张涛
- 作品数：9 被引量：11H指数：2
- 供职机构：青海大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海大学中青年科研基金青海省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 蛋白磷酸酶4在缺血性脑卒中大鼠肝、脑组织中的差异表达
- 2022年
- 目的探讨蛋白磷酸酶(PP)4在缺血性脑卒中大鼠肝、脑组织中的表达是否存在差异。方法45只健康雄性SD大鼠随机分为正常(NORMAL)组、假手术(SHAM)组、大脑中动脉阻塞(MCAO)组各15只,MCAO组再分为MCAO-2 h组、MCAO-6 h组、MCAO-12 h组3个亚组(各5只)。通过改良线栓法建立MCAO模型模拟缺血性脑卒中。采用尼氏染色观察脑组织形态学改变;经qPCR及Western印迹测定脑卒中后PP4 mRNA及蛋白水平的变化。结果尼氏染色显示MCAO组梗死区尼氏小体数量减少,随时间延长,尼氏小体数量递减,NORMAL组和SHAM组未见明显异常;MCAO-2 h组、MCAO-6 h组、MCAO-12 h组脑组织PP4C mRNA水平较NORMAL组显著降低(P<0.05,P<0.001);MCAO-2 h组肝组织PP4C mRNA水平较NORMAL组显著升高(P<0.001);MCAO-2 h、MCAO-6 h组脑肝组织PP4R2蛋白水平较NORMAL组显著降低(P<0.001,P<0.01);MCAO-2 h组、MCAO-6 h组、MCAO-12 h组肝组织PP4R2蛋白水平较NORMAL组显著升高(P<0.01);除MCAO-12 h组肝组织PPX蛋白水平较NORMAL组显著降低(P<0.01)外,各组脑组织、肝组织PPX蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论PP4在缺血性脑卒中肝、脑组织表达存在差异,提示可能参与了缺血性脑卒中缺氧的适应。
- 田美媛侯静黄登亮张耀刚江源孙莉张涛李志琴童思贤马艳艳
- 关键词：能量代谢
- 多房棘球蚴原头节感染后阻断PD-1对巨噬细胞吞噬功能的影响
- 2023年
- 目的研究多房棘球蚴原头节感染后巨噬细胞吞噬功能的变化。方法免疫组化分析巨噬细胞在泡型包虫病患者肝脏中的分布;阻断PD-1、多房棘球蚴原头节与巨噬细胞共培养分析巨噬细胞的吞噬功能和CD47、PD-1的表达水平。结果CD68标记巨噬细胞发现巨噬细胞在泡型包虫病患者病灶近旁肝脏组织聚集;多房棘球蚴原头节感染后与对照组相比,大肠杆菌的荧光强度降低(P<0.001),CD47和PD-1的表达增加;多房棘球蚴原头节感染给予信迪利单抗阻断PD-1与单独多房棘球蚴感染组相比,大肠杆菌的荧光强度增加(q=40.63,P<0.001)。结论阻断PD-1可恢复多房棘球蚴原头节感染巨噬细胞的吞噬功能。
- 张涛张涛杨紫晗沈银红马艳艳
- 关键词：巨噬细胞
- 多房棘球蚴感染巨噬细胞中CD47和SIRPα表达变化与抑制作用的研究
- 2025年
- 目的探究多房棘球蚴感染对巨噬细胞CD47与信号调节蛋白α(SIRPα)表达水平及巨噬细胞功能的影响,为探索多房棘球蚴病(AE)发病机制提供依据。方法收集30例AE患者的肝脏病理组织,选取病灶周围0.5 cm处的病灶近旁肝组织(CLT)和超过病灶2 cm以上的病灶远端肝组织(DLT),石蜡切片行免疫组化、冰冻切片行免疫荧光,观察分析CLT和DLT中CD47和SIRPα的表达水平。小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)与多房棘球蚴原头节共培养(细胞数∶原头节数=500∶1),分别于加入原头节前、共培养24和48 h后收集细胞,流式细胞术、细胞免疫荧光和实时荧光定量PCR(qPCR)检测巨噬细胞CD47和SIRPα的表达变化。