严福明
- 作品数：13 被引量：48H指数：2
- 供职机构：解放军第302医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丙型肝炎病毒非结构蛋白4A反式激活基因NS4ATP1的克隆化研究被引量：1
- 2005年
- 目的:筛选并克隆丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4A(NS4A)反式激活新型靶基因。方法:以HCVNS4A蛋白表达质粒pcDNA3.1(-)-NS4A转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,提取mRNA并进行抑制性消减杂交分析。分析筛选得到的克隆,其中之一与GenBank中注册的已知功能基因序列没有同源性,通过序列同源性比对和电子拼接,根据基因起始密码子的Kozak规则和终止密码子下游保守的多聚腺苷酸信号序列,确定新型基因序列。从转染pcDNA3.1(-)-NS4A的HepG2细胞提取总RNA,以逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术扩增获得该新基因的全长序列,并对克隆的基因及其编码产物的序列进行分析。结果:该新基因的编码序列全长为963个核苷酸(nt),编码产物由321个氨基酸残基(aa)组成,并测序证实,命名为NS4ATP1,在GenBank中注册,注册号为AY 740521。结论:分子生物学技术与生物信息学技术相结合,发现并鉴定、克隆了HCV非结构蛋白反式激活作用的新型靶基因NS4ATP1,为进一步研究HCV非结构蛋白反式激活作用的分子生物学机制和探索新型治疗技术奠定基础。
- 刘妍成军纪冬吴顺华严福明崔玉芳张黎颖张玲霞
- 关键词：病毒非结构蛋白质类
- 应用抑制性消减杂交技术筛选HBVe抗原结合蛋白1反式激活基因
- 2005年
- 目的：筛选与克隆HBe抗原(HBeAg)结合蛋白1(HBEBP1)新基因的反式激活基因。了解其可能存在的调节功能线索。方法：应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学技术筛选并克隆HBEBP1反式激活的新型靶基因．以HBEBP1表达质粒pcDNA3．1(-)-HBEBP1转染HepG2细胞。以空载体pcDN3．1(-)为平行对照。制备转染后的细胞裂解液。提取mRNA并逆转录为cDNA。经RasI酶切后。将实验组cDNA分成两组。分别与两种不同的接头衔接。再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR)。将产物与T／A载体连接，构建cDNA消减文库，并转染大肠杆菌进行文库扩增。随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析．结果：成功构建人HBEBP1反式激活基因差异表达的cDNA消减文库．文库扩增后得到85个阳性克隆。进行菌落PCR分析。均得到200～1000bp插入片段。对26个插入片段测序。并通过生物信息学分析获得其全长基因序列。结果共获得14种编码基因。包括13种已知基因和1种未知基因．结论：筛选到的cDNA全长序列。包括一些与细胞生长调节、信号转导、肿瘤免疫发生及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因。推测。HBEBP1可能存在的调控机制的线索。
- 严福明成军纪冬施安娜周全胜郭江杨瑗刘妍
- 关键词：反式激活基因E抗原抑制性消减杂交技术CDNA消减文库菌落PCR
- 病毒性肝炎患者血清可溶性细胞间粘附分子-1水平及意义被引量：2
- 1997年
- 目的：探讨病毒性肝炎患者血清可溶性细胞间粘附分子－１（ｓＩＣＡＭ－１）水平与肝损害的关系。方法：应用ＥＬＩＳＡ法检测了７例正常人和３９例病毒性肝炎患者血清ｓＩＣＡＭ－１浓度。结果：急性肝炎和慢性肝炎患者血清ｓＩＣＡＭ－１分别为９７５．９３±３２２．５１ｎｇ／ｍｌ和８３３．０８±４９０．５９ｎｇ／ｍｌ，均明显高于正常人（２１７．８６±３０．２６ｎｇ／ｍｌ）。急性肝炎患者血清ｓＩＣＡＭ－１水平与其血清ＡＬＴ、ＡＳＴ和ＴＳＢ均程明显正相关。重度慢性肝炎患者血清ｓＩＣＡＭ－１水平（１２７３．４０±４０４．３８ｎｇ／ｍｌ）明显高于中度（６１３．８９±１２８．９１ｎｇ／ｍｌ）和轻度（３６７．８９±１１８．５０ｎｇ／ｍｌ）慢性肝炎。结论：急、慢性病毒性肝炎患者血清ｓＩＣＡＭ－１均有不同程度升高，血清ｓＩＣＡＭ－１水平可作为反映病毒性肝炎患者肝损害程度的指标之一。
- 张绪清顾长海严福明陈国致
- 关键词：病毒性肝炎细胞间粘附分子血清诊断
- 多种肝外组织内丙型肝炎病毒RNA和抗原表达的研究被引量：1
- 1999年
- 严福明郝飞赵利斌顾长海陈安慎赵西平郝连杰
- 关键词：肝外组织丙型肝炎病毒RNA抗原表达
- 肝外脏器丙型肝炎病毒感染和复制状态
- 2001年
- 严福明陈安慎等
- 关键词：丙型肝炎病毒复制
- 重型丙型肝炎肝外组织丙型肝炎病毒感染状态免疫组化研究被引量：2
- 1999年
