杨丽娟
- 作品数：24 被引量：78H指数：5
- 供职机构：清华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省社会发展科技计划云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 同型半胱氨酸对小鼠糖异生作用的影响被引量：3
- 2013年
- 目的研究高同型半胱氨酸血症中肝脏组织葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)的表达,探讨同型半胱氨酸对糖异生作用的影响。方法 50只小鼠随机分为高同型半胱氨酸血症(HHcy)组和正常对照组,每组25只;含1.5%的蛋氨酸饮水3个月制造高同型半胱氨酸动物模型。3个月后,各组测定空腹血糖、空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数;利用逆转录PCR(RT-PCR)和Western blot方法检测肝脏的G6Pase和PEPCK表达的变化。结果与正常对照组比较,HHcy组空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数增加(P<0.05);RT-PCR发现HHcy组肝脏的G6Pase和PEPCK的mRNA水平明显增加(P<0.05);Western blot表明HHcy组肝脏的G6Pase和PEPCK的蛋白质表达水平明显增加(P<0.05)。结论同型半胱氨酸可能通过增强糖异生作用,导致肝糖的输出增多,与胰岛素抵抗的发生有关。
- 王雅楠杨丽娟王文林冯维杨桂莉王芳李树德
- 关键词：高同型半胱氨酸血症同型半胱氨酸葡萄糖-6-磷酸酶
- 囊泡运输相关蛋白VAP-33在小鼠树突状细胞肉瘤细胞株DCS细胞中的表达及其功能被引量：2
- 2009年
- 目的探讨囊泡运输相关蛋白VAP-33在小鼠树突状细胞肉瘤细胞株DCS细胞中的表达及其功能。方法用1％TritonX—114提取DCS细胞膜蛋白，用已制备的DCS细胞多克隆抗体（pAb）及蛋白A＋G琼脂糖进行免疫沉淀，所得样品利用质谱技术进行分析，检测到VAP-33蛋白在DCS细胞中有表达，继而DCS细胞经不同量抗原（150、850、1500μl）刺激24、48、72h后观察细胞形态及吞噬能力的变化，同时通过间接免疫荧光、共聚焦显微镜、Western blot等方法检测了VAP．33的分布及表达变化。0．5mol／L胰岛素刺激DCS细胞20min后，采用Western blot检测DCS细胞全蛋白、胞质蛋白、膜蛋白中VAP-33、葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）的表达变化，共聚焦方法观察胰岛素刺激前后VAP-33和GLUT-4在DCS细胞中的表达及定位变化。实验中均以常规培养的DCS细胞作为对照。结果VAP-33蛋白主要表达在DCS细胞膜和胞质中；在外来抗原刺激下，随抗原量的增加及作用时间的延长DCS细胞趋向成熟树突状细胞，VAP-33表达量降低，对辣根过氧化物酶的吞噬能力增强。胰岛素刺激后，VAP-33与GLUT-4有共定位。结论VAP-33在树突状细胞来源的肿瘤细胞中表达，与树突状细胞的抗原加工有关，在葡萄糖的转运中起一定作用。
- 杨振丽刘玉琴卞晓翠顾蓓冯海凉杨丽娟
- 关键词：树突细胞抗原呈递葡萄糖转运体4型
- Ⅳ型登革病毒中国株LD34在KMB17细胞上的适应性及其生物学特性被引量：1
- 2012年
