陶佳丽
- 作品数：7 被引量：14H指数：3
- 供职机构：山西农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- cGAS——一种胞质DNA感应器的研究进展被引量：3
- 2016年
- 机体天然免疫领域的最新研究发现了一系列具有感应胞内核酸作用的蛋白质,其中受到广泛关注且已经得到确认的是一种被称为cGAS的蛋白质。cGAS全称Cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate synthase,即环磷酸鸟苷-腺苷合成酶。大量的研究已经发现cGAS能感应入侵宿主细胞的病毒性或细菌性DNA,通过重要分子cGAMP、STING的相关作用,产生大量的干扰素以及其他种类的细胞因子,进而发挥重要的抗病毒作用。本文就cGAS-DNA感应通路以及cGAS与抗病毒免疫反应及自身免疫性疾病的研究进展进行综述,以期为其功能研究提供良好的理论基础。
- 原慧陶佳丽张亮姜俊兵
- 关键词：STING抗病毒作用
- 畜牧兽医中外泌体的研究进展被引量：4
- 2017年
- 外泌体(exosome)尺寸大小为30~100 nm,可由多种细胞分泌到胞外,如T细胞、B细胞、上皮细胞、树突状细胞和肿瘤细胞等,尿液、血液、乳液、唾液和精液等生物体液中也能分离到外泌体。外泌体作为一种新型的物质携带载体,被证明能够携带蛋白质、DNA、mRNA和miRNA等具有生物活性的物质,并将这些物质转运到受体细胞,改变受体细胞遗传信息。外泌体的研究从最开始的分离鉴定已经逐渐过渡到相关功能的验证。例如,外泌体能够携带病毒特异性结构蛋白参与病毒在细胞间的传递,病毒依靠外泌体逃避机体免疫监控;癌细胞分泌的外泌体能够影响癌细胞的转移和扩散;母乳中的外泌体能够通过自身携带的营养物质调节子代免疫系统发育等。因此,外泌体功能的研究与利用已成为当下研究的热点。
- 张亮扆妍妍陶佳丽段马魁姜俊兵
- 关键词：外泌体畜牧兽医病毒生物学功能
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的MARC-145细胞中外泌体的分离与鉴定被引量：2
- 2017年
- 旨在寻找有效方法,能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中分离细胞产生的外泌体,并为探索外泌体在PRRSV感染细胞时的作用奠定基础。使用试剂盒提取MARC-145细胞产生的外泌体,利用电镜负染色法和Western blot技术对MARC-145细胞产生的外泌体进行鉴定;采用碘克沙醇速率区带离心分离MARC-145细胞产生的外泌体,并用Western blot技术检测外分泌体的分布区间。用PRRSV感染MARC-145细胞后,使用试剂盒对MARC-145细胞产生的外泌体进行初步分离后,采用免疫磁珠捕获技术进行进一步纯化,并使用Western blot进行验证。Western blot结果显示MARC-145细胞产生的外泌体存在特异性标记蛋白CD63、Tsg101和Alix,不存在外泌体非标记蛋白EEA1、GRP94和Cytochrome C;电镜负染色结果显示MARC-145细胞产生的外泌体尺寸大小处于30~100nm,符合外泌体特征。利用Western blot对碘克沙醇速率区带离心中收集到的样品进行分析,结果显示MARC-145细胞产生的外泌体分布于7.2%~18%碘克沙醇密度区间。Western blot结果显示免疫磁珠捕获法获得的对照组不存在外泌体标记蛋白Tsg-101。以上结果表明MARC-145细胞能够产生外泌体,并且通过免疫磁珠捕获法能够从PRRSV感染的MARC-145细胞中将其分离。
- 张亮王帅帅陈忍霞陶佳丽范阔海段马魁扆妍妍姜俊兵
- 关键词：MARC-145细胞外泌体免疫磁珠
- 鼠源REG3α二聚体蛋白的体外表达及抗肝癌细胞功能
- 2017年
- 利用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统对鼠源胰岛再生源蛋白(regenerating islet-derived protein,REG)REG3α二聚体进行表达,并对其体外抗肝癌细胞作用进行初步研究。通过DNA重组技术构建密码子优化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体,用电转化的方法将线性化的重组质粒pwPICZalpha-REG3α二聚体导入毕赤酵母,经甲醇诱导表达重组蛋白,并用Ni-NTA Resin柱和阴离子交换柱对其进行纯化,用纯化后的蛋白进行体外抗肝癌细胞试验,通过MTT法测REG3α二聚体蛋白对肝癌细胞的半数有效浓度。SDS-PAGE和Western blot鉴定结果显示在29.6 ku处有特异性条带,并且以剂量和时间依赖的方式抑制人肝癌细胞SMMC-7721的活性。研究表明获得了具有生物活性的鼠源重组REG3α二聚体蛋白,为进一步研究REG3α二聚体蛋白功能提供理论依据。
