徐华
- 作品数：14 被引量：48H指数：3
- 供职机构：南通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家质检总局科技计划项目国家质检公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 四种重要生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法的建立被引量：5
- 2012年
- 目的建立包括蓖麻毒素B(Ricin toxion B,RTB)、肉毒梭菌毒素A(Clostri botulinum toxin A,CBTA)、金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)及产气荚膜毒素ε(Clostridium perfringens toxinε,CPTε)在内的4种重要生物恐怖因子的多重液相芯片检测方法。方法采用双抗夹心法原理和液相芯片技术平台,通过优化偶联抗体浓度和检测抗体浓度以及抗原抗体最佳孵育时间,建立4种生物恐怖因子液相芯片多重检测方法。结果反应条件优化实验结果表明,RTB、CBTA、SEA和CPTε偶联抗体的最佳用量分别为20μg、40μg、80μg、80μg;RTB、CBTA、SEA和CPTε检测抗体的最佳稀释比分别为1∶5000、1∶1000、1∶2000、1∶4000;4种毒素抗原抗体最佳孵育时间为60min。多重检测结果表明,本研究建立的毒素液相芯片多重检测方法可有效检测上述任意1种毒素、任意2种毒素组合、任意3种毒素组合并能同时检测4种毒素。灵敏度检测结果表明,RTB、CBTA、SEA、CPTε检测灵敏度分别为1 ng/ml、10 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml。结论本研究建立的4种常见生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法通过1次检测能同时检测RTB、CBTA、SEA、CPTε,是一种准确、灵敏、快速和高通量的检测方法。
- 徐华顾大勇胡春凌李永进史蕾刘春晓赵纯中张妮奇徐云庆姜声扬
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B液相芯片生物恐怖毒素
- 增殖诱导配体-siRNA／类脂质体复合体的临床前安全性评价
- 2012年
- 目的考察增殖诱导配体(APRIL)-小干扰RNA(siRNA)/类脂质体复合物的毒性。方法①小鼠iv给予APRIL-siRNA/类脂质体复合物500 mg·kg-1,连续14 d称量小鼠体质量及观察死亡情况;②每只豚鼠分别于第0,7和14天左侧涂抹0.2 ml APRIL-siRNA/类脂质体复合物130 g.L-1,2,4-二硝基氯代苯10 g.L-1(阳性对照),末次接触后14 d,将各受试物0.2 ml涂于右侧,持续6 h,观察24和48 h皮肤致敏情况;③小鼠分别iv给予APRIL-siRNA/类脂质体复合物125,250和500 mg·kg-1、环磷酰胺40 mg·kg-1(阳性对照)组。间隔24 h,第2次注射后6 h处死小鼠,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率;④小鼠分别iv给予APRIL-siRNA/类脂质体复合物125,250和500 mg·kg-1、环磷酰胺(阳性对照),每天1次,连续5 d,检测小鼠精子畸形率。结果与正常对照组相比,APRIL-siRNA/类脂质体复合物500 mg·kg-1组小鼠体质量和各组织无明显变化,没有小鼠死亡,未表现急性中毒现象。APRIL-siRNA/类脂质体脂质体复合物对豚鼠皮肤无致敏性。该脂质体复合物125,250和500 mg·kg-1组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率分别为(1.8±1.0)‰,(1.6±0.9)‰和(2.4±1.1)‰;精子畸形率分别为(1.98±0.27)%,(1.96±0.15)%和(2.04±0.16)%,与对照组微核率(2.2±1.3)‰和精子畸形率(1.96±0.29)%无明显差异。结论在本实验剂量范围内,APRIL-siRNA/类脂质体复合物对小鼠无明显毒性。
- 陈琼欧青叶索丽君徐华丁伟峰姜声扬
- 关键词：急性毒性试验皮肤疾病超敏反应微核试验
- 分枝PEI修饰的PLGA纳米粒转染DNA的研究
- 2012年
- 目的:建立基于聚(乳酸-羟基乙酸)纳米粒(PLGA)载DNA的基因转染体系,比较用空白聚(乳酸-羟基乙酸)纳米粒(PLG-A-E)吸附质粒DNA和用分枝PEI修饰后的PLGA纳米粒(PLGA-BPEI)吸附质粒DNA优缺点。方法:用乳化蒸发法制备纳米粒,对纳米粒进行表征研究,包括包封率、Zeta电位、粒径大小、稳定性,用荧光显微镜观察它们对NIH3T3和HEK293细胞的转染效率,用MTT检测对它们细胞的毒性。结果:制备了两种基于PLGA的纳米粒,PLGA-E和PLGA-BPEI粒径大小为200-270nm,zeta电位为0-30mV,在血清和不同的pH值时两者均较稳定,转染效率PLGA-BPEI较PLGA-E高,且释放时间早,但前者较后者对细胞毒性大。结论:这两种基于PLGA纳米粒均能有效转染质粒DNA,它们存在不同的优缺点,应根据不同需要进行选择。
- 季明辉胡贵方顾大勇谢伟东谈书勤徐华欧青叶
- 关键词：纳米粒基因转染
- 检测黄热病毒的侧向流免疫层析测定产品及其制备方法
- 本发明公开了一种检测黄热病毒的侧向流免疫层析测定产品及其制备方法。本发明提供的检测黄热病毒的侧向流免疫层析测定产品，包括相互连接的样品垫、吸水垫和具有相互分离的检测线和质控线的包被膜，所述包被膜位于所述样品垫和所述吸水垫...
