汪升
- 作品数：19 被引量：21H指数：3
- 供职机构：苏州大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省临床医学科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 铁调素对RAW264.7向破骨细胞早期分化及晚期分化的影响
- 目的 探索梯度剂量铁调素干预小鼠单核细胞系RAW264.7后,向破骨细胞前期分化及后期分化能力的差异.方法 铁调素以梯度浓度干预RAW264.7,24h后以CCK8法检测各组细胞增殖能力.各组细胞均匀接种至噬骨馅窝板中,...
- 王啸张鹏汪升沈光思徐又佳
- 去铁胺对高铁环境下成骨细胞分化的影响被引量：3
- 2018年
- 目的观察去铁胺（DFO）对于高铁环境[利用枸橼酸铁铵（FAC）提供铁离子制作高铁环境]下成骨细胞分化的影响。方法通过细胞计数试剂盒（CCK-8）法确定FAC及DFO的干预计量。实验分为3组：对照组、50 μmol/L FAC干预组、FAC＋DFO组（50 μmol/L FAC干预同时加入20 μmol/L DFO）。干预后3组细胞分别行碱性磷酸酶（ALP）染色和活性定量，茜素红染色、钙结节计数，对成骨相关基因[Runt相关基因2（Runx2）、锌指转录因子SP7、骨γ羧基谷氨酸（Bglap）、骨保护素（OPG）]利用实时荧光定量核酸扩增检测系统（QPCR）检测其mRNA的表达水平。结果CCK-8结果显示，50 μmol/L FAC干预组成活率为（95.6±0.7）%，20 μmol/L DFO干预组成活率[（97.6±0.5）%]不影响细胞活性，各组差异无统计学意义（P＝0.427）。与对照组比较，FAC干预组，成骨相关基因Runx2、Sp7、Bglap、OPG表达下降；而FAC＋DFO干预组与FAC干预组比较成骨相关基因表达上升，差异有统计学意义（P＝0.026）。ALP染色及活性定量和茜素红染色及结节计数与对照组比较，FAC组结节计数（36±3）下降，而FAC＋DFO组结节计数（120±6）比FAC组上升，差异有统计学意义（P＝0.017）。结论在高铁环境中，成骨细胞分化受到抑制；DFO干预可在一定程度上恢复高铁环境下成骨细胞分化。
- 张鹏汪升袁晔单冰晨王亮杨帆贾鹏徐又佳
- 关键词：去铁胺成骨细胞骨质疏松
- 去铁胺对去势伴铁蓄积小鼠骨量的作用及机制被引量：2
- 2017年
- 目的探讨铁螯合剂甲磺酸去铁胺（DFO）对去势后枸橼酸铁铵干预的雌性小鼠骨量的影响及其作用机制。方法选取2月龄C57BL／6雌性小鼠24只，随机分为去势（OVX）组、去势＋铁剂干预组（OVX＋Fe组）、去势＋铁剂＋去铁胺组（OVX＋Fe＋DFO组）。3组均行双侧卵巢切除术，后两组在去势后1周采用每周0．12g／kg的枸橼酸铁铵干预6周，干预方法为腹腔注射，每周干预3次，OVX组采用同样方式和频次的生理盐水干预。随后OVX＋Fe＋DFO组采用每周4000mg／kgDFO干预2周，干预方法为腹腔注射，一日两次，其他两组给予同样方式和频次的生理盐水干预。干预结束后处死小鼠，微计算机断层扫描技术（Micro—CT）观察股骨远端骨微结构，普鲁士蓝染色观察股骨局部铁蓄积，实时荧光定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测骨组织骨保护素（OPG）、核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）的表达，酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测小鼠血清铁蛋白、OPG和RANKL水平。结果血清铁蛋白水平方面，OVX＋Fe组[（408．90±17．20）μg/ml]明显高于OVX组[（87．53±3．73）μg/ml]和OVX＋Fe＋DFO组[（162．