目的探讨白藜芦醇、杨梅素等天然多酚化合物对非小细胞肺癌PC9/G细胞吉非替尼(gefitinib,Gef)敏感性和T细胞分化蛋白(myelin and lymphocyte protein,MAL)表达水平的影响。方法白藜芦醇20μmol·L-1、杨梅素5μmol·L-1、芹菜素10μmol·L-1、木犀草素10μmol·L-1处理后,MTT法检测PC9/G细胞Gef敏感性的变化;RT-PCR检测细胞中MAL m RNA表达水平;MSP法检测细胞中MAL基因转录起始区域甲基化状态。结果白藜芦醇、杨梅素、芹菜素、木犀草素均能不同程度地增加PC9/G细胞对Gef的敏感性(P<0.05,P<0.01);上述多酚化合物处理72 h可使PC9/G细胞中MAL基因甲基化条带减弱,非甲基化条带明显增强,其中白藜芦醇和杨梅素的作用较强;四种化合物可明显增加PC9/G细胞中MAL m RNA的表达水平(P<0.01)。结论低剂量白藜芦醇、杨梅素等多酚化合物预处理可不同程度地增加PC9/G细胞对Gef的敏感性,降低细胞中MAL基因甲基化水平,增加MAL m RNA表达水平。推测上述多酚化合物对MAL基因去甲基化的影响,可能是其增敏Gef的机制之一。
目的探究非小细胞肺癌(NSCLC)细胞中T细胞分化蛋白(MAL)表达水平与吉非替尼(Gefitinib,Gef)敏感性的关系,并研究MAL基因的表观遗传学调控及其对Gef敏感性的影响。方法 MTT法检测Gef对不同NSCLC细胞的增殖抑制作用;RT-PCR及Western blotting检测细胞中MAL m RNA和蛋白表达水平;MSP检测细胞中MAL基因转录起始区域甲基化状态;探究表观遗传学药物地西他滨(decitabine,DAC)、伏立诺他(vorinostat,SAHA)预处理对MAL基因表达和Gef敏感性的影响。结果与Gef敏感细胞相比,耐药细胞中MAL m RNA及蛋白水平下调或缺失(P<0.05,P<0.01),提示MAL可能与细胞对Gef敏感性有关;耐药细胞中MAL基因转录起始区域呈现高甲基化,可能是MAL表达下调的主要原因;DAC处理可明显逆转MAL基因的高甲基化,恢复MAL m RNA表达,与SAHA联用后其促进作用更为明显;恢复MAL表达的耐药细胞对Gef敏感性显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论对Gef耐药的NSCLC细胞中MAL表达下调或缺失,转录起始区域高甲基化可能是其主要原因;逆转MAL高甲基化状态、恢复其表达可增加耐药细胞对Gef的敏感性。
