邵云侠
- 作品数：12 被引量：57H指数：4
- 供职机构：安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
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- 芍药苷对糖尿病肾脏巨噬细胞TLR2/4信号通路影响的作用与机制
- 在体内研究TLR2/4信号通路在链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型肾脏巨噬细胞激活中作用及PF的影响,通过探讨TLR2/4信号通路参与DN发生的作用机制及PF的干预作用,为其防治提供新思路.
- 邵云侠吴永贵
- 关键词：芍药苷实验药理巨噬细胞信号通路
- 芍药苷通过JAK2/STAT3信号通路抑制高糖诱导的RAW264.7巨噬细胞激活被引量：13
- 2019年
- 目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)抑制高糖(high glucose,HG)诱导的RAW264.7巨噬细胞激活是否通过JAK2/STAT3信号通路。方法体外HG激活巨噬细胞RAW264.7, PF及JAK2/STAT3干扰RNA(siRNA)进行干预,分别检测巨噬细胞的增殖、趋化、炎症因子表达分泌、JAK2和STAT3蛋白表达及其磷酸化水平。结果在HG刺激下,巨噬细胞趋化功能增强,诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及单核细胞趋化因子1(MCP-1)的mRNA表达,以及细胞培养基中TNF-α、IL-1β、MCP-1分泌水平均增加(P<0.05,P<0.01),JAK2、STAT3蛋白磷酸化表达明显增加(P<0.05)。JAK2/STAT3基因沉默可抑制HG刺激下iNOS和炎症因子(TNF-α、IL-1β、MCP-1)mRNA水平和细胞培养液中炎症因子的分泌,抑制JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。PF能明显下调HG诱导的巨噬细胞趋化迁徙、炎症因子表达分泌及JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论 HG可通过诱导JAK2/STAT3信号通路刺激巨噬细胞激活,PF抑制巨噬细胞激活的机制主要与抑制JAK2/STAT3信号通路相关。
- 蔡建月邵云侠王坤吴永贵
- 关键词：巨噬细胞JAK2芍药苷高糖
- 芍药苷减轻糖尿病小鼠肾组织炎症与JAK2/STAT3信号通路的关系被引量：13
- 2018年
- 目的研究芍药苷(PF)对糖尿病小鼠肾组织炎症的影响并初步探讨其可能的作用机制。方法 60只C57BL/6J小鼠随机分为5组:对照组、模型组、PF 25 mg/kg组、PF 50mg/kg组和PF 100 mg/kg组。于实验12周末测定各组小鼠血糖、相对肾重(肾重/体质量)及24 h尿白蛋白排泄率(UAER);光镜下观察各组小鼠肾组织病理学改变并评分;免疫组化检测肾组织CD68、p-JAK2及p-STAT3表达;Western blot检测肾组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达;实时定量PCR法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)与诱生型一氧化氮合酶(i NOS)的mRNA表达。结果实验12周末,模型组小鼠血糖、相对肾重、UAER及肾组织病理学评分较对照组明显升高(P<0.05,P<0.01),PF给药可使小鼠相对肾重、UAER及肾组织病理学评分较模型组明显减少(P<0.05,P<0.01)。与对照组相比,模型组小鼠肾组织CD68、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达以及TNF-α、IL-1β、MCP-1和i NOS的mRNA表达均显著增加(P<0.01),PF 25、50、100 mg/kg给药组小鼠肾组织CD68、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达以及TNF-α、IL-1β、MCP-1和i NOS的mRNA表达明显低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论 PF能够明显改善糖尿病小鼠肾损伤,这种保护作用的机制可能部分与抑制肾组织JAK2/STAT3信号通路激活及炎症反应有关。
- 李新玉邵云侠王坤吴永贵
- 关键词：糖尿病肾脏疾病芍药苷JAK2/STAT3信号通路炎症巨噬细胞