RAW264.7细胞分为对照组、感染组、抑制剂组和抑制剂感染组(1×10^(5)个/组),感染组和抑制剂感染组加入原头节(200个/组)、抑制剂组和抑制剂感染组加入CD47/SIRPα结合抑制剂(NCGC00138783TFA,10µmol/L),共培养48 h后加入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的大肠埃希菌(1×10^(6)个/组),荧光观察后流式细胞术检测巨噬细胞吞噬能力变化,qPCR检测巨噬细胞极化标志物和细胞因子mRNA相对转录水平的变化。两组间比较采用独立样本t检验或配对t检验,多组间比较用单因素方差分析,多重比较使用Tukey’s HSD法。结果免疫组化结果显示,AE患者CLT的CD47、SIRPα阳性细胞分别占(61.99±3.61)%、(54.06±1.85)%,均高于DLT的(57.08±3.38)%、(40.77±1.49)%(t=9.434、58.840,均P<0.01);免疫荧光结果显示,CLT的CD47/SIRPα皮尔逊相关系数为0.66±0.02,高于DLT的0.45±0.01(t=7.624,P<0.01)。流式检测结果显示,共培养24和48 h后的巨噬细胞CD47中位荧光强度分别为8259.00±66.01和9445.00±41.58,均高于加入原头节前的5603.00±193.40(HSD=0.691、0.735,均P<0.01);共培养24和48 h后的巨噬细胞SIRPα中位荧光强度分别为3123.00±184.60和2931.00±54.08,均高于加入原头节前的2508.00±43.15(HSD=0.491�
- 魏盼龙张耀刚张涛杨紫晗侯静田美媛黄登亮马艳艳
- 关键词：多房棘球蚴
- 大鼠感染泡球蚴后外周血及脾脏中滤泡辅助T淋巴细胞的变化
- 2021年
- 目的分析泡球蚴感染宿主后外周血和脾脏中滤泡辅助T淋巴细胞(Tfh)水平与包虫病进展的关系。方法20只SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组10只,模型组开腹直视下在右肝接种约2000个原头节,对照组不做任何处理,3个月后麻醉处死SD大鼠,取外周血和脾脏细胞,以CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)为Tfh细胞的标记,使用流式细胞术检测外周血和脾脏中Tfh细胞的水平。使用t检验比较两组之间Tfh细胞的差异。结果大鼠感染泡球蚴3个月后,肝脏可见明显病灶,HE染色显示病灶中可见原头节。泡球蚴感染模型组外周血中CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞在CD4+细胞中的平均占比为25.63%±3.47%,正常对照组为11.12%±2.94%,2组比较差异有统计学意义(t=10.230,P<0.001),模型组CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞在所有细胞中所占的比例较正常对照组下降显著(0.08%±0.02%vs 0.18%±0.05%,t=5.520,P<0.001);在所有细胞中,模型组脾脏中CD4^(+)CXCR5^(+)PD1^(+)Tfh细胞所占的比例(3.00%±0.42%)显著低于正常对照组(5.30%±1.40%)(t=4.769,P<0.001)。结论外周血中Tfh细胞与包虫病进展密切相关,有望成为反应泡球蚴感染的指标。
- 张耀刚李建华侯静孙莉田美媛江源黄登亮张涛张涛马艳艳
- 关键词：T淋巴细胞
- IL-10CD5CD1d、IFN-γTh1及M1型巨噬细胞在多房棘球蚴感染SD大鼠后的免疫调节初步分析被引量：4
- 2022年
- 目的初步分析IL-10CD5CD1d、IFN-γTh1、M1型巨噬细胞在多房棘球蚴感染SD大鼠后的免疫调节机制。方法采用STRING及Cytoscape 3.7.1软件通过生信分析预测大鼠IFN-γ、IL-10、CD4、CD5、CD80、CD1d免疫表型之间的联系,将实验分为对照组和模型组,模型组6只SD大鼠通过肝原位接种1 000个活的多房棘球蚴感染SD大鼠,对照组6只,不做任何处理。3个月后利用流式细胞术及ELISA分析免疫细胞表型及炎症因子。