黄媛
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：集美大学水产学院农业部东海海水健康养殖重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 组织蛋白酶B在水生动物中的研究进展被引量：3
- 2016年
- 组织蛋白酶B(cathepsin B,CB;EC 3.4.22.1)是组织蛋白酶超家族中特殊的一员,为同时具有肽链内切酶和羧基二肽酶活性的半胱氨酸蛋白水解酶。虽然组织蛋白酶B广泛存在于各种动植物及细菌病毒中,但对水生动物的研究表明,不同物种组织特异性并不完全相同。现综述水生动物中CB基因及蛋白结构特性、表达及功能和CB与其他酶类的相互作用。水生动物中的CB行使多方面的功能,如参与卵巢卵母细胞的发生、胚胎形成及发育、水生软体动物幼虫发育、肠道中蛋白质的降解以及免疫过程等等。
- 黄媛王艺磊冯建军王国栋林鹏
- 关键词：组织蛋白酶B水生动物基因结构蛋白质表达蛋白质功能
- 日本囊对虾组织蛋白酶B基因的原核表达
- 以日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)卵巢组织为实验材料,采用双标签(GST和His)的方法,用带有EcoR Ⅰ和Not Ⅰ酶切位点以及6×His-tag的特异引物扩增Cathepsin B的开放阅...
- 黄媛王艺磊张子平岳亮冯建军林鹏
- 关键词：日本囊对虾卵巢组织蛋白酶B原核表达多克隆抗体
- 日本囊对虾组织蛋白酶B基因的原核表达及纯化
- 2017年
- 采用原核表达的方法得到日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)组织蛋白酶B基因的重组蛋白。以日本囊对虾卵巢组织为试验材料,采用双标签(GST和His)的方法,用带有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点以及6×His-tag的特异引物扩增Cathepsin B的开放阅读框,并连接至表达质粒pGEX-4T-2中。将重组表达质粒导入大肠杆菌BL21中,在30℃条件下,用终浓度为1mmol/L的IPTG(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside)诱导5h得到最佳诱导量,His亲和柱进行纯化,纯化蛋白依次于8、6、4、2、1、0 mol/L尿素缓冲液中梯度透析,得到复性后可溶于水的重组蛋白,经SDS-PAGE检测,得到单一条带,其分子质量约为63ku。取冻干后的蛋白制备多克隆抗体,抗体效价达50 000,经Western blot检测,同样可在63ku处得到该条带,表明制备的组织蛋白酶B(CB)多克隆抗体具有特异性,该抗体可特异识别CB蛋白。
- 黄媛王艺磊张子平岳亮冯建军郭松林林鹏
- 关键词：日本囊对虾卵巢原核表达多克隆抗体
