姜男
- 作品数：5 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 基于T7启动子表达系统的牛副流感病毒3型微型基因组的构建与拯救
- 2016年
- 【目的】通过负链RNA病毒反向遗传学操作,构建并拯救以T7启动子表达系统为基础的牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)微型基因组。【方法】分别构建表达该病毒NP、P和L蛋白的辅助质粒px8δT-PT1-b PIV3-NP、px8δT-PT1-b PIV3-P和px8δT-PT1-b PIV3-L以及含增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)开放读码框(Open reading frame,ORF)、BPIV3前导序列(Leader region)、转录起始信号(Gene start signal,GS)、转录终止信号(Gene end signal,GE)和尾随序列(Trailer region)等顺式作用元件(Cis-acting elements)的微型基因组质粒p SC11-b PIV3-EGFP,鉴定正确后,采用2种不同方法拯救BPIV3微型基因组,并通过观察荧光表达情况判断是否拯救成功。【结果】成功构建了基于T7启动子表达系统的BPIV3微型基因组,并实现了拯救。【结论】该系统的成功构建,有助于今后对BPIV3开展基因修饰研究。
- 姜男郑妍鹏蒋桂云张伟焦月盈付远辉彭向雷何金生
- 关键词：反向遗传学拯救
- 一种抗呼吸道合胞病毒药物的高通量筛选方法和应用
- 本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法，包括：接...
- 何金生付远辉彭向雷郑妍鹏姜男许敏
- 一种抗呼吸道合胞病毒药物的高通量筛选方法和应用
- 本发明公开一种重组RSV反基因组质粒rRSV‑EGFP，其序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了由上述质粒经拯救获得的重组RSV以及其在筛选抗RSV药物中的应用。本发明筛选抗RSV药物的高通量筛选方法，包括：接...
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- 文献传递
- 可用于辅助蛋白功能研究的人呼吸道合胞病毒双顺反子微型基因组的构建及拯救
- 2017年
- 【目的】构建可表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,RSV)双顺反子微型基因组cDNA克隆及重组质粒,并进行拯救,以探讨并验证RSV的聚合酶蛋白或辅助蛋白在RSV反向遗传学操作中的作用。【方法】利用全基因合成和分子生物学相结合的方法,在获得可分别表达EGFP和无生物活性蛋白的单顺反子微型基因组质粒pUC57-RSV-EGFP和pUC57-RSV-ORF1的基础上,进一步克隆至pBR322B载体,获得编码EGFP及无生物活性蛋白的双顺反子微型基因组质粒,经限制性内切酶和核酸序列分析正确后,与可表达4种辅助蛋白的辅助质粒共转染至BHK-T7细胞,通过荧光显微镜观察EGFP的表达以及RT-qPCR对EGFP mRNA的转录水平进行定量分析。【结果】成功构建了编码EGFP和无生物活性蛋白的RSV双顺反子微型基因组质粒pBR322B-RSVⅡ-EGFP,经与编码4种辅助蛋白的辅助质粒共转染至BHK-T7细胞,发现4种辅助蛋白对EGFP的表达具有不同的功能活性。【结论】以可表达EGFP报告基因的RSV双顺反子微型基因组重组质粒,实现了对4种辅助蛋白的功能验证,其中M2-1蛋白在双顺反子微型基因组拯救过程中具有转录延长的生物学活性。
- 郑元博张秀娟许敏姜男彭向雷付远辉郑妍鹏洪涛何金生
- 关键词：人呼吸道合胞病毒双顺反子辅助蛋白
- 产出导向 反向构建新时代学生综合素质培养体系
- 2018年
- 一、背景与思路(一)实施背景一是新时代高校思想政治工作的新要求需要新平台作出回应。伴随大学生思想政治教育进入了新时代,大学生思想政治工作主要矛盾逐渐表现为学生日益迫切的成长成才需求与不充分、不平衡的教育之间的矛盾。不平衡主要体现在覆盖面不全,不充分主要体现在覆盖面不广、针对性不强、实效性不够。与此同时,全国高校思想政治工作会议要求遵循三个规律,培养德智体美全面发展的社会主义建设者和接班人。
- 姜男
- 关键词：综合素质培养深度辅导高校思想政治工作
