黄志刚
- 作品数：32 被引量：135H指数：7
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- SNaPshot技术对萎缩性胃炎IL-1B-1473单核苷酸多态性的检测被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨IL-1B-1473基因与萎缩性胃炎的相关性.方法:选择上海同济医院经病理确诊的慢性萎缩性胃炎和慢性浅表性胃炎患者各100例,收集其外周血标本和流行病学调查资料,抽提标本DNA,以多重SNaPshot技术检测IL-1B-1473单核苷酸多态性.结果:IL-1B-1473基因在萎缩组和非萎缩组的基因型分布频率未见显著性差异.IL-1B-1473基因与慢性萎缩性胃炎的萎缩程度无显著关联,携带-1473G/G的个体与携带-1473C/C者比较,其发生萎缩的危险性增加32%(OR=1.32,95%CI:0.55-3.16),但未达到统计学显著性水平.
- 叶荣菊黄志刚王讳王娜王韶英陈锡美
- 关键词：萎缩性胃炎多态性
- 肥胖与大肠腺瘤关系的临床及分子机制被引量：17
- 2008年
- 目的:初步了解肥胖人群患大肠腺瘤的危险性,并进一步深入探讨肥胖与大肠肿瘤的关系及其防治.方法:选择2006-12/2007-12在我院行结肠镜检查的患者539例,分为大肠腺瘤组(n=250)和正常对照组(n=289),测量身高、体质量、腰围及臀围,利用多因素Logistic回归进行相关性分析;从大肠腺瘤组中选择4例病理为管状腺瘤或绒毛管状腺瘤的大肠息肉组织,2例BMI>24kg/m2,WC>85cm;2例BMI<24kg/m2,WC<85cm,进行信号通路功能芯片基因筛查.结果:肥胖或腹型肥胖(以BMI和WC划分)患大肠腺瘤的调整后OR值分别为2.48(95%CI:1.19-5.20,P=0.016)和1.75(95%CI:1.15-2.66,P=0.009),其中男性调整后的OR值分别为4.10(95%CI:1.26-13.31,P=0.019)和1.70(95%CI:1.00-2.88,P=0.019),以BMI划分的超重组差异无统计学意义;以WHR划分的腹型肥胖在各种分析中均无统计学意义.基因芯片杂交结果显示,两组差异表达的基因共23个,其中BMI>24kg/m2组比BMI<24kg/m2组表达上调有6个,下调有17个,脂肪细胞因子Foxa2表达上调,IL-8和Leptin表达下调.结论:肥胖或腹型肥胖与大肠腺瘤的发生存在显著相关性,肥胖男性的患病风险明显大于女性;患大肠腺瘤肥胖人群的腺瘤组织中存在一些异常表达的因子.
- 王娜黄志刚陈锡美叶荣菊王讳张霞张建培
- 关键词：肥胖大肠腺瘤流行病学
- 兔抗人Argonaute2蛋白多克隆抗体制备及鉴定
- 2009年
- 为了制备兔抗人Argonaute_2(AGO_2)的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。采用合成特异性AGO_2多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人AGO_2多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和Western blot方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行AGO_2的免疫组化研究。结果显示,通过构建AGO_2多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,我们制备了兔抗人AGO_2蛋白多克隆抗体,经ELISA及Western blot证实兔抗人AGO_2抗体可特异性识别AGO_2多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在很多正常组织上皮细胞及肿瘤细胞胞浆中呈阳性染色。成功制备兔抗人AGO_2多克隆抗体,为进一步研究AGO_2在微小RNA/RNA干扰通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具。
- 陈林波郜恒骏王迎昕黄志刚陈锡美胡莺张小燕孟逊
- 关键词：ARGONAUTE多克隆抗体组织芯片