- 史蕾马岚顾大勇吴峰向军俭徐云庆赵纯中冬冰何建安徐华刘春晓
- 文献传递
- 拉沙热现状分析及研究进展
- 2012年
- 拉沙热是由单股负链RNA病毒引起的一种传播性极强的急性出血性传染病,主要发生在西非地区,其他欧美国家也有输入性病例的报道,可以引起较高的发病率与死亡率。目前我国国际旅游人群日益增加,尽早发现拉沙病毒感染者,对遏制拉沙热在我国的流行传播具有非常重要的意义。本文主要对拉沙热的流行特点、主要流行区域以及各种检测技术的优缺点进行综述,为拉沙病毒的检测提供技术储备,指导口岸卫生控制。
- 徐华史蕾徐云庆
- 关键词：拉沙热流行病学
- 输入性登革热的实验室诊断
- 2012年
- 目的通过实验室检测发现并确诊1例输入性登革热阳性病例。方法采用实时荧光(RT-PCR方法对病人血清进行检测,并对RT-PCR扩增产物进行核苷酸序列测定,检测结果使用BLAST进行比对;并采用间接ELISA法和捕获ELISA法分别检测登革热特异性抗体IgG、IgM。结果通过实时荧光RT-PCR方法检测出该病例呈登革热病毒核酸Ⅲ型阳性;对RT-PCR扩增产物进行序列比对,结果显示与登革病毒III型同源性很好;ELISA法检测登革热特异性抗体IgG、IgM均为阴性。结论通过实验室确诊,该病例为登革热阳性病例。
- 史蕾徐华顾大勇徐云庆叶建忠黄育珍
- 关键词：登革热ELISAPCR
- 功能性消化不良罗马Ⅳ标准亚型临床特征研究被引量：33
- 2019年
- 背景功能性消化不良(FD)是消化不良患者的最常见原因,其症状重叠及精神心理异常十分常见,目前FD的诊断主要以功能性胃肠病的罗马标准为依据。目的了解符合罗马Ⅳ标准的FD不同分型患者的症状、重叠症状及精神心理状况。方法选取2017年6—12月于南通大学附属吴江区第一人民医院消化内科门诊就诊、18周岁以上接受胃镜检查的FD患者为研究对象,根据症状分型分为上腹痛综合征(EPS)48例、餐后不适综合征(PDS)74例及混合型(PDS重叠EPS)50例。对其症状构成、重叠症状及合并焦虑和/或抑郁状态情况进行归纳分析。结果EPS患者有餐后饱胀感、早饱、嗳气、上腹胀气症状者占比低于PDS患者,有上腹痛症状者占比高于PDS患者(P<0.017);混合型患者有餐后饱胀感、早饱、餐后恶心或呕吐症状者占比高于EPS患者,有上腹痛、上腹灼烧感症状者占比高于PDS患者(P<0.017)。混合型患者有重叠症状者占比高于EPS患者(P=0.015)。EPS患者症状总积分低于PDS患者,混合型患者症状总积分高于PDS、EPS患者(P<0.05)。无焦虑状态但有抑郁状态、有抑郁状态EPS患者症状总积分低于PDS患者,无焦虑状态但有抑郁状态、有焦虑状态且有抑郁状态、无焦虑状态且无抑郁状态、有焦虑状态、有抑郁状态混合型患者症状总积分高于PDS、EPS患者(P<0.05)。有重叠症状时,EPS患者症状总积分低于PDS患者;不管有无重叠症状,混合型患者症状总积分高于PDS、EPS患者(P<0.05)。结论 PDS患者较EPS患者的症状更复杂及严重,混合型患者较PDS、EPS患者的症状更复杂及严重。
- 姚学敏金颖徐华朱虹汤金海林琳
- 关键词：功能性消化不良功能性胃肠病焦虑抑郁
- 基于等离子共振原理的兽药联检芯片的建立
- 目的:设计和构建基于表面等离子共振原理的多种抗原/抗体同时检测的SPR生物传感器。方法:用单分子层自组装的方法修饰裸金膜,通过对点样液pH值、点样浓度进行筛选,确定最佳固定条件,对SPR生物传感器检测系统的灵敏度、特异度...