- 目的 探讨丙型肝炎患者肝外组织丙型肝炎病毒（ＨＣＶ） 感染状态、致病性及其意义。方法 采用免疫组化法检测９ 例重型丙型肝炎患者肾、心、胰腺和肠等肝外组织内ＨＣＶ 多种抗原表达，并观察各组织病理改变。结果 ９ 例中６ 例（６６ ．７ ％ ） 在肝外组织检出ＨＣＶ 抗原。抗原定位于细胞浆内，呈均质型、包涵体型和膜下型。组织内抗原表达阳性细胞数量较少，不同组织间阳性细胞种类、数量和分布略有差异。病理学观察未发现细胞内ＨＣＶ 抗原阳性表达与组织病变有明确相关性。结论 ＨＣＶ 可以感染肝外组织，但未显示显著致病性。作为致病因子的ＨＣＶ 持续存在肝外多种脏器细胞内。
- 严福明郝飞顾长海赵利斌陈安慎赵西平郝连杰
- 关键词：丙型肝炎肝外组织HCV感染
- 重型乙型肝炎患者肝组织中人纤维介素基因的检测及其与临床转归关系的探讨被引量：33
- 2004年
- 目的 研究人纤维介素基因或纤维介素/hfgl 2凝血酶原酶(简称hfgl 2)在重型肝炎、慢性肝炎、肝硬化患者肝组织及非配对患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,分析其表达与患者临床表现和肝功能的关系,探讨hfgl 2检测对预测患者临床转归和预后的价值。方法 采用免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测23例重型肝炎、13例慢性肝炎、14例肝硬化患者的肝组织和30例重型肝炎、10例慢性肝炎患者、10例健康对照者PBMC中的hfgl 2表达。应用多媒体彩色图文分析系统对hfgl 2的表达进行半定量分析。结果 23例重型肝炎患者肝组织中,21例可见hfgl 2表达,而在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者肝组织中均无hfgl 2表达。肝组织中hfgl 2表达水平与血清总胆红素值呈正相关。30例重型肝炎患者中,28例外周血白细胞hfgl 2高表达,10例慢性乙型肝炎患者中有1例PBMC可检测到hfgl 2,健康对照组未检测到hfgl 2。PBMC中hfgl 2表达水平与血清总胆红素值呈正相关。结论 Hfgl 2的表达为重型肝炎所特有的现象,hfgl 2的表达与乙型肝炎患者病情的严重程度密切相关,减少和阻断其表达有可能为防治重型肝炎提供新的途径和方法。PBMC中hfgl 2的检测可能有助于重型肝炎的早期诊断和临床转归的判断。
- 朱帆宁琴陈悦陶新学严伟明习东严福明郝连杰罗小平
- 关键词：重型乙型肝炎肝组织纤维介素临床转归凝血酶原酶
- 重型丙型肝炎患者肝外脏器病毒感染和复制状态被引量：5
- 2001年
- 目的 探讨丙型肝炎患者肝外脏器丙型肝炎病毒 (HCV)感染和复制状态。方法 采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、原位杂交 (ISH)和免疫组织化学法 ,对 9例重型丙型肝炎患者肝外 8种脏器内HCV基因、HCV复制中间体和HCV抗原表达进行了研究。结果 采用RT PCR ,9例患者肝外脏器均可检出HCV基因 ,6例 (6 6 .7% )检出HCV复制中间体及HCV抗原 ;采用ISH和免疫组化法 ,5例 (5 5 .6 % )检出HCV基因。除脾脏外 ,心脏、肾脏、胰腺、肾上腺、肠道、胆囊和淋巴结等脏器细胞内有HCV基因和HCV抗原表达。结论 肝外多种脏器细胞可能支持HCV复制 ;肝外HCV感染程度轻 。
- 严福明郝飞陈安慎顾长海赵西平赵利斌杨东亮郝连杰
- 关键词：原位杂交病毒复制HCV-RNA丙型肝炎
- 肝外和肝组织内HCV抗原表达的特点及其意义
- 1999年
- 目的:探讨丙型肝炎患者肝外组织内丙型肝炎病毒（HCV）感染状况及其意义。方法:采用免疫组化法检测9例丙型肝炎患者肾、心、胰和肠等肝外组织内HCV抗原，并与肝组织内抗原表达进行对比研究。结果:9例患者肝组织和其中6例（66.7％）的4种肝外组织检出了HCV抗原。抗原定位于组织细胞浆内。肝外组织中抗原表达阳性细胞种类多，但未见明显病变。肝组织中仅肝细胞内抗原表达阳性，病变严重。结论:肝外组织存在HCV感染。与肝组织比较，肝外组织感染可能属一种伴随状态，肝脏是感染的中心器官。肝外组织被感染可能是丙型肝炎易慢性化的重要原因之一。
- 严福明郝飞顾长海张绪清赵利斌
- 关键词：丙型肝炎病毒抗原
- 重型病毒性肝炎肝组织内丙型肝炎病毒抗原表达的研究被引量：2
- 1998年
- 目的：研究重型肝炎肝组织内丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）抗原表达及特点，探讨ＨＣＶ感染在重型肝炎发生中的地位和作用。方法：用免疫组化法检测２０例重型肝炎肝组织内ＨＣＶ抗原。结果：肝组织内ＨＣＶ抗原表达阳性率４５％（９／２０），其中慢性重型肝炎６０％（６／１０），亚急性４２．９（３／７），急性０％（０／３）。ＨＣＶ抗原仅在肝细胞内表达，可呈胞浆均质型、包涵体型和膜下型。９例肝组织ＨＣＶ抗原表达阳性患者均混合乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染。结论：单纯ＨＣＶ感染不是重庆地区重型肝炎的主要原因。
- 严福明郝飞顾长海
- 关键词：重型病毒性肝炎丙型肝炎病毒
