陈琛
- 作品数：15 被引量：48H指数：4
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家重大科学仪器设备开发专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种用于检测10种临床感染常见病原菌的核酸质谱方法
- 本发明公开了一种检测10种临床感染常见病原菌的引物系统。使用该检测体系，对病原菌感染患者的血液或体液(胸水，腹水，引流液，关节液，脑脊液)感染样本进行检测，检测结果结合其他临床指标，可为临床医师早期诊断，合理使用抗生素提...
- 王成彬何赏陈琛张可昕
- 文献传递
- 多重PCR方法快速检测血流感染10种常见病原菌方法的建立与应用被引量：11
- 2018年
- 目的应用多重聚合酶链式反应(PCR)技术,建立肺炎克雷伯菌、鲍氏不动杆菌、肺炎链球菌、屎肠球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、奇异变形杆菌等临床常见病原菌的快速、高效检测方法,并应用于血培养后病原菌的检测。方法以肺炎克雷伯菌khe基因、鲍氏不动杆菌OXA基因、肺炎链球菌LytA基因、屎肠球菌和粪肠球菌ddl基因、大肠埃希菌phoA基因、表皮葡萄球菌2312基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、铜绿假单胞菌ecfX基因、奇异变形杆菌ure基因序列为模板,分别设计特异性引物,建立多重PCR扩增体系并优化。收集临床血培养报阳标本200份,应用所建立的多重PCR法鉴定,并与传统血培养方法比较。结果多重PCR法可特异性扩增出10种病原菌目标DNA条带,200份报阳样本目标菌阳性预测值为60.5%,除传统血培养有1份漏检外,多重PCR与血培养法结果符合率为100%。结论多重PCR方法与传统鉴定方法相比,可大幅度缩短临床培养报阳后鉴定时间,其多种病原菌同时检测的优势,具有良好的临床应用前景。
- 胡翀胡翀马薇张可昕何赏陈琛曲芬罗燕萍
- 关键词：细菌鉴定
- 乙肝抗病毒治疗中的耐药基因突变检测技术
- 中国是乙型肝炎的高发国家，抗病毒治疗药物耐药突变的早期发现对于接受抗病毒治疗的乙肝患者来说至关重要。理想的临床检测方法应具有灵敏度高、特异性高、重复性好，检测结果准确等特点，而且操作简单，通量高，价格适中，可检出样本中的...
- 陈琛
- 关键词：乙型肝炎病毒耐药突变检测
- 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱联合磁珠技术在金黄色葡萄球菌血流感染血清标志物检测中的应用
- 目的：应用MALDI-TOF MS分析金黄色葡萄球菌引起的血流感染血清多肽指纹图谱,寻找差异多肽峰并进行二级质谱鉴定,寻找具有潜在意义的血流感染标志物.
方法：建立ICR小鼠金黄色葡萄球菌血流感染模型,收集血清...
- 麻雅婷杨明何赏陈琛段欣欣荆颖成彬王佳楠王成彬
- 关键词：血流感染金黄色葡萄球菌血清蛋白标志物激光解吸电离飞行时间质谱
- 文献传递
- 乙肝抗病毒治疗中的耐药基因突变检测技术
- 陈琛
- 基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统的血流感染致病菌早期检测被引量：2
- 2018年
- 目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF MS)建立早期血流感染致病菌检测体系。方法选取大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯杆菌、屎肠球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、变形杆菌、肺炎链球菌等10种临床最常见的病原菌作为检测对象,结合多重PCR技术和Mass ARRAY iPLEX单碱基延伸技术、MALDI-TOF MS技术,模拟细菌感染血液样本建立MALDI-TOF MS细菌核酸检测体系,测定其灵敏度;选取2017年3-5月在解放军总医院急诊科收集的疑似脓毒症患者血液样本33例对该体系进行验证,并将检测结果与微生物科血培养结果进行比较。结果本研究所建立的MALDI-TOF质谱血液致病菌检测系统可同时检测分属两组的10种细菌,所有细菌样本均可见延伸峰;灵敏度为100CFU/ml;与33例临床血培养鉴定结果的阴性符合率为100%(27/27),6例血培养阳性样品中有2例为摩氏摩根菌和人葡萄球菌感染,因这两种细菌不包含在10种检测对象之内而未能通过质谱检出,其余4例血培养阳性样品与质谱检测结果的符合率为100%。结论本研究建立的MALDI-TOF质谱检测体系可从全血样本中直接检测10种临床常见血流感染致病菌,无需进行培养,与传统血培养及生化鉴定相比具有耗时短、灵敏度高、准确度高等优势,可在一定程度上满足临床早期、快速诊断血流感染致病菌的需求。
- 张可昕胡翀陈琛何赏杨明王成彬
- 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱研究白色念珠菌血流感染的血清多肽指纹图谱被引量：5
- 2018年