30±10．58）μg／ml，P=0．000]。普鲁士蓝染色结果显示股骨铁蓄积OVX组〈OVX＋Fe＋DFO组〈OVX＋Fe组。OVX＋Fe组[（0．09±0．02）mg／mm^3]比OVX组[（0．13±0．01）mg／mm^3]的骨密度低（P=0．000），OVX＋Fe＋DFO组[（0．12±0．01）mg／mm^3]比OVX＋Fe组[（0．09±0．02）mg／mm^3]的骨密度高（P=0．000）。OVX＋Fe组（0．75±0．15）骨组织OPG基因表达水平低于OVX组（1．00±0．20）和OVX＋Fe＋DFO组（0．89±0．15，P=0．019、0．012），OVX＋Fe组（2．20±0．12）骨组织RANKL基因表达水平高于OVX组（1．00±0．13）和OVX＋Fe＋DFO组（1．30±0．20，P=0．000），OVX＋Fe组（2．8±0．4）骨组织RANKL／OPG的表达比值高于OVX组（1．0±0．5）和OVX＋Fe＋DFO组
- 汪升王啸张鹏沈光思姜宇陈斌王亮杨帆徐又佳
- 甲磺酸去铁胺(DFO)对枸橼酸铁胺(FAC)干预的原代成骨细胞活性影响及机制研究
- 目的 研究甲磺酸去铁胺(DFO)对于Fe剂(FAC)干预的原代成骨细胞活性的影响,探究其可能的机制.方法 取C7BL/6小鼠出生三天内胎鼠的颅盖骨,提取原代成骨细胞,碱性磷酸酶染色鉴定后,传代培养至第三代.分为4组,对照...
- 汪升徐又佳
- 甲磺酸去铁胺对“Ⅰ型铁蓄积骨质疏松症”小鼠模型干预后骨形成变化实验观察
- 汪升徐又佳
- 高铁环境对破骨细胞分化的影响及机制被引量：5
- 2014年
- 目的 观察高铁环境对单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响及核转录因子二聚体p50-p65在其中的作用.方法 RAW264.7细胞以梯度莉量0- 400 μmol./L枸橼酸铁铵（FAC）干预,细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞增殖能力,以核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）诱导,行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,根据染色结果选择效果最优组,与磷酸盐缓冲液（PBS）干预组对照.破骨细胞分化能力采用噬骨陷窝实验及荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测;荧光探针检测活性氧（ROS）水平.Western blot检测胞质蛋白p50、p65及胞核蛋白p50、p65、磷酸化p50（p-p50）、磷酸化p65（p-p65）表达差异.结果 CCK-8结果表明,浓度范围在0-50 μmol/L的FAC对细胞增殖无明显影响（P＞0.05）.TRAP染色示50 mol/L FAC处理组阳性细胞数为（41.67±5.46）个,明显高于对照组的（20.00 ±4.00）个,噬骨陷窝数也高于对照组（P＜0.05）.ROS检测结果显示：FAC干预组荧光较对照组增强.FQ-PCR结果示：FAC组酸性磷酸酶5（Acp5）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、降钙素受体（CTR）表达量分别为对照组的2.49、3.31、9.20倍（P＜0.05）.Western blot结果：两组核蛋白p-p50、胞质蛋白p65表达差异无统计学意义,FAC组核蛋白p65、p50、p-p65表达为对照组的14.38、15.32、3.88倍（P＜0.05）,胞质蛋白p50为对照组0.76倍（P＜0.05）.结论 铁离子在一定范围内升高ROS水平,进而促进p50-p65二聚体核易位,促进破骨细胞分化.