- 芍药苷对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞TLR4信号通路的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨芍药苷(PF)对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)Toll样受体4(TLR4)信号通路的影响。方法分离骨髓来源的巨噬细胞作为研究对象,高糖作为刺激因素,芍药苷作为干预因素分组。将BMDMs分为7组:正常糖对照组(LG组)、正常糖对照+PF组(LG+PF组)、高糖刺激组(HG组)、高糖刺激+PF组(HG+PF组)、TLR4-/-对照组(TLR4-/-组)、TLR4-/-对照+高糖刺激组(TLR4-/-+HG组)、TLR4-/-对照+高糖刺激+PF组(TLR4-/-+HG+PF组)。流式细胞术鉴定巨噬细胞的纯度及成熟度;CCK-8检测PF对BMDMs活力的影响;Transwell检测各组BMDMs的趋化功能;激光共聚焦法检测各组的TLR4和诱生型一氧化氮合酶(i NOS)的协同表达;qRT-PCR测定各组细胞中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及i NOS mRNA的转录表达;Western blot法检测各组总蛋白中i NOS、TLR4、髓样分化因子88(My D88)、TIR结构域衔接蛋白(Trif)、磷酸化白介素-1受体相关激酶(p-IRAK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、核因子κB(NF-κB)p65和NF-κBp-p65蛋白的表达;ELISA法检测各组细胞培养上清液中促炎因子TNF-α、IL-1β和MCP-1的分泌情况。结果与LG组比较,高糖刺激可以增加巨噬细胞的趋化功能;明显上调细胞TNF-α、IL-1β、MCP-1及i NOS mRNA的转录表达(P<0.01);同时HG组的i NOS及TLR4、My D88、Trif、p-IRF3、NF-κBp65和NF-κBpp65等信号通路蛋白表达水平明显增强(P<0.01);细胞培养上清液中分泌的TNF-α、IL-1β及MCP-1水平增高(P<0.01)。PF和敲除TLR4基因均可以抑制高糖刺激导致的巨噬细胞的激活效应。结论高糖可以诱导BMDMs细胞内的TLR4及下游信号传导通路表达上调,同时使巨噬细胞激活导致促炎因子表达上调;PF和敲除TLR4基因均可抑制TLR4信号通路的激活,并且使巨噬细胞促炎因子的表达下调。
- 杨雯雯段分分邵云侠王坤吴永贵
- 关键词：芍药苷巨噬细胞TOLL样受体4
- 芍药苷对糖尿病小鼠肾组织中TLR2信号通路的调节作用被引量：10
- 2018年
- 目的探讨芍药苷(PF)通过Toll样受体2(TLR2)对糖尿病小鼠的肾脏保护作用。方法选用C57BL/6J及TLR2基因敲除(TLR2^(-/-))雄性小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导为糖尿病模型,分为模型组、PF干预[25、50、100mg/(kg·d)]组、TLR2^(-/-)模型组,另选取C57BL/6J及TLR2^(-/-)小鼠作为对照组(n=12)。实验12周末收集各组小鼠的血、尿及肾组织标本,测定血糖、体重、肾重以及24 h尿白蛋白排泄率(UAER);光镜下观察各组小鼠肾组织病理学改变;采用免疫组化检测肾组织中巨噬细胞(CD68阳性细胞)、TLR2、核因子κB p65(NF-κB p65)的表达;RT-PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA的表达;Western blot检测肾组织TLR2、转接信号髓分化因子88(My D88)、磷酸化白介素受体相关激酶-1(p-IRAK-1)、诱生型一氧化氮合酶(i NOS)、NF-κB p-p65、NF-κB p65蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠血糖、肾重/体重、UAER升高,系膜扩张指数和肾小管间质损伤指数评分明显增加,免疫组化CD68、TLR2及NF-κB p65表达明显升高,炎症因子TNF-α、IL-1β和MCP-1 mRNA表达及TLR2、My D88、p-IRAK-1、NF-κB pp65、NF-κB p65、i NOS的蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,PF干预组及TLR2^(-/-)模型组小鼠肾重/体重、UAER明显下降(P<0.01),但对血糖无影响(P>0.05),肾组织病理改变及巨噬细胞浸润程度减轻,炎症因子水平降低,TLR2及其下游信号通路蛋白的表达下降(P<0.05,P<0.01)。结论 PF通过抑制炎症反应发挥肾脏保护作用可能与下调TLR2信号通路有关。
- 段分分杨雯雯邵云侠王坤吴永贵
- 关键词：糖尿病肾病芍药苷炎症
- 芍药苷对AGEs刺激下RAW264.7巨噬细胞TLR2/4通路的影响被引量：9
- 2017年