- 目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析白色念珠菌所致血流感染的血清多肽指纹图谱,寻找差异多肽峰并建立相应的诊断模型。方法建立ICR小鼠白色念珠菌血流感染模型,收集血清标本,经弱阳离子磁珠纯化,MALDI-TOF MS检测及BioExplorer软件分析白色念珠菌感染与正常对照组的血清多肽指纹图谱,同时分析大肠埃希菌感染组、金黄色葡萄球菌感染组和白色念珠菌感染组的血清多肽指纹图谱。结果比较白色念珠菌感染组和正常对照组共得到135个多肽峰,其中表达上调的多肽有5个,表达下调的多肽有6个,表达呈先上调后下调的多肽有7个,组合m/z 1610.9、1742.3、2666.4、2778.0、3345.1、4528.8这6个峰建立诊断模型,该模型区分白色念珠菌感染的正确率为80.0%。综合比较大肠埃希菌感染组、金葡菌感染组和白色念珠菌感染组的血清多肽指纹图谱发现,有5个多肽峰在感染组中共同出现,分别为m/z 1513.8、2910.8、3538.1、3884.9和5007.3。结论利用MALDI-TOF MS可有效区分白色念珠菌感染和正常血清的多肽峰,同时感染中共同出现的多肽峰有望成为辅助诊断血流感染的标志物,通过建立相应的诊断模型能早期辅助诊断真菌性血流感染,为临床合理用药及标志物寻找提供依据。
- 麻雅婷杨明何赏陈琛王成彬
- 关键词：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱血流感染白色念珠菌
- LIF和RANTES在单病原菌性血流感染小鼠模型中的表达及意义被引量：2
- 2018年
- 目的探讨4种血流感染常见病原菌分别致小鼠血流感染后白血病抑制因子(leukaemia inhibitory factor,LIF)和活化T细胞调节的、正常T细胞表达和分泌的细胞因子(regulated upon activation,normal T cell expressed and secreted factor,RANTES)的表达及变化规律,为细菌性血流感染的早期诊断提供研究基础。方法建立金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌标准菌株的CD-1(ICR)小鼠血流感染模型,用蛋白质液相芯片技术检测各实验组和PBS对照组感染后0.5 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h时LIF和RANTES的浓度。结果金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的致小鼠死亡的半数致死量(LD50)分别约为8.1×108/m L、9.6×108/m L、8.1×108/m L和1.1×109/m L。细菌入血1 h时血清中LIF的浓度明显升高,大肠埃希菌组、肺炎克雷伯菌组、金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组LIF的峰浓度分别为(51.6±5.0)pg/m L、(73.2±20.8)pg/m L、(7.3±0.9)pg/m L和(6.1±1.2)pg/m L,与对照组相比,差异均有统计学意义(P均<0.01)。粪肠球菌组、大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组细菌入血1 h时RANTES浓度明显升高,3 h时升高更明显。且大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组升高的幅度较金黄色葡萄球菌和粪肠球菌组更为明显。达峰值时浓度分别为(1 929.0±25.2)pg/m L、(1 218.1±227.4)pg/m L、(55.7±10.0)pg/m L和(179.2±9.2)pg/m L,与对照组相比,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论 LIF和RANTES的浓度在细菌入血后1 h即明显升高。感染后的2 d内,大肠埃希菌组和肺炎克雷伯菌组LIF和RANTES浓度的升高幅度明显高于金黄色葡萄球菌组和粪肠球菌组。联合检测LIF和RANTES可能在细菌性血流感染早期诊断和区分革兰阴性/革兰阳性菌感染方面有一定作用。
- 杨明麻雅婷何赏陈琛张可昕王成彬
- 关键词：白血病抑制因子血流感染小鼠模型
- 乙型肝炎抗病毒治疗中的耐药基因突变检测技术被引量：6
- 2016年
- 中国是乙型肝炎(乙肝)的高发国家,抗病毒治疗药物耐药突变的早期发现对于接受抗病毒治疗的乙肝患者至关重要。理想的临床检测方法应具有灵敏度高、特异性高、重复性好、检测结果准确、操作简单、通量高、价格适中以及能定量检测等特点,并可检出样本中的多种混合突变。本文根据上述临床需求,就近年来出现的一些乙肝耐药突变检测技术进行讨论,并介绍一种基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法的新检测技术。
- 张树永陈琛马庆伟曲芬
- 关键词：乙型肝炎病毒MALDI-TOFMS
- 一种用于检测血培养瓶中临床常见病原菌的产品和方法
- 本发明公开了一种用于检测临床血培养瓶中常见病原菌的方法。该方法基于多重聚合酶链式反应技术，包括血培养瓶中细菌基因组DNA提取、PCR扩增、电泳凝胶紫外成像等步骤。基于该方法所制备的产品，可以实现十种细菌同时检测，较测序、...
- 王成彬陈琛何赏胡翀
- 文献传递