- 王啸汪升陈斌沈光思费蓓蓓林华徐又佳
- 关键词：破骨细胞活性氧
- 雌激素下降合并铁蓄积对骨组织骨量影响的实验研究被引量：9
- 2015年
- 目的探讨单纯雌激素下降和雌激素下降＋铁蓄积两种状况下，小鼠骨组织骨量、成骨活性指标、原代成骨细胞代谢指标的差异。方法第一部分：将体重（25＋1）g的ICR小鼠按体重区组随机化分组分为3组，每组7只：（1）去势组，模拟绝经状态；（2）高铁去势组，模拟绝经状态合并铁蓄积，该组小鼠采用“去势”后行枸橼酸铁铵腹腔注射；（3）假手术组。12周后检测指标：小鼠体重、血清铁蛋白；胫骨组织的成骨特异性转录因子（Runx2、Osterix）、骨钙蛋白（Bglap）、骨保护素、雌激素受体Or,、13（ER-α、ER-β）基因表达；Micro-CT分析股骨远端骨量差异。第二部分：提取新生ICR小鼠颅骨原代成骨细胞，用枸橼酸铁胺、1713．雌二醇（E2）腹腔注射干预，碱性磷酸酶染色观察成骨细胞形态，定量PCR（q-PCR）检测成骨相关基因表达。结果各组小鼠体重无统计学差异；血清铁蛋白含量：高铁去势组[（324．82±38．60）μg／L]较去势组[（41．38±5．56）μg／L]及假手术组[（39．40±3．81）μg／L]升高，差异有统计学意义（2）Micro-CT的骨密度：高铁去势组[（0．902±0．064）mg／mm^3]及去势组[（0．114±0．013）mg／mm^3]较假手术组[（0．297±0．072）mg／mm^3]均下降，差异有统计学意义，高铁去势组比去势组下降更显著。（3）RT-PCR：与假手术组相比，去势组骨保护素、Runx2、Osterix、Bglap、ER-p表达降低；高铁去势组Osterix、骨保护素表达更低。（4）成骨细胞碱性磷酸酶染色显示用枸橼酸铁胺干预后细胞变小，棕色变淡；q-PCR结果显示：E2升高Bglap表达，枸橼酸铁胺下调Runx2，Osterix表达水平。结论当雌激素去除时，如合并铁增加，则成骨活性指标进一步下调、骨形成进一步受到抑制。
- 王啸刘禄林沈光思费蓓蓓汪升姜宇林华徐又佳
- 关键词：雌二醇骨质疏松成骨细胞
- 甲磺酸去铁胺(DFO)对高铁卵巢切除小鼠骨密度、骨结构影响及其机理研究
- 研究目的 多项国内外的临床研究证明高铁状态是绝经后骨质疏松的独立危险因素.女性一年月经排出36mg铁,一般绝经后数年可形成铁蓄积,而小鼠没有月经,去势后体内铁水平并不升高,所以本研究中采用去势后枸橼酸铁铵干预的小鼠模型来...
- 汪升王啸张鹏沈光思姜宇陈斌徐又佳
- 甲磺酸去铁胺对"Ⅰ型铁蓄积骨质疏松症"小鼠模型干预后骨形成变化实验观察
- 汪升徐又佳
- 地拉罗司对小鼠前成骨细胞MC3T3-E1生物学活性的影响
- 2016年
- 目的探讨铁鳌合剂地拉罗司(deferasirox,DFS)体外对成骨细胞增生、分化、矿化和细胞内铁离子的影响。方法小鼠前成骨样细胞MC3T3-E1在37℃条件下体外培养,在10 mmol/Lβ-甘油磷酸和50 mg/L抗坏血酸的诱导作用下,分化为成骨细胞,同时用不同浓度(10、20、40μmol/L)DFS干预,用CCK-8法检测细胞的增生,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性试剂盒检测细胞ALP活性,Von kossa染色法行细胞钙结节染色,实时定量PCR检测细胞膜转铁蛋白受体(transferrin receptor,TfR)mRNA的表达。结果 MC3T3-E1细胞增生结果显示,DMSO溶剂组、对照组(0μmol/L)、10、20、40μmol/L组A值分别为1.41±0.09、1.41±0.09、1.01±0.01、0.79±0.04、0.67±0.04;ALP活性检测结果显示,对照组(0μmol/L)、10、20、40μmol/L组ALP活性值分别为0.73±0.03、0.65±0.02、0.54±0.03、0.35±0.04;钙结节检测结果显示,对照组(0μmol/L)、10、20、40μmol/L组TfR mRNA钙化面积比值分别为4.22±0.12、3.29±0.14、1.40±0.20、0.86±0.21;TfR mRNA表达检测结果显示,对照组(0μmol/L)、10、20、40μmol/L组TfR mRNA表达比分别为1、1.52±0.23、1.91±0.17、2.98±0.14。MC3T3-E1细胞的增生、ALP活性、钙结节和钙化面积随DFS干预浓度的增加呈剂量依赖性降低(P<0.05),TfR mRNA的表达随DFS干预浓度的增加呈剂量依赖性升高(P<0.05)。结论 DFS可能通过螯合成骨细胞内的铁离子抑制其增生、分化和矿化。
- 赵国阳狄东华汪升徐又佳
- 关键词：成骨细胞骨代谢骨质疏松
