陈俊
- 作品数:5 被引量:36H指数:2
- 供职机构:温州医科大学更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金温州市医药卫生科学研究项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 宫颈肿瘤组织高危型HPV新分型检测方法的建立及应用被引量:1
- 2015年
- [目的]建立一种新型宫颈肿瘤组织高危型人乳头瘤病毒(HPV)检测及分型方法,并评价其临床应用。[方法]基于我国人群流行的5种高危型HPV(HPV 16、18、31、33、51)的E6/E7早期基因序列,设计特异性引物,以明确HPV型别的宫颈癌细胞株及宫颈肿瘤组织为模板,进行PCR检测,结合基因测序验证引物的特异性。进一步优化条件,建立高危型HPV多重PCR检测方法,检测65例宫颈肿瘤组织标本,与临床上使用的流式荧光杂交HPV检测法比较,评价其敏感性和特异性。[结果]成功建立可同时检测5种高危型HPV的多重PCR检测方法,对65例宫颈肿瘤组织进行高危型HPV检测,检出率为72.3%,明显高于临床流式荧光杂交检测法的检出率(32.31%)(χ2=3.86,P<0.05)。[结论 ]基于HPV E6/E7早期基因的高危型HPV多重PCR检测方法是特异、灵敏的高危型HPV检测方法。
- 谢旺凯王慧静肖兰兰计苏惠王俭陈向敏邹阮敏陈俊薛向阳
- 关键词:多聚酶链反应基因分型宫颈肿瘤
- 妇科门诊患者对宫颈癌知识的认知程度及其对宫颈癌检出率的影响被引量:28
- 2016年
- 目的:调查妇科门诊患者对宫颈癌知识认知程度,为开展宫颈癌知识健康教育提供科学依据。方法:2013年1月至8月妇科门诊就诊患者800例,对无主动意愿做宫颈癌筛查的患者进行宣传教育后愿意行筛查的作为动员组,对主动要求做宫颈癌筛查的为非动员组,通过两组宫颈癌筛查结果的对比,分析对宫颈癌筛查认知程度与宫颈病变的相关性。结果:动员组非本市户口较多,收入相对偏低,文化程度相对非动员组低,对宫颈癌相关知识认知度较低。临床检查结果:非动员组500例患者,CINⅠ18例,CINⅡ1例,CINⅢ0例,宫颈癌5例,总检出率4.8%;动员组300例患者,CINⅠ14例,CINⅡ2例,CINⅢ2例,宫颈癌9例,总检出率9.0%。动员组轻、中、重度癌前病变及宫颈癌检出率均高于非动员组,P<0.05。结论:应大力开展宫颈癌健康教育,提高宫颈癌筛查意识度,早发现早治疗,降低宫颈癌发生率。
- 杨丽玲陈俊张翔珍
- 关键词:宫颈癌细胞学检查
- 粪便隐血和肿瘤标志物联合检验在胃癌诊治中的价值研究被引量:7
- 2015年
- 目的探讨胃癌患者粪便隐血试验(FOB)及血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原242(CA242)、糖类抗原72-4(CA72-4)、组织多肽抗原(TPA)联合检测的临床诊疗价值。方法应用化学发光法、ELISA法等对102例胃癌患者的血清和粪便进行检测,并连续观察其手术前及手术后3年进行胃癌患者血清CEA、CA19-9、CA242、CA72-4、TPA水平和FOB结果。结果胃癌组血清CEA、CA19-9、CA242、CA72-4、TPA的测定值高于对照组和胃良性疾病组,差异有统计学意义(P<0.01)。胃癌患者手术3年后,部分患者的血清CEA、CA19-9、CA242、CA72-4、TPA的测定值及FOB持续升高,与病理进展吻合。结论 FOB及5项肿瘤标志物联合检测对胃癌的诊断和预后判断有重要的临床价值。
- 陈如昌陈俊吴健媛
- 关键词:胃癌癌胚抗原糖类抗原19-9糖类抗原72-4
- 宫颈癌组织HPV16早期基因E6相关转录本检测方法的建立及意义
- 2014年
- 目的:建立宫颈癌组织HPV16早期基因E6相关转录本检测方法,分析宫颈癌发生各时期的HPV16早期基因E6相关转录的情况。方法:留取HPV16阳性的宫颈肿瘤组织63例,包括8例低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)、38例高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)和17例宫颈癌,提取RNA,利用含保守序列的RT引物将标本中的mRNA反转录成5’端含保守序列的cDNA,并利用HPV16 E6特异性引物(P1)和保守序列(P0)进行PCR扩增,建立特异性扩增HPV16 E6相关转录本的方法,检测标本中HPV16 E6相关的转录本,通过E6特异性探针进行Southern杂交加以验证。结果:成功建立了HPV16 E6相关转录模式分析的方法。经分析HPV16阳性的LSIL、HSIL及宫颈癌组织中E6转录模式结果发现,不同级别HPV16阳性的宫颈肿瘤组织的转录模式差异显著。随着LSIL向宫颈癌发展,肿瘤组织中HPV16 E6转录本种类增多,且优势转录模式逐渐清晰。结论:成功建立HPV16 E6相关转录模式分析的方法,并发现HPV16早期基因E6相关的转录模式与宫颈肿瘤癌变程度密切相关,其可能参与宫颈癌的发生和发展。
- 卢徐涟邹阮敏陈向敏陈俊张丽芳薛向阳
- 关键词:人乳头瘤病毒16PAPILLOMAVIRUS
- 绿脓杆菌外毒素PE38KDEL重组蛋白原核表达及多克隆抗体的制备
- 2017年
- 目的:通过原核表达系统制备绿脓杆菌外毒素(PE)PE38KDEL重组蛋白,并制备特异性兔免疫血清多克隆抗体。方法:选择PE部分基因(PE38),并将C端609-613位的氨基酸REDLK突变为KDEL,通过原核密码子优化(http://www.jcat.de)后全基因合成,经Hind III和Xho I酶切位点克隆至p ET32a(+)原核表达载体,构建p ET32a(+)/PE38KDEL重组质粒,将测序正确的重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)感受态细菌中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组PE38KDEL蛋白,经Ni-NTA亲和层析法制备纯化蛋白,采用SDS-PAGE电泳和Western blot法进行鉴定。进一步将PE38KDEL纯化蛋白免疫日本大耳白兔制备PE38KDEL特异性多克隆抗体,并采集免疫前后血清,用ELISA法检测免疫后的抗体反应和效价。结果:成功构建了p ET32a(+)/PE38KDEL重组质粒。在原核表达系统中该质粒成功表达并获得纯化的PE38KDEL蛋白。SDSPAGE电泳显示蛋白分子质量约为57 k Da,与预计理论值大小相符合。Western blot法检测结果显示,在分子质量约57 k Da处出现单一条带。通过免疫大耳白兔成功获得PE38KDEL特异性多克隆抗体,抗体效价高达1:60 000。结论:PE38KDEL蛋白可诱导兔产生特异性多克隆血清抗体,且该抗体效价高、特异性强,为进一步研究基于PE38KDEL毒素的生物学和免疫学等功能奠定了基础。
- 岑丹维宋易玲张婵琼毛珊珊叶晓鲜陈俊陈韶朱珊丽张丽芳
- 关键词:铜绿假单胞菌PE38KDEL多克隆抗体