孙瑶 作品数:7 被引量:19 H指数:2 供职机构: 中山大学附属第三医院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 国家自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人脐带间充质干细胞对小鼠肝缺血-再灌注损伤后肝内CD4^+T细胞的影响 被引量:1 2018年 目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对小鼠肝缺血-再灌注损伤(HIRI)后肝内CD4+T细胞的影响。方法将225只小鼠随机分为sham组、control组和MSC组,每组75只。其中MSC组和control组均为HIRI模型小鼠,MSC组通过下腔静脉注射HUC-MSCs,control组通过下腔静脉注射生理盐水,sham组仅进行开腹、关腹等操作,不行血管夹闭。分别于术后6、12、24 h,每组随机取15只小鼠,用于眼球取血法采血及取肝组织样本,每组剩下的30只小鼠用于肝内单核细胞的提取。比较各组小鼠不同时间点肝内单核细胞数量,CD4+T细胞比例、数量和阳性率;比较各组小鼠不同时间点血清和肝组织中白细胞介素(IL)-17含量,及肝组织内共刺激分子B7-1和B7-2信使核糖核酸(m RNA)表达水平。结果术后12、24 h,control组的肝内单核细胞数量明显高于sham组,而MSC组的肝内单核细胞数量明显低于control组(P<0.01~0.05)。术后6、12、24 h,control组的CD4+T细胞比例、数量及阳性率均明显高于sham组(均为P<0.01),MSC组的CD4+T细胞比例明显低于control组(P<0.01~0.05);术后12、24 h,MSC组的CD4+T细胞数量和阳性率均明显低于control组(P<0.01~0.05)。术后6、12、24 h,control组血清和肝组织中的IL-17含量均高于sham组(均为P<0.01),而MSC组血清和肝组织中的IL-17含量均低于control组(均为P<0.01)。术后6 h,control组B7-2的m RNA表达水平高于sham组(P<0.05);术后12、24 h,control组B7-1和B7-2的m RNA表达水平均高于sham组(均为P<0.01),而MSC组B7-1和B7-2的m RNA表达水平均低于control组(均为P<0.01)。结论 HUC-MSCs抑制HIRI后肝内CD4+T细胞的数量和IL-17的分泌,同时减少肝内单核细胞数量及B7-1和B7-2 m RNA表达,减轻HIRI。 周朝荣 吕海金 孙瑶 安玉玲 范明明 易慧敏关键词:CD4+T细胞 共刺激分子 白念珠菌Mdr1基因生物信息学分析 2017年 目的:探讨白念珠菌多重耐药基因(Mdr1)DNA、mRNA、蛋白的潜在生物学性质。方法:采用生物信息学方法对白念珠菌Mdr1基因DNA、mRNA、蛋白序列进行分析。结果:Mdr1 DNA中无内含子,Mdr1 mRNA中含有多个调控元件和腺苷酸化位点、AU富集区,对二级结构分析显示,Mdr1 mRNA全长序列可形成棒状结构。蛋白质的理化性质分析显示MDR1蛋白稳定系数为37.14,提示MDR1蛋白较为稳定。Target P 1.1和Signal P 4.1预测结果显示MDR1蛋白不含有线粒体定位序列和分泌信号肽。SWISS-MODEL 3D建模,MDR1蛋白质的3D结构类似于通道管状形态。Motif Scan分析结果显示,MDR1蛋白第116-557个氨基酸构成主要协同转运蛋白超家族,TMHMM预测在此范围内含有12个跨膜区间,为跨膜蛋白。结论:Mdr1基因的表达可能受其它基因的调控,MDR1蛋白为主要协同转运蛋白超家族成员,其功能域或为潜在的药物靶点。 何泰龙 高文超 孙瑶 黄家敏 黄丽林 张静 张云青 李美荣 尹颂超 黄怀球关键词:白念珠菌 MDR1基因 生物信息学 非侵袭性真菌性鼻窦炎的实验室诊断及致病菌分析 被引量:7 2017年 目的探讨非侵袭性真菌性鼻窦炎的实验室诊断方法,分析其致病菌,为鼻窦炎合并真菌感染的临床诊断、治疗提供依据。方法对我院临床及鼻内镜下所诊断的10例真菌性鼻窦炎患者,鼻内镜手术时直接吸取病变的鼻窦黏膜及窦腔内容物,通过直接镜检、真菌培养、传统鉴定及分子生物学鉴定和组织病理学检查对其进行检查。结果 10例病例中,直接镜检阳性者8例;病理学检查可见真菌菌丝或者孢子者8例;接种培养及基因鉴定阳性者5例(感染菌株包括2例烟曲霉复合体、1例杂色曲霉、1例枝孢样枝孢霉、1例帚霉)。不同方法检测出的阳性病例并非完全重叠。结论真菌镜检、真菌培养、真菌分子生物学鉴定、组织病理学检查在诊断真菌感染时可以互补,有助于明确诊断及发现新菌株。 李美荣 郑瑞 尹颂超 张云青 黄丽林 何泰龙 薛汝增 袁立燕 孙瑶 梅碧琪 杨钦泰 黄怀球关键词:真菌 鼻窦炎 菌种鉴定 申克孢子丝菌chs1基因生物信息分析 被引量:1 2017年 目的:对申克孢子丝菌几丁质合成酶基因(chs1)及其编码蛋白的结构和特性进行分析和预测。