张集慧 作品数:37 被引量:365 H指数:7 供职机构: 中国科学院微生物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 高等学校全国优秀博士学位论文作者专项资金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 化学工程 更多>>
圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶的分离纯化及酶学性质 2002年 圈卷产色链霉菌硝基烷类氧化酶基因naoA在大肠杆菌中获得了成功表达 ,从含有重组质粒pNA1 0 1 (pET2 3b∷naoA)的工程菌株BL2 1 (DE3 )中分离纯化了硝基烷类氧化酶 ,SDS PAGE检测为均一。对纯酶进行了酶学性质及动力学研究。底物为 1 硝基丙烷、2 硝基丙烷和硝基乙烷时 ,在 0 4mol L的磷酸缓冲液中 ,酶的最适反应pH值为 7~ 8,最适反应温度为48℃~ 5 6℃。室温保存 6d后 ,酶的活性保持了 43 3 % ,但对 6 0℃以上的高温敏感。硫醇化合物如巯基乙醇、还原型谷胱甘肽不同程度地抑制酶活性 ,特别是NADH ,其浓度为 1mmol L时 ,酶活性几乎全部丧失。以 1 硝基丙烷为底物时 ,NaoA的Km 为 3 5 7mmol L ,Vmax 为0 1 99μmol (μg .min) 。 张集慧 马文勃 谭华荣关键词:圈卷产色链霉菌 分离纯化 酶学性质 圈卷产色链霉菌中SABs信号系统的多效调控 圈卷产色链霉菌是一株抗植物病原真菌的核苷肽类抗生素--尼可霉素的产生菌,具有链霉菌典型的发育分化周期。本实验室前期在该菌中发现并鉴定了三个丁烯酸内酯类信号分子SABs,并阐明了其诱导尼可霉素生物合成的调控机制,但SABs... 王文溪 张集慧 刘翔 田宇请 谭华荣关键词:链霉菌 信号分子 文献传递 灵芝原生质体制备、再生及融合的研究 被引量:35 1998年 报道不同菌龄、酶液浓度、稳渗剂对灵芝原生质体产率及不同种类、不同浓度的稳渗剂对原生质体再生的影响。结果表明,诱变后具抗药性标记的“中国红灵芝”菌种(mH1)原生质体制备时菌丝最适菌龄为48小时,酶液浓度为3%,稳渗剂以0.6mol/L蔗糖为佳;诱变后具抗药性标记的“韩国红灵芝”(mK1)原生质体制备时菌丝最适菌龄为40小时,酶液浓度为1%,稳渗剂为0.4mol/L甘露醇时原生质体产率最高。mH1,mK1原生质体均以蔗糖作稳渗剂再生率较高,其最佳浓度为0.6mol/L。在该条件下mH1原生质体再生率为3.20×10-2,mK1为5.40×10-2。在此基础上,以30%的PEG作为融合诱导剂进行灵芝原生质体融合,并获得了融合子,融合率为140×10-2。 曹文芩 郭顺星 徐锦堂 张集慧 陈晓梅关键词:灵芝 原生质体 Chemical Constituents of One Species of Endophytic Fungus in Taxus chinensis 被引量:4 2002年 Three compounds were obtained from the mycelia of an endophytic fungus Gliocladium sp. (designated as strain F) of Taxus chinensis (Pilg.) Rehd. growing in Fujian Province, China. Their structures were determined on the basis of spectral analysis. (20S,22S)-4a-homo-22-hydroxy-4-oxaergosta-7,24(28)-dien-3-one was a novel compound. 4,8,12,16-tetramethyl-1,5,9,13-tetraoxacyclohexadecane-2,6,10,14-tetraone was firstly isolated from the genus ofGliocladium and 6,9-epoxyergosta-7,22-dien-3-ol was firstly obtained from the strain F. 张集慧 郭顺星 杨峻山 肖培根氯丝菌素高产工程菌株及其构建方法 本发明提供了氯丝菌素高产工程菌株及其构建方法。本发明利用强启动子驱动氯丝菌素正调控基因的构思构建了重组工程菌株F2OE及YL04。与野生型相比,以两种不同方式构建的重组工程菌株F2OE及YL04产生的氯丝菌素水平均大幅升... 谭华荣 李月 张集慧 郑家珍文献传递 尼可霉素生物合成中信号分子介导的分子调控 尼可霉素是一种核苷肽类抗生素,能够有效地抑制真菌、螨虫等生长,是一种具有良好应用前景的农用抗生素。本研究旨在阐明圈卷产色链霉菌中信号分子及其受体在尼可霉素生物合成中作用的分子机制,并揭示信号分子的结构。通过基因组挖掘在圈... 王文溪 张集慧 谭华荣关键词:信号分子 调控基因 利用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达软骨素6-O-硫酸转移酶的方法及应用 本发明公开了一种利用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达软骨素6‑O‑硫酸转移酶的方法及应用。本发明构建了ODV‑e66编码基因遗传阻断的杆状病毒,并以该重组杆状病毒为载体在昆虫细胞中重组表达了软骨素6‑O‑硫酸转移酶。重组表达... 李金娥 王艳艳 田宇清 刘翔 张集慧 谭华荣链霉菌2-硝基丙烷双加氧酶基因及应用 本项发明属于应用环境微生物领域,具体地说,通过分子生物学技术从圈卷产色链霉菌(Streptomycesansochromogenes 7100)中克隆到一个新的基因,其编码的产物是一种2-硝基丙烷双加氧酶,在工业污染物硝... 谭华荣 张集慧 马文勃文献传递 氯丝菌素高产工程菌株及其构建方法 本发明提供了氯丝菌素高产工程菌株及其构建方法。本发明利用强启动子驱动氯丝菌素正调控基因的构思构建了重组工程菌株F2OE及YL04。与野生型相比,以两种不同方式构建的重组工程菌株F2OE及YL04产生的氯丝菌素水平均大幅升... 谭华荣 李月 张集慧 郑家珍谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究 被引量:1 2016年 【目的】由于谷氏菌素产生菌禾粟链霉菌的遗传操作效率较低,本研究在谷氏菌素生物合成基因簇成功异源表达的基础上,通过在异源宿主天蓝色链霉菌M1146中阻断谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD,研究其在谷氏菌素生物合成中的作用,为谷氏菌素生物合成途径的阐明奠定基础。【方法】以含有谷氏菌素生物合成基因簇的黏粒D6-4H为基础,通过PCR-targeting的方法分别将gouC和gouD敲除得到重组质粒p GOUe-ΔC和p GOUe-ΔD。通过接合转移将这两个重组质粒分别导入天蓝色链霉菌M1146中,获得gouC和gouD的缺失突变株M1146-GOUe-ΔC和M1146-GOUe-ΔD,通过HPLC分析突变株的谷氏菌素中间产物积累情况,分离纯化后对其进行结构鉴定和生物活性检测。【结果】gouC和gouD的缺失均导致谷氏菌素不能合成,突变株发酵液中积累了不同的中间产物,生物活性分析发现这些中间产物均失去了对肿瘤细胞的抑制活性。【结论】gouC和gouD是谷氏菌素生物合成的重要基因,与谷氏菌素肽基部分的肌氨酸残基合成相关。本研究为阐明谷氏菌素的生物合成机制提供了更多的依据。 韦俊宏 张集慧 江玲娟 谭华荣 牛国清关键词:生物合成基因簇