结果生信分析发现IFN-γ、IL-10、CD4、CD5、CD80、CD1d之间相互作用紧密,尤其是IL-10、CD5及CD80发挥了主要作用,同时流式结果显示模型组IL-10CD5CD1d比正常对照组显著降低(t=6.164,P=0.000 106),差异有统计学意义,提示模型组CD5CD1d产生的IL-10减少,对Th1及M1型巨噬细胞的作用减弱;CD4^(+)IFN-γ^(+)(t=2.558,P=0.028 462)及CD80;显著升高(t=3.293,P=0.008 110),差异有统计学意义,提示Th1细胞产生的IFN-γ升高,M1型巨噬细胞被激活;同时ELISA结果显示模型组肝组织中IL-10含量降低(t=4.169,P=0.001 920)、IFN-γ含量升高(t=5.187,P=0.000 409),差异有统计学意义,提示IL-10及IFN-γ整体水平与流式检测的结果一致。结论 CD5CD1d在SD大鼠感染多房棘球蚴后IL-10的分泌可能受到抑制,从而导致IFN-γTh1的分泌及M1型巨噬细胞极化。
- 李建华张涛张耀刚董允邓珺张轩马艳艳
- 关键词：泡型包虫病免疫调节
- 一种用于检测血浆中多房棘球绦虫游离DNA的试剂盒及其检测方法
- 本申请涉及疾病检测技术领域，具体公开了一种用于检测血浆中多房棘球绦虫游离DNA的试剂盒及其检测方法。一种用于检测血浆中多房棘球绦虫游离DNA的试剂盒，包括用于检测多房棘球绦虫DNA的两组U1snRNA基因和CYTB基因的...
- 马艳艳江源孙莉张灵强张耀刚张涛杨紫晗侯静
- 多房棘球蚴对巨噬细胞糖代谢表型转变及极化类型影响的初步研究被引量：1
- 2023年
- 目的探讨多房棘球蚴对巨噬细胞糖代谢表型转变、极化类型及炎症反应的影响,为多房棘球蚴病发病机制研究提供参考。方法分离6~8周龄C57BL/6J小鼠骨髓细胞,用小鼠巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony⁃stimulat⁃ing factor,M⁃CSF)诱导成骨髓巨噬细胞(bone marrow⁃derived macrophage,BMDM)⁃M0(对照组);以BMDM⁃M0经白细胞介素(interleukin)⁃4诱导24 h后的M2型巨噬细胞作为IL⁃4诱导组,以BMDM⁃M0与2.4 ng/mL多房棘球蚴囊液(cystic fluid,CF,)共培养的细胞作为BMDM与多房棘球蚴CF共培养组,以BMDM⁃M0与多房棘球蚴原头节(protoscolex,PSC)按500∶1共培养的细胞作为BMDM与PSC共培养组。采用流式细胞术分析与多房棘球蚴CF、PSC共培养后的巨噬细胞极化类型,用实时荧光定量PCR(fluorescent quantitative real⁃time PCR,qPCR)、Western blotting分析其标志物、炎症因子、糖代谢相关酶的表达水平,并通过细胞能量代谢分析各组细胞葡萄糖代谢表型。结果4组细胞精氨酸合酶1(arginase⁃1,Arg1)(F=1457.00,P<0.0001)、巨噬细胞衍生趋化因子22(macrophages⁃derived C⁃C motif chemokine 22,Ccl22)(F=22203.00,P<0.0001)、抵抗素样α(resistin⁃likeα,Retnla)(F=151.90,P<0.0001)、诱导型一氧化氮合酶(induc⁃ible nitric oxide synthase,iNOS)(F=107.80,P<0.001)、己糖激酶(hexokinase,HK)(F=9389,P<0.0001)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)(F=641.40,P<0.0001)、磷酸果糖激酶1(phosphofructokinase1,PFK1)(F=43.97,P<0.01)、葡萄糖激酶(glucokinase,GK)(F=432.50,P<0.0001)、丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinases,PDK1)(F=737.30,P<0.0001)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)(F=3632.00,P<0.0001)、葡萄糖转运体1(glucose trans⁃porter 1,GLUT1)(F=532.40,P<0.0001)、甘油醛⁃3⁃磷酸脱氢酶(glyceraldehyde⁃3⁃phosphate dehydrogenase,GAPDH)(F=460.00,P<0.0001)、柠檬酸合酶(citrate synthase,CS)(F=5642.00,P<0.01)、糖原合成酶1(glycogen synthase 1,GYS1)(F=273.30,P<0.0001)、IL�
