黎怀星
- 作品数:47 被引量:122H指数:6
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市体育局科研攻关与科技服务基金解放军总医院医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 高滴度表达抑制转录因子的重组腺相关病毒的制备
- 2004年
- 目的 获得表达小鼠抑制转录因子ROG(repressorofGATA -3)基因 ;构建表达ROG的重组腺相关病毒载体 ,制备腺相关病毒。方法 设计、合成引物 ,通过逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)从CTLL- 2细胞总RNA中扩增ROG基因 ,测序成功后 ,最终连接于pAAV- MCS ,双酶切、PCR鉴定阳性重组质粒 ,并在Hela细胞中表达 ;制备高滴度重组腺相关病毒。结果 成功扩增了小鼠ROG基因 ,构建表达ROG基因的重组腺相关病毒表达载体 ,并成功表达于Hela细胞。结论 本实验构建的小鼠ROG重组腺相关病毒将为哮喘的基因治疗研究奠定物质基础。
- 王桂芳杨丹榕修清玉施柯吴丹黎怀星孙树汉
- 关键词:重组腺相关病毒转录因子HELA细胞高滴度酶切总RNA
- EMS对D6-2转基因小鼠骨髓组织细胞内lacⅠ靶基因的诱变率和诱变谱被引量:2
- 1998年
- 对D6 2转基因小鼠骨髓组织细胞内lacⅠ靶基因的自发突变率以及甲基磺酸乙酯 (ethylmethanesulfonate ,EMS)诱发的突变率和突变谱进行了研究 .将带有lacⅠ靶基因的pSPORT1质粒通过酶切、环化和转化DH1 0B宿主菌的方式从经和未经诱变处理的D6 2转基因小鼠骨髓组织基因组DNA中回收出来 ,lacⅠ靶基因突变体用M9/L选择性平板进行正向选择 .结果从经EMS诱变处理的小鼠基因组DNA中回收出的约 1 1 935个pSPORT1质粒中筛选到 6个lacⅠ-突变体 (EMS诱发的突变率为 5 0× 1 0 -5 ) ,而从对照组小鼠基因组DNA中回收出的约 1 1 6 4 9个质粒中没有检测到lacⅠ-突变体 (自发突变率则小于 8.6× 1 0 -5 ) .对 6个突变体的 2个突变高发区进行了序列分析 ,共检测出 1 6个点突变 .其中 ,碱基置换突变为主要突变类型 ,占 87.5 % ( 1 4) ,其余 1 2 .5 % ( 2 )的突变为缺失突变 .在碱基置换突变中 ,颠换占6 4 % ;而转换仅占 36 % ,这既不同于用BigBlue 转基因小鼠所测到的lacⅠ基因在小鼠体内的自发突变谱 ,又不同于用穿梭载体 /哺乳动物细胞系统所测到的EMS在体外的诱变谱 .而突变发生的位点则与其他的研究报道相同 ,主要出现在CpG二核苷酸 ,占全部点突变的 45 % .这些结果表明 :( 1 )基于含 pSPORT1质粒的D6 2转基因小鼠?
- 黎怀星杨桦李建秀李建秀王肖鹏胡以平傅继梁
- 关键词:转基因小鼠EMS
- lacⅠ 靶基因突变子的一种正向选择系统的建立被引量:1
- 1999年
- 目的:建立一种能正向选择lacⅠ靶基因突变子的选择系统。方法:比较了分别携带有lacⅠ- /lacZα型质粒和lacⅠ+ /lacZα型质粒的DH10B菌在LB完全培养基、以葡萄糖为碳源的M9 基本培养基和以乳糖为碳源的M9/L基本培养基内的生长情况。结果:组成型DH10B菌在M9/L固体培养基中只需培养23 h 便可观察到生长,而诱导型DH10B菌则需培养88 h 才可观察到生长,但在LB和M9 培养基内两者的生长速度却相同;当将少量的组成型DH10B菌与大量的诱导型DH10B菌混合接种于M9/L固体培养基上培养时, M9/L固体培养基能从约2.7×106 的lacⅠ+ 型DH10B菌中将少量的lacⅠ- 型DH10B菌筛选出来。结论:本研究建立了一种在特定时间内只选择生长携带有lacⅠ- /lacZα型质粒的DH10B菌落。
- 黎怀星卢洋姚真真傅继梁
- nm23基因与肿瘤转移被引量:19
- 1994年
- nm23基因位于人17号染色体的着丝点附近,其蛋白产物为17kD的核苷二磷酸激酶(NDPK)。许多研究表明nm23基因的表达水平与恶性肿瘤的转移有关,但也有与此相左的报道。本文综述了nm23基因的研究现状及其与肿瘤转移的关系。
- 黎怀星
- 关键词:肿瘤转移癌基因
- 24:1n‑9水平相关位点及检测方法和试剂盒
- 本发明涉及24:1n‑9水平相关位点及检测方法和试剂盒。具体地,本发明公开了基于全基因组关联分析研究而发现的24:1n‑9水平相关位点。本发明还提供了一种预测24:1n‑9水平的方法,它包括检测个体的ST8SIA5基因、...