- 目的探讨芍药苷(paeoniflorin,PF)对晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)刺激下RAW264.7巨噬细胞TLR2/4通路的影响。方法 AGEs在不同时间点刺激RAW264.7巨噬细胞,使用不同浓度的PF预先孵育细胞干预刺激,以优化实验条件;后将巨噬细胞随机分为对照组(DMEM培养基)、牛血清白蛋白(BSA)组(200 mg·L^(-1)BSA)、AGEs组(200 mg·L^(-1)AGEs)、PF组(200 mg·L^(-1)AGEs+10^(-5)mol·L-1PF)及TLR2/4抑制剂组(200 mg·L^(-1)AGEs+30 mg·L^(-1)人氧化磷脂)。Western blot检测各组TLR2、TLR4、髓样分化因子(My D88)、p-IRAK1、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、干扰素调节因子3(IRF3)、p-IRF3、NF-κB p-p65、NF-κB p65、iNOS、TNF-α、IL-1β和MCP-1蛋白表达,RT-PCR检测各组TLR2和TLR4mRNA表达,ELISA法测定各组细胞上清液中TNF-α、IL-1β及MCP-1水平。结果与对照组相比,AGEs能明显上调TLR2、TLR4、My D88、p-IRAK1、TRIF、IRF3、p-IRF3、NF-κB pp65、NF-κB p65、i NOS、TNF-α、IL-1β、MCP-1蛋白表达(P<0.01)及TLR2、TLR4 mRNA表达(P<0.01),增加细胞上清液中TNF-α、IL-1β、MCP-1水平(P<0.01);PF和TLR2/4抑制剂能明显下调AGEs诱导产生的效应(P<0.01)。结论 PF可通过抑制巨噬细胞TLR2/4信号通路而发挥抗炎作用,这可能为糖尿病肾病的治疗提供新的理论基础。
- 刘超然邵云侠徐兴欣王坤吴永贵
- 关键词：晚期糖基化终末产物炎症巨噬细胞芍药苷
- 芍药苷对高糖培养的骨髓巨噬细胞TLR2/4信号通路调节的分子机制
- 在体外探讨TLR2/4信号通路在高糖培养的巨噬细胞激活中的作用及芍药苷(PF)的干预影响.高糖环境下，骨髓来源巨噬细胞活化，细胞内TLR2/4及下游信号传导通路表达上调，导致促炎症因子及iNOS的高表达，PF干预及TLR...
- 邵云侠吴永贵
- 关键词：芍药苷实验药理骨髓巨噬细胞炎症因子
- 褪黑激素对糖尿病db/db小鼠肾脏Toll样受体4信号通路的调节作用被引量：1
- 2016年
- 目的 探讨褪黑激素(melatonin,MT)对糖尿病db/db小鼠肾脏的保护作用是否与调节Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路有关.方法 选取48只10周龄雄性db/db小鼠,按完全随机法分为db/db组、db/db+MT 50 μg/kg组、db/db+MT 100 μg/kg组和db/db+MT 200 μg/kg组,每组12只.MT腹腔注射给予.另选12只db/m小鼠作为对照组,db/m与db/db小鼠腹腔注射相同体积的磷酸盐缓冲液(PBS)/二甲亚砜(DMSO)溶液.12周末测定血糖、体重、肾重及24h尿白蛋白排泄率(UAER);光镜观察肾组织病理改变;免疫组化检测肾组织TLR4、核因子κB p65 (NF-κB p65)、巨噬细胞(ED-1阳性细胞)表达;Western印迹检测肾组织TLR4、转接信号髓分化因子88 (myeloid differentiation factor 88,MyD88)、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TIR-domain-containing adaptor inducing interferon-β,TRIF)、干扰素调节因子3 (interferon regulatory factor 3,IRF-3)及NF-κB p65蛋白表达;实时定量PCR检测肾组织肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)与单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)mRNA表达.结果 12周末db/db组小鼠血糖、体重、肾重及24 h UAER明显高于db/m组(P＜021),db/db+MT(100、200 μg/kg)组肾重及db/db+MT(50、100、200 μg/kg)组24 h UAER明显低于db/db组(P＜0.01);与12周末db/m小鼠相比,db/db小鼠系膜扩张指数和肾小管-间质损伤指数评分明显增加(P＜0.01),50、100、200 μg/kg MT可显著改善肾组织病理改变(P＜0.05);免疫组化显示12周末db/db小鼠肾组织TLR4、NF-κB p65和ED-1表达明显高于db/m小鼠(P＜0.01),而db/db+MT(50、100、200 μg/kg)组小鼠肾组织TLR4、NF-κB p65和ED-1表达明显低于db/db组(P＜0.05);Western印迹显示12周末db/db组小鼠TLR4、MyD8g、TRIF、IRF-3及NF-κB p65蛋白表达明显高于db/m组(P＜0.05或P＜0.01),而db/db+MT(50、100、200 μg/kg)组小鼠TLR4、MyD88、TRIF、IRF-3及NF-κB p65蛋白表达较db/db组明显下降(P＜0.05);实时定量PCR结果表明db/db小鼠肾组织TNF-α、MCP-1 mRN
