杨正杰
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南京医科大学附属无锡第二医院更多>>
- 发文基金：上海市自然科学基金南京医科大学科技发展基金资助更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 改良比格犬成肌细胞的体外分离纯化培养及其生物学特性研究被引量：1
- 2014年
- 目的:建立一种体外分离、纯化、培养成年犬骨骼肌成肌细胞的简便有效方法,观察其生长增殖情况,并鉴定其生物学特征。方法:以成年比格犬为研究对象,采用机械分解法与IV型胶原酶和胰蛋白酶的二步酶消化法相结合分离获取犬成肌细胞,并采用差速贴壁法与免疫磁珠分选法相结合纯化成肌细胞。镜下观察分离纯化后的成肌细胞的细胞形态、生长状况,绘制细胞生长曲线,并采用流式细胞仪和免疫细胞化学等方法鉴定成肌细胞纯度。结果:原代培养6 h后可见呈圆形的单核细胞贴壁生长,起初为小圆形,48 h后可见梭形贴壁细胞,3 d后贴壁细胞明显增多,5 d左右进入对数增长期,9 d左右细胞单层融合接近90%。流式细胞仪检测纯化后的第4代(P4)成肌细胞显示,95%细胞表达CD56,Desmin免疫细胞化学染色显示细胞呈阳性反应。结论:该法可获取高纯度、高产量,具有良好增殖、分化能力的成肌细胞,并且获得的成肌细胞的生长增殖能力较强,符合半月板组织工程种子细胞的基本条件。
- 顾羊林王予彬朱文辉陈鹏杨正杰朱国兴
- 关键词：成肌细胞细胞培养生物学特性
