龙璐
- 作品数：6 被引量：59H指数：4
- 供职机构：北京大学基础医学院病原生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HBV相关肝细胞癌肝组织中HBV cccDNA突变位点筛选分析被引量：6
- 2016年
- 目的阐明乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关肝细胞癌的癌组织与癌旁组织中HBV cccDNA全基因组的点突变模式及其与HBV cccDNA和总DNA含量的关系,寻找可以作为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者预后判断指标的突变位点。方法取23例HCC患者术后肝癌与癌旁组织各1份,采用Qiagen法提取DNA,采用滚环扩增HBV cccDNA,采用Taqman探针法定量测定HBV cccDNA和总DNA。采用PCR分段扩增HBV cccDNA全基因组,PCR产物纯化后测序,确定其基因型,并与标准野生株序列比对,确定HBV cccDNA的突变位点。结果肝癌与癌旁组织中HBV cccDNA突变频率较高的位点集中于X和C区,肝癌与癌旁组织突变个数之和大于10的位点有26个。G1719突变组HBV cccDNA和总DNA的含量均低于T1719野生型组(t=2.449,P<0.05和t=2.525,P<0.05),G1719突变组患者术后生存时间短于T1719野生型组(χ2=8.56,P<0.05),并且T1719G突变与患者BCLC分级相关,G1719突变组更倾向于较高的BCLC分级(χ2=6.296,P<0.05)。结论 T1719G突变可能成为HCC患者术后预后的早期预测因素,值得进一步研究。
- 焦凤萍龙璐谢宵梦于爱莲王玉
- 关键词：乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA突变肝细胞癌
- HCV 慢性感染及自发清除对血清微量元素含量的影响及其与血清白蛋白和HCV 病毒载量的关联研究被引量：4
- 2013年
- 目的：分析HCV慢性感染和HCV自发清除者体内血清微量元素锌、铁、镁、钙、铜和磷的含量特征及其与血清白蛋白和HCV病毒载量之间的关系。方法采用原子吸收分光光度法检测并比较HCV慢性感染患者（59人）、HCV自发清除者（65人）和健康对照者（48人）血清中上述6种微量元素的含量变化。分析HCV慢性感染者中微量元素水平与血清白蛋白和HCV病毒载量的关联性。结果 HCV慢性感染者血清中锌的含量明显低于健康对照者，铁、铜和磷的含量高于健康对照者；在HCV慢性感染患者中锌和血清白蛋白呈正相关关系（r＝0．4022， P＝0．0016），铁（r＝-0．3001， P＝0．0209）、铜（ r＝-0．3856， P＝0．0036）及磷（ r＝-0．3600， P＝0．0075）与血清白蛋白呈负相关；在HCV慢性感染者中血清锌（r＝-0．4367， P＝0．0005）与HCV病毒载量呈负相关，铜（r＝0．3328， P＝0．0139）和病毒载量呈正相关关系。 HCV自发清除者体内微量元素含量与健康对照者之间无明显差异，血清钙、镁水平在3组人群之间没有显著差异。结论 HCV慢性感染可引起血清中微量元素锌、铁、铜及磷的含量异常，随着HCV的自发清除体内微量元素含量恢复正常，在慢性HCV感染中微量元素的异常与肝功能和病毒载量的水平密切相关。
- 刘媛赵洁龙璐高见吕全军沈弢鲁凤民
- 关键词：白蛋白
- 慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞频数、表型和体外细胞毒功能研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞的频数、表型和体外细胞毒功能特征。方法采用流式细胞术检测33例慢性HCV感染者及21例健康对照者外周血CD56＋T细胞的频数和细胞表面活化性受体NKG2C、CD＋6、NKp46和抑制性受体CD＋58a、NKG2A的表达水平；检测体外未刺激及K562细胞刺激作用下CD56＋T细胞毒效应（CD＋07a）和细胞因子分泌水平（IFN-γ和TNF-α），并分析上述3种CD56＋T细胞功能指标之间的关联性。结果与健康对照相比，慢性HCV感染者外周血中CD56＋T细胞在淋巴细胞中的比例明显降低（P=0．018）。CD56＋T细胞表面的活化性受体NKG2C（P=0．015）、CD＋6（P=0．036）、NKpM6（P=0．001）均有不同程度降低，而抑制性受体CD＋58a、NKG2A未发现有统计学意义的差异（P〉0．05）。体外未刺激情况下，慢性HCV感染者CD56＋T细胞分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α均显著弱于健康对照组（P〈0．0001）；在K562细胞刺激作用下，慢性HCV感染者CD56＋T细胞CD＋07a水平及分泌细胞因子IFN-γ和TNF-α均呈显著降低趋势（P〈0．0001），且3种功能指标表达水平密切关联（r〉0．80，P〈0．0001）。结论慢性HCV感染者CD56＋T细胞频数降低，细胞毒能力和重要细胞因子分泌能力均明显减弱。该结果提示显著受损的CD56＋T细胞功能可能与HCV慢性持续性感染有关。
- 段昭君支玉红龙璐刘媛许强沈弢鲁凤民
- 关键词：T细胞细胞毒效应
- 新型国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的质量评价被引量：17
- 2013年