- 陶佳丽郭夏斐范阔海张亮段马魁王志瑞姜俊兵
- 关键词：巴斯德毕赤酵母抗肝癌细胞
- PRRSV感染对Marc-145细胞IKKγ基因表达水平的影响被引量：1
- 2018年
- 通过分析猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染Marc-145细胞模型中IKKγmRNA和蛋白表达量的变化,揭示NF-κB通路的调节因子IKKγ与PRRSV之间的关系,为进一步研究通路与病毒感染之间的关系奠定基础。本研究通过间接免疫荧光（IFA）法评价建立的PRRSV感染Marc-145细胞模型;通过MTT法检测LY294002抑制率。试验分为细胞对照组、抑制剂（LY294002）组、病毒组、抑制剂＋病毒组。通过q PCR和Western blot检测不同处理组的IKKγ表达量的变化,探究IKKγ参与抗PRRSV的分子免疫机制。q PCR结果显示：与对照组相比,病毒组IKKγmRNA水平上调,差异显著（P〈0.05）;抑制剂组mRNA水平下调,差异极显著（P〈0.01）;抑制剂＋病毒组mRNA水平下调,差异极显著（P〈0.01）。Western blot结果显示：与对照组相比,感染PRRSV后IKKγ蛋白水平上调,加入抑制剂LY294002后IKKγ蛋白表达下调;抑制剂＋病毒组IKKγ蛋白表达下调。研究表明,LY294002抑制剂影响了PRRSV复制转录过程;IKKγ在感染PRRSV后的分子免疫协调机制中发挥作用。
- 段马魁姜芳陶佳丽张亮范阔海姜俊兵
- 关键词：PRRSVNF-ΚB通路
- 鼠源重组UBC13蛋白对脂多糖诱导的小鼠急性炎症的影响被引量：1
- 2019年
- 试验旨在探讨鼠源重组UBC13蛋白对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性炎症的影响。将24只SPF雌性小鼠随机分成4组:PBS组,LPS模型组,重组UBC13蛋白高、低剂量组(分别为100和25μg/只),每组6只。LPS模型组与各蛋白剂量组腹腔注射20 mg/kg LPS,PBS组腹腔注射等体积PBS;注射结束1 h后,各蛋白组按相应剂量背部皮下多点注射重组UBC13蛋白,PBS组与LPS模型组注射等体积PBS。给予蛋白24 h后处死小鼠。收集小鼠肺脏、脾脏、胸腺及肝脏组织,计算脏器指数,HE染色观察组织病理学变化,实时荧光定量PCR检测肺脏、脾脏、胸腺和肝脏中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA的相对表达量,以及肺脏中iNOS mRNA的相对表达量,综合评价鼠源重组UBC13蛋白对LPS诱导小鼠急性炎症的影响。结果显示,与PBS组相比,LPS模型组小鼠肺脏、脾脏及肝脏指数均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),且肺脏、脾脏和肝脏组织均出现病理变化。实时荧光定量PCR结果显示,与PBS组相比,LPS模型组肺脏、脾脏、胸腺和肝脏中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量均极显著升高(P<0.01),肺脏中iNOS mRNA相对表达量也极显著升高(P<0.01);与LPS模型组相比,UBC13蛋白高剂量组肺脏、脾脏和肝脏中病理变化明显改善,肺脏、肝脏、脾脏中IL-1β、TNF-α、IL-6及肺脏中iNOS mRNA表达量均极显著降低(P<0.01);胸腺中TNF-αmRNA表达量显著降低(P<0.05),IL-6 mRNA和IL-1β表达量极显著降低(P<0.01)。表明鼠源重组UBC13蛋白可下调炎性因子的表达,从而改善LPS诱导的小鼠急性炎症反应。
- 韩蓉王春陶佳丽任路路郭音姜俊兵
- 关键词：急性炎症炎性因子
- 重组UBC13对RAW264.7炎症因子mRNA表达的影响被引量：4
- 2017年
- 为了研究重组蛋白UBC13对RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症因子mRNA表达量的影响,采用噻唑蓝(MTT)法检测UBC13对RAW264.7细胞活力的影响,qPCR法检测不同浓度UBC13(20、10、5μg/mL)在不同时间点(3、6、9、12、24h)对RAW264.7细胞产生的IL-6、IL-1β、TNF-α和COX-2 4种炎症因子mRNA表达量的影响。结果表明,在整个试验时间范围内IL-6、IL-1β、TNF-α和COX-2mRNA表达量呈现逐步降低的趋势;与细胞对照组组相比,在24h时IL-6、IL-1β、TNF-α和COX-2mRNA表达量显著降低(P<0.05)。说明重组蛋白UBC13作用于RAW264.7细胞24h时能够明显抑制RAW264.7细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α和COX-2的mRNA表达,并且具有药物剂量依赖性。
- 张亮扆妍妍陶佳丽段马魁姜俊兵
- 关键词：小鼠巨噬细胞炎症因子基因表达