- 沈银红张涛杨紫晗张耀刚黄登亮侯静田美媛马艳艳
- 关键词：多房棘球蚴囊液原头节葡萄糖代谢代谢表型
- 常见遗传性耳聋基因的临床应用研究被引量：4
- 2016年
- 耳作为人类的听觉器官,在人类日常生活中扮演重要角色,因此随着社会水平的提高,耳聋这一常见病的研究越来越精确。耳聋主要是由环境和遗传因素决定的,遗传性耳聋可分为两大类,即非综合征型和综合征型耳聋,自从人类基因组计划的实施,从而使临床医学与遗传学精密结合,常见遗传性耳聋已精准到基因研究^([1])。通过对耳聋基因的研究,确定耳聋病因,为患者和患者家属提供准确的遗传咨询。本文就常见遗传性耳聋基因的临床应用研究做一综述。
- 张涛张英石磊
- 关键词：新生儿胚胎植入前诊断GJB2基因SLC26A4基因
- 多房棘球蚴感染对巨噬细胞线粒体功能的影响被引量：2
- 2021年
- 目的观察多房棘球蚴感染后巨噬细胞线粒体代谢功能变化,为探索多房棘球蚴病发病机制提供依据。方法根据处理方法不同设培养组和对照组,其中培养组按照500∶1比例将小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)与2 000个多房棘球蚴共培养,对照组RAW264.7细胞不做任何处理。根据培养时间不同,将对照组和培养组分为24 h对照组、72 h对照组、24 h培养组、72 h培养组。采用Mito Tracker;Deep Red FM线粒体深红色荧光探针标记线粒体并应用Cytation5细胞成像微孔板检测系统检测细胞线粒体平均荧光强度,用实时荧光定量PCR检测线粒体DNA拷贝数(mitochondrial DNA copy number,mt DNA-CN),采用Seahorse细胞能量代谢系统实时监测线粒体能量代谢功能,采用流式细胞术检测线粒体活性氧及线粒体膜电位。结果 24 h(15.341±2.532 vs. 17.823±3.429;t=6.379,P <0.01)、72 h(18.102±3.505 vs. 21.511±5.144;t=17.680,P <0.01)培养组线粒体平均荧光强度均较其相应对照组显著降低。72 h培养组mt DNA-CN(3.23×10^(9)±1.78×10^(7))较其对照组(4.39×10^(9)±3.70×10^(7))显著降低(t=8.85,P <0.001)。实时线粒体能量代谢功能分析结果示,24 h [(241.70±73.13) pmol/min vs.(69.05±52.30)pmol/min;t=7.89,P <0.01]、48 h [(249.50±42.06)pmol/min vs.(60.28±40.66)pmol/min;t=8.64,P <0.01]培养组较相应对照组细胞耗氧率升高,且48 h培养组细胞外酸化率较其对照组增高[(111.60±17.49) mp H/min vs.(35.05±7.57)mp H/min;t=16.90,P <0.01];72 h培养组较其对照组线粒体活性氧平均荧光强度显著升高(58 264±10 087 vs. 4 307±97;t=12.930,P <0.01)、线粒体膜电位显著降低(9.833%±2.285% vs. 2.667%±0.208%;t=6.645,P <0.01)。结论多房棘球蚴感染可损伤巨噬细胞线粒体功能、抑制巨噬细胞氧化磷酸化过程而使糖酵解增强,巨噬细胞代谢状态改变可能是多房棘球蚴病发生和发展的机制之一。
- 邓珺黄登亮张耀刚李建华侯静江源田美媛孙莉张涛张涛董允樊海宁樊海宁
- 关键词：多房棘球蚴巨噬细胞线粒体能量代谢糖酵解氧化磷酸化