方法:利用NCBI网站、Ex PASy和CBS等工具预测申克孢子丝菌chs1基因及编码蛋白的结构和功能。结果:chs1 mRNA全长2 745 bp,编码914个氨基酸。BLAST分析显示,申克孢子丝菌与巴西孢子丝菌、蓝菌属真菌、足马杜拉分枝菌等真菌chs氨基酸序列一致性达到99%,且有保守域。预测chs1蛋白相对分子量为102 714.7,理论等电点为6.71。预测chs1编码蛋白ɑ螺旋、β折叠、β转角、无规则卷的比例分别是38.40%、17.94%、10.39%、33.26%。chs1蛋白是一种疏水蛋白,包含9个跨膜区,未发现信号肽。结论:成功预测了chs1基因及编码蛋白质的生化性质及结构特征,为下一步对其进行克隆、表达和敲除奠定基础。 孙瑶 高文超 何泰龙 黄家敏 黄丽林 张静 李美荣 张云青 尹颂超 黄怀球关键词:申克孢子丝菌 生物信息学 间充质干细胞通过诱导M2型巨噬细胞治疗急性肺损伤 被引量:9 2019年 【目的】研究间充质干细胞(MSC)是否可以通过诱导肺泡巨噬细胞向M2型极化来改善急性肺损伤。【方法】①贴壁法提取脐带MSC,用流式细胞仪分析细胞表型,细胞化学染色法观察细胞体外成骨和成脂肪能力。②小鼠肺泡巨噬细胞系(MH-S细胞)加入脂多糖(LPS)刺激,和MSC隔离共培养,并加入MSC可溶性因子抑制剂,设置LPS组、LPS+MSC组和MSC抑制剂组,共培养48 h后用流式和qPCR技术分析巨噬细胞极化状态。③30只balb/c雄性小鼠随机均分成control组、ALI组、ALI+MSC组(均n=10),LPS滴鼻法建立小鼠急性肺损伤(ALI)模型,用MSC治疗48 h后,肺组织苏木素-伊红(HE)染色进行损伤评估;提取肺泡灌洗液(BALF),其中细胞用流式和qPCR检测M2型巨噬细胞marker CD206、IL-10和Arg1的表达;ELISA检测BALF上清M1型巨噬细胞marker TNF-α。【结果】MSC呈贴壁生长,具有成骨成脂分化能力。MSC可以诱导MH-S细胞向M2型极化,CD206阳性比例明显升高(P <0.05),前列腺素E2(PGE2)抑制剂可以逆转该作用。小鼠ALI模型成功,MSC治疗后,肺组织病理及评分明显减轻。BALF中巨噬细胞CD206阳性细胞的比例,ALI+MSC组较ALI组明显升高。在CD206和IL-10的mRNA水平上,ALI+MSC组高于ALI组(P <0.05)。BALF中炎症因子TNF-α浓度ALI+MSC组较ALI组明显降低(P <0.05)。【结论】脐带MSC通过PGE2诱导巨噬细胞向M2型极化途径有效缓解LPS诱导的小鼠急性肺损伤。 孙瑶 吕海金 易小猛 郭俊 易慧敏关键词:急性肺损伤 间充质干细胞 巨噬细胞 申克孢子丝菌TPS基因生物信息学分析 被引量:1 2018年 目的:分析和预测申克孢子丝菌海藻糖磷酸合成酶(TPS)基因及其编码蛋白的生物信息学特征及功能。方法:利用生物信息学软件和网站分析预测申克孢子丝菌TPS基因及其编码蛋白的结构和功能特征。结果:申克孢子丝菌TPS基因全长为2 864 bp,编码905个氨基酸。Target P和MotifScan预测该蛋白定位于胞浆中,具有糖基转移酶、海藻糖磷酸酶两大功能域及丰富的修饰位点,其中磷酸化位点尤为丰富,包含cAMP依赖性磷酸激酶、蛋白激酶C(PKC)和酪氨酸激酶(CK2)磷酸化位点。TPS蛋白是亲水性蛋白,无跨膜结构,未发现信号肽。结论:预测申克孢子丝菌TPS基因编码蛋白位于胞浆中,具有糖基转移酶、海藻糖磷酸酶两大功能域及丰富的修饰位点的结构功能特点,可行相应小分子抑制剂筛选以开发新型抗真菌药物。 黄家敏 李玉哲 高文超 吴晓雁 孙瑶 黄丽林 张静 李美荣 胡南 旷翠娥 刘佳庆 黄怀球关键词:申克孢子丝菌 生物信息学 白念珠菌Hog1基因DNA、mRNA、蛋白的生物信息学分析 2016年 目的:探讨白念珠菌Hogl基因DNA、mRNA、蛋白的潜在生物学性质。方法:采用生物信息学方法对白念珠菌Hogl基因DNA、mRNA、蛋白序列进行分析。结果:白念珠菌Hogl基因启动子可能位于其基因编码区起始位点前654~704bp,转录起始位点为编码区起始位点前663bp,Hogl基因并无内含子。Hogl基因mRNA中未发现核糖体结合位点等功能性RNA序列,RNA二级结构分析显示,HoglmRNA形成稳定的回文结构。蛋白质的理化性质分析显示,Hogl蛋白稳定系数为35.67。TargetP1.1和SignalP4.1预测结果显示,Hogl基因不存在线粒体定位序列、分泌信号肽及跨膜区域。Motif分析显示Hogl具有MAPK活性,其活性位点可能为第189—181个氨基酸(TRY)。Hogl蛋白序列在各物种间呈渐进式进化、较为保守,尤其在MAPK功能域附近。结论:白念珠菌Hogl基因的DNA和mRNA序列无常见功能域,可能主通过其蛋白质发挥作用。Hogl蛋白是MAPK家族成员,其MAPK活性位点(第189—181个氨基酸TRY)或为潜在的药物靶点。 梅碧琪 张静 乐秀 高文超 黄丽林 何泰龙 孙瑶 陈垦 黄怀球关键词:白念珠菌 生物信息