- 姜姗范哲徐兴欣邵云侠吴永贵
- 关键词：褪黑激素TOLL样受体4NF-ΚB炎症
- TLR4信号通路在高糖诱导骨髓来源巨噬细胞激活中的作用被引量：3
- 2016年
- 目的通过研究高糖对骨髓来源巨噬细胞(BMDM)Toll受体4(TLR4)表达及其下游信号通路的影响,初步探讨高糖通过TLR4信号通路促进巨噬细胞分泌炎症因子的机制。方法分离获取C57BL/6J及B10Sc NNju(TLR4基因敲除小鼠)BMDM,流式细胞仪检测其纯度;选取不同浓度的高糖及甘露醇,在不同时间点刺激BMDM;后将BMDM分为4组:正常糖浓度(LG)组、高糖刺激(HG)组、TLR4基因敲除(TLR4-/-)组、TLR4基因敲除BMDM高糖刺激(TLR4-/-+HG)组。采用流式细胞术观察BMDM M1表型,细胞免疫荧光法观察BMDM TLR4与诱生型一氧化氮合酶(i NOS)共表达,实时定量PCR法检测各组细胞中促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素1β(IL-1β)及iNOS的mRNA表达,Western blot法检测各组总蛋白中TLR4、髓样分化因子88(My D88)、TIR结构域衔接蛋白(Trif)、磷酸化白介素受体相关激酶-1(p-IRAK-1)、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化(p)-IRF3、核因子κB(NF-κB)p65、NF-κB p-p65、i NOS蛋白的表达,ELISA法测定细胞上清液中促炎因子TNF-α、MCP-1、IL-1β的表达。结果与LG组比较,高糖可使M1型巨噬细胞百分比增加;TNF-α、MCP-1、IL-1β及i NOS的mRNA水平上调;TLR4、My D88、Trif、p-IRAK-1、p-IRF3、IRF3、NF-κB p65、NF-κB p-p65、iNOS蛋白表达水平升高;细胞培养基中分泌的TNF-α、MCP-1、IL-1β水平升高。TLR4基因敲除可消除高糖导致的巨噬细胞激活效应。结论高糖可诱导BMDM向M1型极化;TLR4基因敲除可抑制高糖诱导的巨噬细胞向M1活化及炎症因子的产生。
- 张婷敏邵云侠徐兴欣王坤吴永贵
- 关键词：高糖
- TAK1信号通路在高糖诱导骨髓来源巨噬细胞激活中的作用被引量：3
- 2016年
- 目的观察高糖对骨髓来源巨噬细胞（bonemal Tow-derive dmacrophages，BMDM）激活的影响，并探讨转化生长因子B激活激酶1（TGF-pactivatedkinase．1，TAK1）信号通路在其中的作用机制。方法分离获取小鼠BMDM，运用流式细胞术鉴定BMDM细胞纯度。高糖作为刺激因素，TAK1特异性抑制剂5z．7-oxozeaenol作为干预因素，分别设正常对照组（1640培养基）、渗透浓度对照组（25mmol／L甘露醇）、高糖组（33mmol／L葡萄糖）和高糖＋抑制剂组（33mmo]／L葡萄糖＋300nmol／L5Z-7-oxozeaen01）。采用细胞免疫荧光和流式细胞术检测BMDMM1表型，实时定量PCR检测各组细胞单核细胞趋化因子1（MCP-1）和肿瘤坏死因子α（TNF—n）mRNA水平，Western印迹法检测各组磷酸化（P）-TAKl、TAKl结合蛋白（TAKlbindingprotein，TABl）、p-JNK、p-p38MAPK和NF．KBp65蛋白的表达。结果BMDM诱导分化成功，其纯度达99．36％。10—300nmol／L5Z．7．oxozeaenol对高糖环境中BMDM细胞活性无影响（均P〉0．05）。与正常对照组比较，高糖组M1型巨噬细胞增加，MCP．1、TNF-αmRNA水平均上调（均P〈0．01），P-TAK1、TAB1、P—JNK、p-p38MAPK、NF-KBp65蛋白表达也显著升高（均P〈0．05）；TAKl特异性抑制剂5z．7-oxozeaenol作用均能抑制高糖诱导产生的效应（均P〈0．05）。结论高糖能诱导BMDM向M1表型转化，TAK1特异性抑制剂5-一7．oxozeaenol可能通过抑制TAKl／MAPKs和TAKl／NF-KB通路，抑制巨噬细胞M1型活化和炎性因子的表达。
- 冯世尧徐兴欣邵云侠李媛媛付欣吴永贵
- 关键词：巨噬细胞活化MAP激酶信号系统炎症