- 徐华顾大勇
- 关键词：表面等离子共振莱克多巴胺盐酸克伦特罗沙丁胺醇
- 文献传递
- 表面等离子共振技术结合滚环扩增法检测丙型肝炎病毒
- 2012年
- 目的研究滚环扩增(RCA)技术结合特异性表面等离子共振(SPR)金膜芯片检测丙型肝炎病毒(HCV)的方法。方法根据丙型肝炎x-tail区域的特异检测序列,设计并合成针对RCA法检测HCV的探针和引物,分成3组(实验组、阴性样品组和阳性样品组)进行RCA实验,验证RCA法检测HCV的特异性。将模板浓度按10倍梯度稀释,评价SPR技术结合RCA法检测的检测限。在普通金膜芯片的基础上进行表面化学处理,形成高特异性核酸芯片,用抗蛋白实验验证芯片抗蛋白能力。采用双通道SPR仪对RCA反应及信号放大反应进行实时观测。运用SPR技术结合RCA法检测63例临床血液样品,并与Real-Time PCR法比较,评价其灵敏度和特异度。结果 SPR技术结合RCA法对HCV阳性标准品的最低检测浓度为1 pmol/L,低于Real-TimePCR法的检测限(0.1 nmol/L)。SPR芯片具备良好的抗蛋白质非特异性吸附能力。双通道SPR仪对RCA芯片系统的检测信噪比为100,实现了对HCV的检测。对临床样品的检测灵敏度为90.0%(27/30),特异度为84.8%(28/33)(χ2=8.10,P=0.004)。结论 SPR技术结合RCA法将生物传感技术及原位扩增技术相结合,实现了快速、非标记和实时检测HCV。
- 季明辉胡贵方郑义顾大勇龙军鲁卫平何建安谈书勤史蕾刘春晓赵纯中徐云庆徐华欧青叶孙秋香滕娟
- 关键词：表面等离子共振丙型肝炎滚环扩增
- 小剂量X射线致小鼠海马组织细胞损伤及ATM表达改变被引量：3
- 2011年
- 目的研究小剂量电离辐射对小鼠海马组织细胞超微结构损伤、DNA损伤及毛细血管扩张性共济失调症突变基因(ataxia telangietisa mutant,ATM)蛋白表达变化。方法 32只ICR小鼠随机分为实验组和对照组,分别行X射线照射(0.4 Gy)和假照射(0 Gy)后于4、12、24、48 h进行取材。电镜观察海马组织细胞超微结构损伤;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤;蛋白免疫印迹法检测海马组织中ATM蛋白的表达情况。结果电镜结果显示,X射线照射后,海马组织细胞的超微结构损伤随时间的延长而加重;单细胞凝胶电泳结果显示DNA损伤由4 h开始上升,12 h到达高峰,24 h开始有回落趋势,48 h持续下降;Western blot结果显示ATM蛋白表达随时间的延长而增加。结论小剂量电离辐射致小鼠海马细胞不同程度的超微结构损伤并呈现时间-效应关系;小鼠海马组织中DNA损伤和ATM蛋白表达有明显的时间依赖关系。
- 姜声扬徐华季斌汤乐民陈玉均韩毓顾晓松
- 关键词：电离辐射小鼠海马超微结构损伤DNA损伤ATM
