杨海捷
- 作品数：27 被引量：48H指数：4
- 供职机构：成都军区昆明总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- 内毒素结合肽及其突变体的表达、纯化及抗内毒素活性研究
- 目的对内毒素结合肽(endotoxin binding peptide,EBP)及其突变体在 E coli DH5 α进行表达,纯化后鉴定其生物学活性。方法将含有 pinpointXa3-EBP 及其突变体 pinpoi...
- 孙亚丽刘友生杨海捷王长松马建洲
- 文献传递
- 散发性乳腺癌及乳腺增生组织BRCA1基因启动子区甲基化研究
- 背景和目的：乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，且发病率呈上升趋势，严重威胁妇女健康。早期诊断、早期治疗是防治乳腺癌的关键。乳腺增生病尤其是乳腺不典型增生与乳腺癌的关系密切，二者具有形态上的相似性与流行病学上的相关性。细胞...
- 杨海捷
- 关键词：启动子散发性乳腺癌乳腺增生病甲基化
- 文献传递
- 内毒素结合肽模拟肽P11的体外活性研究
- 背景与目的脓毒血症是一种由于感染引起的严重的全身炎症反应综合征,抗内毒素治疗是提高脓毒血症治疗效果的关键。在前面的课题研究中,我们成功的从噬菌体展示随机7、12肽库中筛选获得了一组可与LPS结合的噬菌体克隆,推导出与LP...
- 段光杰杨海捷刘友生
- 文献传递
- 散发性乳腺癌及乳腺不典型导管增生组织BRCA1基因启动子区甲基化分析被引量：10
- 2008年
- 目的了解散发性乳腺癌及癌旁增生组织、乳腺不典型导管增生组织BRCA1基因启动子区甲基化状态,探讨其与乳腺癌发生的关系。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)结合巢式PCR技术,研究23例散发性乳腺癌及其癌旁增生组织、6例乳腺不典型导管增生组织及5例健康成人女性外周血淋巴细胞中BRCA1基因启动子区甲基化状态。结果5例健康成人女性外周血淋巴细胞均表现BRCA1基因启动子区甲基化阴性;23例原发性乳腺癌组织中,BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化率为65.22%(15/23);癌旁增生组织检出CpG岛甲基化者11例,甲基化率为47.83%(11/23),且均为癌组织阳性患者;6例乳腺不典型导管增生组织中,BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化阳性者2例,甲基化率为33.33%(2/6);统计学检验结果表明,乳腺癌、癌旁增生组织之间,BRCA1基因启动子区甲基化阳性率无显著差异。结论BRCA1基因启动子区CpG岛甲基化是散发性乳腺癌发生过程中的早期事件,可能在乳腺癌发生中和乳腺增生病癌变过程中起重要生物学作用。
- 杨海捷王丽魏万里陈玥江自然李学锋杨举伦
- 关键词：乳腺肿瘤甲基化BRCA1基因
- 老年多器官功能不全综合征患者免疫功能探讨被引量：1
- 2012年
- 目的:检测老年多器官功能不全综合征(MODSE)患者的细胞免疫、体液免疫指标,了解其免疫水平及其与疾病的关系。方法:将老年患者根据诊断分为MODSE组(46例)和对照组(40例),用双/三色直接免疫荧光标记全血溶血法检测细胞免疫CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+、CD4^+/CD8^+、NK、CIK指标;用免疫比浊法检测体液免疫C3,C4,CH50,IgG,IgA,IgM指标。结果:两组患者CD3^+,NK,IgA差异有统计学意义(P<0.05)。两组免疫功能比较有明显差异:对照组CD3^+高,MODSE组NK、IgA高。结论:MODSE组患者存在免疫功能低下。
- 苏勇沈珠甫华丕虹周玉梁杨宇杨海捷
- 关键词：免疫功能细胞免疫体液免疫多器官功能不全综合征
- 预处理对在体大鼠冠脉血管内皮细胞的保护及机制探讨被引量：1
- 2009年