- 林旭黎怀星胡瑶
- 文献传递
- 基于质粒载体的转基因小鼠突变研究模型的建立被引量:1
- 1995年
- 基于质粒载体的转基因小鼠突变研究模型的建立黎怀星,李建秀,杨桦,胡以平,王肖鹏,傅继粱(上海第二军医大学生物教研室200433华西医科大学分子生物学研究室成都610041)本研究拟建立一个以LacI作为诱变靶基因,pSPORTI(4.1kb)作为载体...
- 黎怀星李建秀杨桦胡以平王肖鹏傅继粱
- 关键词:质粒转基因小鼠基因突变动物模型
- 胚胎操作方式对受精卵成活率影响的初步分析被引量:1
- 1995年
- 胚胎操作方式对受精卵成活率影响的初步分析黎怀星,李建秀,杨桦,胡以平,王肖鹏,傅继梁(上海第二军医大学生物教研室200433成都华西医科大学分子生物学研究室成都610041)正确的胚胎操作是以显微注射法制备转基因小鼠的主要步骤之一,它直接影响胚胎的成...
- 黎怀星李建秀杨桦胡以平王肖鹏傅继梁
- 关键词:受精卵成活率转基因小鼠
- 中国中老年人群代谢紊乱性疾病状况的南北差异研究
- 本文对中国中老年人群代谢紊乱性疾病状况的南北差异进行了研究。结果表明,代谢紊乱性疾病的患病率存在着明显的地区差异,除低高密度脂蛋白血症外,其他各异常指标的患病率均是北方高于南方。
- 林旭焦淑芳刘弘邹淑蓉于志杰王燕芳黎怀星徐荷顾文佳叶兴旺庞星火张正
- 关键词:老年病学代谢紊乱
- 文献传递
- 与慢性代谢性疾病相关的遗传和环境因素以及营养干预研究
- 林旭黎怀星于志杰叶兴旺邬莹
- 项目所属科学技术领域、主要科学研究内容、特点及引用、应用情况:作为全球经济发展最快的国家,中国正面临迅速的营养转型,慢性代谢性疾病如代谢综合征、2型糖尿病、心血管疾病和某些肿瘤的患病率以惊人速度攀升,造成了80%死亡率和...
- 关键词:
- 关键词:慢性代谢性疾病环境因素营养干预
- 建立高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系的研究被引量:2
- 2004年
- 目的:建立一个组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。方法:(1)采用重组DNA技术将小鼠Retn基因的全长cDNA克隆到质粒pcDNA3的CMV启动子下面而获得一个能在真核细胞内组成性表达小鼠Resistin蛋白的表达载体pcDNA3-mRetn。(2)用电穿孔转染和G418筛选等方法建立能组成性地高表达小鼠Retn基因的3T3-L1细胞系。(3)诱导细胞分化为脂肪细胞,并用实时荧光RT-PCR法分析这些脂肪细胞内Retn基因mRNA的水平。结果:构建了一个能在真核细胞内表达小鼠Retn基因的表达载体;建立了一个携带有pcDNA3-mRetn载体并组成性地高表达小鼠Retn基因的细胞系。结论:成功地建立了一个组成性地高表达小鼠Retn基因细胞系,为进一步研究Retn基因的功能和小鼠Resistin蛋白的获得奠定了基础。
- 李雅慧黎怀星吴丹蔡东联孙树汉
- 关键词:基因表达