- TGF-β1在大肠癌发病机制中的作用
- 2007年
- 目的通过RT-PCR方法观察TGF-β1在大肠癌组织中的mRNA表达及RNA干扰阻断TGF-β1表达对大肠癌细胞生长周期和侵袭力的影响。方法收集20例各期大肠癌手术标本抽提RNA,用半定量RT-PCR方法检测各组织中TGF-β1的mRNA表达。用小片段TGF-β1的双链RNA（siRNA）转染大肠癌HCT116细胞,半定量RT-PCR检测TGF-β1mRNA受抑程度,流式细胞仪观察转染后细胞周期变化,软琼脂克隆实验检测肿瘤细胞生长及成瘤性的变化。结果在20例各期大肠癌中TGF-β1检测12例（60%）存在mRNA过度表达。小片断RNA转染显著抑制了肿瘤细胞TGF-β1的表达,使细胞HCT 116的S期细胞较对照组明显增高59%-82.5%,进入G2期细胞减少;转染组细胞克隆形成率较对照组显著下降。结论TGF-β1mRNA在大肠癌组织中过度表达,通过RNA干扰技术可以快捷方便的阻断TGF-β1mRNA表达,使大肠癌细胞S期阻滞并抑制肿瘤细胞生长、降低其成瘤性。
- 黄志刚冉志华陈锡美萧树东陆玮
- 关键词：TGF-Β1大肠肿瘤RNA干扰半定量RT-PCR
- 一组miRNA/RNAi通路中关键蛋白-Argo-naute系列多克隆抗体制备、鉴定及组织定位初步研究被引量：2
- 2009年
- 目的制备一系列Argonaute(AGO)蛋白多克隆抗体,并鉴定其特异性及其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法合成特异性AGO多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,致敏大白兔,制备系列兔抗人AGO多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和Western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行AGO的免疫组化研究。结果笔者制备了8个兔抗人AGO蛋白多克隆抗体,经ELISA及Western blot证实兔抗人AGO抗体可特异性识别AGO多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在大多数正常及肿瘤组织上皮来源细胞胞浆中呈阳性染色,其中Piwils抗体还可使星状胶质细胞瘤、脑脊膜瘤及胃癌癌细胞染色。结论本项研究成功制备系列兔抗人AGO多克隆抗体,为进一步研究AGO在miRNA/RNAi通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具。
- 王韶英陈锡美黄志刚郜恒骏胡莺张小燕孟逊
- 关键词：多克隆抗体组织芯片
- 磁激活细胞分选术联合混合抗体提高模拟恶性腹水中游离癌细胞检出效率的分析
- 2008年
- 背景磁激活细胞分选术（magnetic activated cell sorting，MACS）是一种新的免疫磁性分离技术。其原理是基于抗体对抗原的特异性识别，将50nm磁性微珠直接或者间接耦联在抗体上，与有相应抗原表达的细胞相连，在高强度、高梯度磁场中达到细胞磁性分离的目的。该法具有分离纯度和回收率均较高的优势，也能分离出体液中存在的少量肿瘤细胞。目的评价MACS联合一组肿瘤细胞标志物的方法对提高模拟恶性腹水中游离癌细胞检出效率的作用。方法选择5种与恶性腹水病因有关的肿瘤细胞株作为研究对象，采用免疫荧光反应和流式细胞仪（FCM）检测上皮相关抗原（epithlial-related antigen，EpCAM）、CA125、癌胚抗原和TAG-72共4种单克隆抗体及其混合抗体在各肿瘤细胞的表达。将肿瘤细胞以不同比例掺入单个核细胞中模拟恶性腹水细胞成分，与联合单个抗体进行分选对比，观察MACS术联合混合抗体分选肿瘤细胞的效率。结果FCM结果表明，混合抗体在5种肿瘤细胞的阳性表达率均高于4种抗体单独反应的阳性率。MACS术联合混合抗体检出模拟恶性腹水中肿瘤细胞的得率比联合单个抗体的得率要高，其中以2种胃癌细胞和结肠癌细胞的平均得率提高较多（分别为69．18％±20．84％比45．23％±11．54％、78．75％±15．42％比59．73％±16．640和85．63％±12．30％比76．88％±8．650），卵巢癌细胞次之（32．490±3．58％比31．79％±4．820），肝癌细胞最少（11．78％±0．430比7．16％±0．460）。结论与联合单个抗体进行分选相比，应用MACS术联合一组混合抗体的方法可有效提高恶性腹水中游离癌细胞的检出效率，尤其对胃肠道肿瘤所致的恶性腹水有潜在的临床应用价值。