- 目的探讨缺血预处理(IPC)对缺血再灌注(I/R)所致的血管内皮细胞(VEC)损伤是否有保护作用及蛋白激酶C(PKC)在其中的作用。方法实验大鼠分为5组:对照组、缺血再灌注组(I/R组)、预处理组(IPC组)、多黏菌素B(PKC抑制剂)+I/R组、多黏菌素B+IPC组。测定各组一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、循环内皮细胞(CEC)、丙二醛(MDA),并作冠脉VEC透射电镜观察。结果I/R后血浆中NO明显减少,ET明显升高,NO/ET值明显降低,CEC明显增多,MDA明显升高(P<0.05或P<0.01)。IPC能逆转上述改变,使血浆中NO增多,ET降低,NO/ET值恢复,CEC数量减少,MDA含量降低(P<0.05或P<0.01)。PKC的抑制剂多黏菌素B并不加重I/R的上述改变,但是能阻断IPC的作用。电镜显示:I/R后VEC的超微结构严重损伤,IPC能明显减轻VEC的结构损伤。结论I/R导致VEC结构和功能的严重损伤,IPC能减轻I/R后VEC的结构和功能损伤,PKC可能参与了这一过程。
- 谭志胜杨海捷陈代陆
- 关键词：缺血再灌注损伤缺血预处理血管内皮细胞蛋白激酶C
- 内毒素结合肽的改良、原核表达及纯化被引量：1
- 2006年
- 目的:对人内毒素结合肽(endotoxinbindingpeptide,EBP)进行改良,获得突变体mEBP(mutateofendotoxinbindingpeptide,mEBP)基因并进行原核表达,纯化获得高纯度的mEBP。方法:应用PCR定点诱变方法获得mEBP基因,构建PinpointXa3/mEBP融合表达载体,在BL21(DE3)pLysS宿主菌进行表达,溶菌酶裂解法提取包涵体,融合蛋白经PinpointTMXa纯化后,由factorXa酶切,获得目的肽,RPHPLC纯化获得高纯度的mEBP。结果:应用PCR定点诱变技术完成了EBP第5,18位谷氨酰胺→赖氨酸的定点突变,且通过原核表达,色谱纯化获得了高纯度的mEBP。结论:成功获得高纯度的mEBP,为下一步的抗内毒素功能检测奠定基础。
- 孙亚丽刘友生杨海捷
- 关键词：突变纯化
- 内毒素结合肽模拟肽P11的体外活性研究
- 2010年
- 目的对从噬菌体展示随机肽库筛选获得的内毒素结合肽模拟肽进行体外拈抗内毒素活性鉴定。方法采用FMOC固相合成法化学合成内毒素结合肽模拟肽P11，并进行拮抗内毒素活性和细胞毒性测定。结果亲和ELISA检测显示P11与LPS有较高的亲和力，通过生长曲线和流式细胞学分析细胞周期显示P11对人U937细胞生长无明显影响。流式细胞检测显示P11呈剂量依赖性抑制FITC—LPS与人外周血单核细胞（PBMC）结合。细胞因子生成抑制实验显示10μg/mlP11可显著抑制LPS诱导PBMC和U937细胞TNF—αmRNA转录和蛋白表达。结论体外活性鉴定结果表明化学合成的模拟肽P11可抑制LPS诱导的炎性反应。
- 杨海捷段光杰朱江陈锐刘友生
- 关键词：脓毒血症模拟肽生物活性
- 从噬菌体展示随机七、十二肽库筛选内毒素结合肽及其生物学活性研究
- 研究背景和目的: 脓毒血症是临床ICU病人死亡的重要原因。据统计,在美国每年有650–750,000住院病人发展为脓毒血症,在欧洲有同样的发生率,发展中国家发生率更高。尽管医疗水平和措施不断加强,但这并没有降低脓毒血症的...
- 杨海捷
- 关键词：内毒素定向进化噬菌体随机肽库肿瘤坏死因子
- 文献传递
- 脂多糖结合蛋白与脂多糖结合位点模拟肽的筛选
- 2013年
- 目的应用噬菌体随机12肽库筛选脂多糖结合蛋白(LBP)与脂多糖结合位点的多肽序列。方法以脂多糖为固相筛选分子,对噬菌体12肽库进行4轮亲合筛选,采用酶联免疫吸附法鉴定筛选后的噬菌体克隆与脂多糖的结合活性,取结合活性较高的克隆进行DNA测序,推导其多肽序列并与LBP序列比对,再进行竞争抑制实验检测筛选噬菌体与LBP竞争结合的效力。结果选取的86个噬菌体克隆中,多数结合实验鉴定阳性,取20个亲和力最高的克隆测序,得到20条不同编码的12肽序列,20条多肽与LBP一级结构有不同程度同源性,均为模拟肽。12个噬菌体克隆有较高的竞争抑制率。结论用噬菌体12肽库成功筛选出LBP与脂多糖结合位点模拟肽,为进一步以这些多肽为先导物进行定向进化研究提供了实验依据和结构基础。
- 杨海捷杨韶艳刘晓丽谭志胜郭军王红
- 关键词：脂多糖结合蛋白噬菌体肽库模拟肽