- 目的评价新型国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂（以下简称“新型定量试剂”）的质量。方法首先用基于磁珠法自动化核酸提取平台的新型定量试剂和Roche定量试剂对WHO的HBVDNA系列稀释标准品（50、200、2000、20000 IU／ml）进行溯源性分析，确定定量试剂检测的可靠性。然后，用2种定量试剂对HBVB和C基因型标准血浆（分别稀释为25、50、200、2000、20000、200000 IU／ml）分别在3个不同检测中心共进行216次平行检测，比较其准确度和精密度。最后，用2种定量试剂平行检测5份HBV DNA阴性血浆样本和37份不同病毒载量的HBV DNA阳性临床血浆标本，并评价其相关性和符合率。结果经溯源性分析，2种定量试剂在上述4个检测节点的实测对数值与理论对数值的差值偏差均在可接受范围之内（0．005～0．280 Ig IU／ml）。2种定量试剂测定各检测节点变异系数的结果经配对比较，HBV的B、C基因型血浆检测的精密度差异均无统计学意义（B基因型：t=1．226，P=0．275；C基因型，t=2．319，P=0．07）。2种定量试剂检测42份临床血浆标本的总符合率达97，62％（41／42），且检测37份HBV DNA阳性血浆标本结果显著相关（R^2=0．934，P〈0．0001）。结论新型定量试剂与Roche定量试剂在溯源性、符合率、精密度和血清盘评价中的差异无显著性，该定量试剂有良好的检测质量，可用于临床HBVDNA检测。（中华检验医学杂志，2013，36：280-285）
- 沈弢龙璐邓中平王杰戴立忠陈德喜谭德明庄辉鲁凤民
- 关键词：肝炎病毒乙型DNA病毒试剂盒
- 抗HCV抗体水平在不同HCV感染人群中的临床意义评价被引量：24
- 2014年
- 目的比较HCV单感染、人类免疫缺陷病毒（HIV）／HCV共感染、HCV自发清除者血清HCV抗体S／CO比值低值与高值的分布情况，对HCV不同感染状态下HCV抗体检测的临床意义进行初步评价。方法2009年对河南上蔡某村的129例HCV单感染者、98例HIV／HCV共感染者、65例HIV阴性的HCV自发清除者和48例HIV阳性的HCV自发清除者的血清或血浆样本进行HCV抗体、HCVRNA、ALT、AST检测，对HCV慢性感染者和HIV感染者分别进行HCV基因型分析和CD4＋T淋巴细胞计数检测，将各组人群的各项指标进行对比分析。2012年对该调查人群进行随访采样并检测HCV抗体水平。计量资料组间比较采用t检验，计数资料采用疋。检验；相关分析采用Pearson检验。结果HCV慢性感染者的HCV抗体水平几乎均为高值分布（S／CO≥10），而HCV抗体低值（1≤S／CO〈10）主要分布在HCV自发清除者和HIV／HCV共感染者中；HCV自发清除者的抗体水平随着时间推移发生衰减（2012年与2009年比：HIV阴性组：5．51土3．67与7．75±3．8，f=10．67，P〈0．01；HIV阳性组：4．93±3．35与7．61±3．47，t=9．52，P〈0．01），而HCV慢性感染者无此变化；HIV／HCV共感染者的HCV抗体S／CO比值与CD4＋T淋巴细胞数呈正相关（r=0．28，P=0．008）。比较不同HCV基因型的慢性感染者，HCV单感染组HCV-lb型患者的HCV抗体水平高于HCV-2a型（14．74±1．68与14．08±1．44，t=2．20，P=0．03）；HIV／HCV共感染者中，HCV—Ib型血浆ALT／AST水平升高的患者比例显著高于HCV-2a型（ALT：25／42与16／56，x^2=9．45，P=0．002；AST：28／42与18／56，x^2=11．49，P=0．001）。将HCV抗体水平、HCVRNA以及血浆ALT／AST检测结果联合分析，无论是否合并HⅣ感染，HCV抗体高值组的HCVRNA阳性率显著高于HCV抗体低值组（HIV阴性：128／151与1／43，z。=102．11，P〈0．01；HIV阳性：88／98与10／48，x^2=69．44，P〈0．01�
- 龙璐刘媛段昭君许强沈弢窦晓光庄辉鲁凤民
- 关键词：基因型共感染
- 基于Pre—NAT全自动核酸提取平台的高敏HBVDNA检测性能评价被引量：7
- 2015年
- 目的评价基于Pre—NAT全自动核酸提取系统的高敏HBV核酸定量试剂的检测性能。方法方法学性能验证。于2014年5月和7至9月分别在北京大学医学部病原生物学系实验室和上海交通大学医学院附属仁济医院检验科进行实验，采用HBVWHO标准品验证正确度与检测下限，A、B、c、D型标准血浆（6个浓度）重复检测验证精密度，高浓度HBV假病毒颗粒梯度稀释验证线性范围，以及144份临床血清评价与罗氏系统的相关性。结果正确度方面，该试剂在5个浓度水平的实测值与标准品理论值偏差均小于±0．35lgIU／ml（-0．17～0．32lgIU／ml）。精密度方面，A、B、C、D型标准血浆的检测重复性（CV）分别为：3．87％～6．32％、0．45％-14．68％、0．16％～8．36％、0．64％-13．01％；中间精密度（CV）分别为：5．67％-9．69％、1．28％～15．68％、0．36％～9．05％、1．69％-13．65％。线性范围评价显示在20～1×10^10IU／ml范围内呈良好的线性关系（r=0．998，P〈0．001）。检测下限验证结果，20IU／ml浓度水平检出率5／5。临床标本检测中，与国际通用Roche试剂符合率为100％（144／144）；104份阳性标本两者数据显著相关（r=0．984，P〈0．0001）。结论该高敏HBVDNA检测的正确度、精密度、检测下限和线性范围均表现良好，并与Roche试剂有良好相关性，有一定临床应用价值。
- 陈小颖龙璐李琼高见李天铭黄向博何磊陈香梅李敏沈弢
- 关键词：DNA病毒实时聚合酶链反应
