张文斌
- 作品数:2 被引量:15H指数:2
- 供职机构:华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部博士点基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 非洲菊原生质体制备及瞬时转化系统的建立被引量:12
- 2017年
- 非洲菊(Gerbera hybrida)已成为研究复杂花序进化与发育的模式植物。以非洲菊无菌组培苗叶片为材料,分析不同浓度纤维素酶及离析酶配比对非洲菊原生质体提取效率的影响,建立了稳定、高效的非洲菊原生质体提取与瞬时转化体系。结果表明,以2.0%纤维素酶+0.3%离析酶组合,在0.4 mol·L^(–1)甘露醇溶液中,酶解4小时,酶解温度为25°C,得到产量高达2.2×10~7个·g^(–1) FW及活力较高的原生质体,可直接用于植物蛋白亚细胞定位和蛋白间相互作用实验,转化效率达80%。该研究建立了非洲菊原生质体制备和瞬时转化体系,为非洲菊基因功能研究奠定重要的技术基础。
- 宋爱华张文斌孙姝兰李凌飞王小菁
- 关键词:非洲菊原生质体制备
- 非洲菊转基因毛状根诱导系统的建立被引量:3
- 2016年
- 非洲菊(Gerbera hybrida)是研究复杂花序发育的模式植物,目前存在转基因效率不高的问题。为建立非洲菊转基因毛状根诱导系统,本文探究了不同非洲菊品种、发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)菌种、外植体以及侵染和共培养时间等因素对非洲菊毛状根诱导的影响。实验所获得的最佳诱导条件为:非洲菊品种选取‘玲珑’,菌种选取发根农杆菌K599,外植体选取生长21-28 d的叶片叶基部,农杆菌菌液浓度OD(600)=0.6时侵染20 min,共培养2 d;在此培养条件下,生根率高达81.14%。进一步利用所建立的转化系统,成功获得了35S::At HBI1-GUS转基因毛状根,由于At HBI1蛋白具有促进细胞伸长的功能,与对照相比,转基因毛状根的生长速率显著提高。本文所建立的非洲菊转基因毛状根诱导体系将为非洲菊基因功能的研究,特别是生长及代谢相关基因的研究提供技术手段。
- 庞滨张文斌钟春梅王小菁
- 关键词:发根农杆菌非洲菊毛状根