郭磊
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：浙江大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省分析测试基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人DNA聚合酶Polι体细胞基因敲除载体的构建
- 2005年
- 应用体细胞基因敲除技术的方法和原理,通过PCR扩增获得同源短臂和长臂,将其插入骨架载体pPL622,酶切鉴定插入方向并测序确证,成功构建了人Polι基因的击靶载体PSP-PLA,其中同源短臂长980 bp,长臂长3 217 bp。
- 杨月红俞萍郭磊
- 关键词：医学遗传学
- 常染色体显性遗传小眼球病与12个微卫星多态标志的初步连锁分析被引量：1
- 2004年
- 本文报道了一个常染色体显性遗传小眼球的大家系,初步排除了此家系致病基因在目前已知位点(CHX10、MITF、RX、MCOP、NNO1、NNO2)的可能,并探讨了与11号染色体上的微卫星DNA标志的连锁关系。采用聚合酶链(PCR)扩增微卫星DNA片段,扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,用银染显示结果;用MLINK连锁分析软件计算LOD值。结果显示,本家系小眼球致病基因与6个已知位点及11号染色体上的微卫星DNA标志之间不存在连锁,提示此家系的致病位点目前尚未被定位。
- 俞萍周强郭磊周永明罗媛媛章润月闫小毅丁可平洪子福张玉柱
- 关键词：常染色体显性遗传眼科疾病致病基因
- COL1A1-shRNA表达载体的构建及对胃癌细胞增殖迁移的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:构建COL1A1特异小干扰RNA(siRNA)表达载体,体外评价其对胃癌细胞BGC-823增殖迁移的影响。方法:根据文献获得3个COL1A1的siRNA靶序列,设计能转录短发夹状RNA(short hairpin RNAs,shRNA)的DNA序列,并与pSilencerTM4.1-CMV neo线性质粒载体连接,连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选获得重组质粒;经DNA测序鉴定重组体DNA序列正确后转染胃癌BGC-823细胞,利用G418筛选稳定表达COL1A1-shRNA的BGC-823细胞株。通过实时荧光定量RT-PCR及Western blot检测转染后细胞COL1A1在mRNA及蛋白质水平的表达;MTT法及Transwell法检测COL1A1干扰后胃癌细胞增殖及迁移能力的变化。结果:序列测定表明成功构建3个COL1A1-shRNA表达载体。实时荧光定量RT-PCR及Western blot检测显示,COL1A1-shRNA转染胃癌BGC-823细胞的COL1A1 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);MTT试验及Transwell迁移试验显示,转染后细胞增殖及迁移能力明显降低(P<0.05)。结论:COL1A1-shRNA转染胃癌BGC-823细胞能有效抑制细胞COL1A1的表达及癌细胞的增殖迁移。
- 李爱清姒健敏商燕甘丽红郭磊周天华
- 关键词：RNA干扰
- BIGH3基因的Arg555Trp突变引起颗粒状角膜营养不良被引量：4
- 2005年
- 目的 阐明颗粒状角膜营养不良(CDGGⅠ )的发病机制。 方法 采用聚合酶链式反应 -单链构象多态性(PCR SSCP)分析,对 1个CDGGⅠ病例进行BIGH3基因第 12号外显子的突变筛查,并对发现的异常泳动带进行DNA测序,以确定突变位点。 结果 CDGGⅠ患者在 12号外显子有Arg555Trp突变。 结论 BIGH3基因突变Arg555Trp是导致CDGG1的原因。
- 陈利丽俞萍顾扬顺杨月红阎小毅葛振吕娜郭磊
- 关键词：BIGH3基因突变聚合酶链式反应单链构象多态性分析