- 目的研究Ⅳ型登革病毒中国株LD34在人胚肺二倍体细胞KMB17上的传代适应性及其生物学特性。方法将Ⅳ型登革病毒中国株LD34在C6/36细胞上扩增,并采用微量细胞病变法测定病毒的感染性滴度。以2.0 MOI的病毒接种KMB17细胞传代培养,筛选KMB17细胞适应株,并进行培养条件的优化。将Ⅳ型登革病毒中国株LD34 KMB17细胞适应株连续传10代,测定病毒的感染性滴度,免疫荧光法检测病毒的抗原性,RT-PCR法扩增登革病毒的特异性基因。结果筛选出的Ⅳ型登革病毒中国株LD34在KMB17细胞上的最佳培养条件为病毒接种MOI 0.4,培养基血清浓度5%;其感染KMB17细胞后可产生明显的细胞病变(CPE),连续传10代,病毒滴度达7.75 CCID50/ml;第10代病毒的抗原性呈阳性;第10代病毒能扩增出511 bp的登革病毒特异性基因和393 bp的Ⅳ型登革病毒特异性基因。结论获得了Ⅳ型登革病毒中国株LD34 KMB17细胞适应株,病毒保持了原始毒株的基本生物学特性,且具有较好的抗原性。
- 赵玉娇龙海亭潘玥陈俊英杨丽娟岳耀斐孙强明
- 关键词：登革病毒人胚肺二倍体细胞适应性生物学特性
- CD133在人结肠癌细胞分化中的作用
- CD133分子在多种肿瘤包括结肠癌中都用来作为肿瘤干细胞的一个标记,但是它本身的的功能现在还不清楚。我们用Western blotting检测了44种人肿瘤细胞系中CD133的表达,8种肿瘤细胞系呈阳性表达,其中5个是结...
- 冯海凉杨丽娟卞晓翠杨振丽顾蓓张宏王春景苏小玲赵晓梅刘玉琴
- 关键词：CD133结肠癌肿瘤干细胞分化
- 文献传递
- Ⅱ型登革病毒D01090株在人胚肺二倍体细胞KMB17上适应株选育及初步鉴定
- 2012年
- 目的:选育能在人胚肺二倍体细胞KMB17上稳定增殖的Ⅱ型登革病毒适应株,为研发以人源性细胞为基质的登革疫苗候选株奠定基础。方法:将Ⅱ型登革病毒中国株D01090提取病毒基因组,通过RT-PCR法进行登革病毒型别鉴定后,在C6/36和Vero细胞上进行毒种扩增和滴度测定;将D01090毒株以4.0MOI接种KMB17细胞并反复传代至病毒完全适应在细胞内扩增,并连续传代10代,选育出良好的KMB17细胞适应株;病毒培养液经蔗糖梯度离心和超速离心后获得高浓度病毒液,接种KMB17细胞后通过透射电镜超薄切片检测细胞的病理变化;然后经过三轮蚀斑纯化筛选出纯化病毒株,免疫荧光法检测病毒纯化株的抗原性。结果:以Ⅱ型登革病毒中国株D01090基因组为模板,能扩增出511bp的登革病毒特异基因和119bp的Ⅱ型登革病毒型特异性基因。病毒经C6/36细胞扩增后滴度达4.5CCID50/ml,感染KMB17细胞至第三代可产生明显的细胞病变(cytopathic effect,CPE),连续传10代细胞病变速度逐渐增快,至第10代达到增殖高峰,病毒滴度达5.0CCID50/ml;将病毒感染6天后病变达+++的KMB17细胞进行超薄切片后经透射电镜观察细胞的病理变化,镜下可观察到内质网中新组装成的病毒颗粒,细胞周围产生很多分裂的小碎片,伴有游离出胞的病毒;三轮蚀斑纯化后筛选出纯化克隆,免疫荧光法检测病毒的抗原性呈阳性。结论选育出了能稳定传代且病毒扩增量高的Ⅱ型登革病毒KMB17细胞适应株,经蚀斑纯化后仍保持较好的抗原性。
- 赵玉娇潘玥阎玲梅岳耀斐杨丽娟孙强明
- 关键词：生物学特性
- 钙离子稳态失调与癌症增殖转移关系的研究进展被引量：4
- 2017年
- 自1944年Carruthers和Suntzeff第1次描述了钙离子与癌症之间的关系以来,钙离子稳态失调就被认为与肿瘤的发生发展有着必然的联系.近年来越来越多的研究发现无论是细胞增殖或转移都与钙离子失衡关系密切,而钙离子调控机制的异常是钙离子失调的主要诱因.对钙离子失调的可能原因和其与癌症增殖转移间的关系进行综述.