- 王晓蕾陈锡美黄志刚王韶英
- 关键词：肿瘤转移腹水液免疫磁化分离
- 肥胖与结直肠肿瘤发生的机制研究被引量：2
- 2007年
- 超重或肥胖是一种病理状态,近年研究认为肥胖是包括结直肠癌在内的多种肿瘤的危险因素之一。目前研究发现脂肪组织分泌的一些因子与结直肠肿瘤发生、发展相关。本文针对肥胖的病理生理状态以及相关因子与结直肠肿瘤发生的分子机制作一综述。
- 王娜黄志刚陈锡美
- 关键词：肥胖症结直肠肿瘤分子作用机制
- 白细胞介素-21诱导自身免疫性肝炎患者自然杀伤细胞促炎症细胞因子分泌
- 2010年
- 自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）是一种原因不明的肝脏慢性炎症。既往研究报道，AIH患者肝脏内有大量激活的T细胞、B细胞和自然杀伤（NK）细胞浸润．分泌大量促炎症细胞因子，这些免疫细胞和炎症细胞因子在肝脏炎症损伤过程中起着重要作用。
- 黄培新夏兴洲黄志刚王兴鹏刘占举
- 关键词：细胞因子分泌自然杀伤细胞肝脏慢性炎症白细胞介素-21肝炎患者促炎症细胞因子
- 肥胖与大肠腺瘤相关性的研究被引量：4
- 2008年
- 目的初步探讨体重指数（BMI）、腰围（WC）、腰臀比（WHR）与大肠癌的癌前病变腺瘤的相关性。方法2006年12月至2007年12月选择无大肠癌病史且年龄在25～88岁的结肠镜检查患者，测量身高、体重、腰围、臀围，根据肠镜检查及活检病理结果纳入大肠腺瘤组（250例）和正常对照组（289例），利用多因素Logistic回归进行相关性分析。结果肥胖或腹型肥胖（以WC划分）患大肠腺瘤的调整后OR值分别为2．48（95％CI=1．19—5．20）和1．75（95％CI=1．15～2．66），P〈0．05和P〈0．01，其中男性调整后的OR值分别为4．10（95％CI：1．26—13．31）和1．70（95％CI=1．00—2．88），P均〈0．05，超重组未达到统计学差异；肥胖者患进展期和非进展期腺瘤的调整后OR值分别为2．71（95％CI=1．01～7．29）和2．39（95％CI=1．05～5．47），P均〈0．05；腹型肥胖者（以WC划分）患非进展期腺瘤的调整后OR值为2．03（95％CI：1．25—3．28），P〈0．01；但在进展期腺瘤组未达到统计学差异。超重组在进展期和非进展期腺瘤的患病风险较正常人群均无明显统计学差异。以WHR划分的腹型肥胖在各种分析中均无统计学意义。结论肥胖尤其是腹型肥胖与大肠腺瘤的发生显著相关，肥胖男性患病风险明显大于女性，肥胖对各期腺瘤的发生均显著相关。
- 王娜黄志刚陈锡美叶荣菊王慧张霞张建培
- 关键词：肥胖症大肠腺瘤病例对照研究
- 人Argonaute3蛋白：多克隆抗体制备、鉴定及组织芯片检测其在各种癌组织中的表达
- 2009年
- 目的:制备兔抗人Argonaute3(AGO3)的多克隆抗体,并鉴定其特异性,应用组织芯片初步探讨其在人类正常及肿瘤组织中的分布。方法:合成特异性AGO3多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏大白兔,制备兔抗人AGO3多克隆抗体,然后用亲和层析法纯化抗体。用ELISA和Western方法进行抗体验证,并应用人组织芯片进行AGO3的免疫组化研究。结果:通过构建AGO3多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,我们制备了兔抗人AGO3蛋白多克隆抗体,末次抗血清效价为1∶20 000,经ELISA及Western blot证实兔抗人AGO3抗体可特异性识别AGO3多肽,在人组织芯片中通过免疫组化染色显示该抗体在很多正常组织上皮细胞及肿瘤细胞胞浆中呈阳性染色。结论:本项研究成功制备兔抗人AGO3多克隆抗体,为进一步研究AGO3在微小RNA/RNA干扰通路中的作用及在人类疾病中的意义提供了有利工具。
- 黄志刚郜恒骏陈锡美胡莺张小燕孟逊
- 关键词：多克隆抗体组织芯片
