条件,将载体为pCMV6-Entry的TRIB3过表达质粒和TRIB3 siRNA转入RAW264.7细胞,24 h后相差显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞存活率,72 h后Western Blot法检测TRIB3蛋白表达以验证目的基因表达改变情况。结果(1)以不同脉冲电压转染时,110和120 mV组细胞形态和存活率与对照组无差异,130和140 mV组悬浮细胞较多、细胞存活率显著低于对照组(P<0.01),120、130和140 mV组TRIB3蛋白表达显著增加(P<0.05);(2)以不同脉冲时长进行转染时,10和20 ms组细胞形态和存活率与对照组无差异,30 ms组细胞存活率显著低于对照组(P<0.01),20和30 ms组TRIB3蛋白表达显著增加(P<0.01);(3)以不同质粒浓度进行转染时,2和4μg组细胞形态和存活率与对照组无差异,6μg组细胞存活率低于对照组(P<0.05),4μg组TRIB3表达显著增加(P<0.01);(4)以120 mV、20 ms条件转染不同浓度TRIB3 siRNA时,各组细胞形态和存活率均与对照组无差异,10 nmol/L组TRIB3表达仅为对照组的0.19倍(P<0.01)。结论以120 mV、20 ms条件在RAW264.7细胞中电穿孔转染TRIB3过表达质粒(每样本4μg)和TRIB3 siRNA(10 nmol/L),在保证较高的细胞存活率的同时能显著改变目的基因的蛋白表达水平,为后续RAW264.7细胞中质粒转染相关的基础研究提供实验依据和借鉴。
- 罗维罗维艾磊
- 关键词：RAW264.7细胞电穿孔SIRNA
- 便于操作和清洁的大容量大鼠跑台
- 本实用新型涉及一种便于操作和清洁的大容量大鼠跑台，包括：设有加长支脚的跑台支架、安装在所述跑台支架上的采用了表面无凸起颗粒的平面橡胶和加宽的传动带的电动跑道和安装在所述电动跑道上方空间的隔离罩，所述隔离罩中用隔板分隔的电...
- 周越罗维何辉王瑞元熊开宇
- 文献传递
- Tribbles同源蛋白3与巨噬细胞极化和胰岛素抵抗的关系及运动对其调控作用的研究进展被引量：4
- 2019年
- 巨噬细胞极化和骨骼肌质量下降在胰岛素抵抗发生发展中的作用广受关注,而运动训练通过影响骨骼肌炎症水平和骨骼肌肌纤维重塑改善机体胰岛素抵抗。Tribbles同源蛋白3(TRIB3)与炎症、胰岛素抵抗及运动训练关系密切,且各种研究结果不一,存在争议。本文就TRIB3与巨噬细胞极化和胰岛素抵抗的关系及TRIB3在运动训练中的适应性变化研究现状进行综述,以期为糖尿病等慢性代谢综合征的预防和治疗提供新思路。
- 罗维罗维艾磊李显周越
- 关键词：胰岛素抵抗
