曹敏娜
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广州市卫生局医药卫生科技项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种大鼠肺静脉平滑肌细胞快速培养方法的建立及评价被引量：3
- 2017年
- 目的通过改进原代大鼠肺静脉平滑肌细胞（pulmonary vein smooth muscle cells,PVSMCs）的培养方案，以期建立快速、方便、高细胞活力的肺静脉平滑肌细胞培养方法，为肺静脉在肺血管相关疾病研究中提供适合的细胞模型。方法体视镜下显微分离大鼠肺静脉，胶原酶消化后获取原代PVSMCs，分别用低糖DMEM培养基、DMEM—F12培养基、高糖DMEM培养基作为培养液，观察PVSMCs的生长情况和细胞形态，对平滑肌a—actin进行免疫荧光鉴定，并用实时荧光法检测PVSMCs对高钾溶液引起的细胞内钙浓度升高的反应，评价细胞活力。结果PVSMCs在3种培养基中的生长速率比较：DMEM-F12〉高糖DMEM〉低糖DMEM。DMEM-F12中培养的PVSMCs可见细胞质中有典型的、并行排列的、绿色荧光显色的平滑肌α—actin蛋白，细胞核呈蓝色荧光，细胞纯度达95％以上，而阴性对照只见染蓝光的细胞核。细胞对高钾溶液具有良好反应。结论DMEM-F12培养基中PVSMCs生长速率最大，细胞符合平滑肌细胞免疫结构特征，并具有良好的细胞功能。DMEM-F12培养基更适合PVSMCs的培养。
- 梁志浩吴康金颖康陈豫钦江倩曹敏娜张军卢文菊王健
- 关键词：原代细胞培养肺静脉
- 低氧对大鼠肺静脉平滑肌细胞HIF-1α-BMP4-ERK1/2/p38MAPK信号通路的影响及调控机制研究
- 肺动脉高压(PAH)是多种病因导致的以肺动脉压力和肺血管阻力升高为特点的一组临床综合征。肺动脉高压的发病率和死亡率均非常高。因此研究发现肺动脉高压的机制及寻找更有效治疗肺动脉高压的靶向药物迫在眉睫。目前认为肺动脉高压发病...
- 曹敏娜
- 关键词：慢性低氧HIF-1Α基因信号通路
- 低氧诱导大鼠肺动脉重塑对肺动脉平滑肌锌指蛋白转录因子5表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的 探讨慢性低氧性肺动脉高压（CHPH）大鼠模型肺动脉重塑与肺动脉平滑肌锌指蛋白转录因子5（KLF5）蛋白表达的关系.方法 雄性SD大鼠20只按随机数字表法分为常氧组和低氧组,每组10只,低氧组放入全自动低氧箱饲养,21 d后用右心室测压法测量右心室收缩压（RVSP）及平均右心室压（mRVP）;计算右心肥厚指数RV/（LV＋S）;取右肺组织包埋切片行HE染色测量肺小动脉血管管腔面积,计算血管中膜厚度百分比（WT％）;并取切片行免疫荧光检测KLF5的表达;荧光PCR和Western blot法分别检测远端肺动脉平滑肌组织中KLF5 mRNA、蛋白的表达.显微镜下分离大鼠（6只）远端肺动脉平滑肌组织,胶原酶消化法培养大鼠原代肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）,随后置于低氧环境（4％ O2,60 h）培养并获取细胞蛋白检测KLF5的表达.结果 低氧组大鼠RVSP和mRVP与常氧组（28.3±0.4）、（11.3±1.0） mmHg（1 mmHg =0.133 kPa）比较,分别升高至（43.9±1.3）、（26.5±2.3）mmHg（P ＜0.05）;低氧组RV/（LV ＋S）为（0.48±0.03）,明显高于常氧组（0.27±0.01,P＜0.05）;低氧组血管腔占血管区域的比值（WT％）为（46.1±6.6）％,与常氧组（68.7±3.1）％相比显著降低（P＜0.05）;而低氧组WT％（5.6±0.3）％与常氧组（3.7±0.4）％相比显著增加（P＜0.05）;低氧组大鼠肺动脉平滑肌组织KLF5蛋白表达量为常氧组的（22±7）倍,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CHPH大鼠模型RVSP、mRVP、右心室肥厚指数均升高,同时伴有肺小动脉重塑,这可能与低氧诱导PASMCs中KLF5的表达升高有关.
- 曹敏娜陈豫钦江倩李美婵卢文菊王健
- 关键词：低氧肺性肺动脉