- 朱宇何易晓杨丽娟王芳
- 关键词：增殖
- HPV16型E6、E7变异与宫颈癌发生发展的研究进展被引量：22
- 2016年
- 宫颈癌是全球15~44岁女性中第二常见的恶性肿瘤,每年的死亡人数约为265 653人,在中国,宫颈癌的发生率及死亡率仍较高。高危型人乳头状瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌前病变及宫颈癌发生的必要条件,HPV16是最常见的高危人乳头瘤病毒。HPV16编码的E6和E7蛋白在HPV相关的肿瘤中起关键作用。近年来的研究揭示了HPV16 E6、E7基因的变异引起氨基酸变化可影响E6、E7蛋白与p53、pRb的结合,进而与宿主细胞恶性转化相关。本文将对近年来HPV16 E6、E7变异在宫颈癌发生发展中的作用作一综述。
- 杨丽娟姚宇峰严志凌杨宏英
- 关键词：HPV16宫颈癌
- 重组Ⅱ型登革病毒NS1的表达及其免疫原性的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:表达制备重组Ⅱ型登革病毒非结构蛋白NS1,检测该重组表达蛋白的免疫原性,为检测试剂盒的研制提供基础。方法:根据Ⅱ型登革病毒NS1蛋白基因序列(GenBank登录号:NC_001474),对基因序列进行编码密码子优化后进行全基因合成,随后,经双酶切将目的片段克隆到表达载体pET28a上,通过IPTG诱导表达;表达产物经Western blot鉴定后,进一步进行蛋白纯化和透析复性,制备获得重组Ⅱ型登革病毒NS1蛋白。收获的NS1蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,通过间接酶联免疫学方法测定其效价,检测其免疫原性。结果:成功构建了Ⅱ型登革病毒NS1蛋白的表达载体。Western blot显示表达的重组蛋白能够被NS1单抗特异性的结合,纯化复性后的重组蛋白在小鼠体内表现出良好的免疫原性。结论:重组表达的NS1蛋白有良好的免疫原性,为以后的NS1单克隆抗体的制备和登革病毒检测试剂盒的研制提供了良好的基础。
- 李多杨丽娟赵玉娇潘玥陈俊英付娟娟黄新伟邱丽娟孙强明
- 关键词：登革病毒重组蛋白NS1蛋白免疫原性ELISA
- 3D打印技术在医学形态学教学中的应用展望被引量：9
- 2016年
- 医学形态学是重要的医学基础课,课程要求学习者要通过大量的人体标本掌握正常人体的组织结构、病变组织的结构特征和变化,以便为将来学习临床课程,更好地服务于患者打下坚实的基础。但尸体剖验受传统观念等客观因素的影响数量减少,加上医学形态学标本的陈旧等问题,影响了医学形态学的教学质量。随着3D打印技术的出现和日渐成熟,给医学形态学的教学带来了新的契机。
- 刘锐吴春云李晓文俞志成杨丽娟钱忠义
- 关键词：3D打印医学形态学医学教育
- 云南省人乳头瘤病毒分子分型及致癌基因核酸定量检测技术建立应用
- 孙强明席珏敏陈俊英潘玥杨丽娟岳耀斐王晓丹
- 项目技术内容：人乳头状瘤病毒（HPV）感染是导致宫颈癌的一个主要因素。HPV感染率及型别分布有很强的地域性。该项目对7146份云南省门诊、正常体检妇女及宫颈癌患者宫颈细胞标本进行HPV 130余种型别感染情况的全谱筛查，...
- 关键词：
- 关键词：乳头瘤病毒生物信息学
