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蛋白质组修饰谱分析新方法: 翻译后修饰大多发生在具有重要生理调控功能的低丰度蛋白质分子上,其分析鉴定面临诸多技术上的挑战。为此我们发展了多种蛋白质组修饰谱分析的新技术新方法。为了实现规模化定量分析正常和肝癌人肝组织的N-糖基化蛋白组的表达差异,在利...; 叶明亮孙珍朱俊边阳阳王方军邹汉法; 关键词：糖基化磷酸化质谱色谱; 文献传递

基于蛋白质组学的细胞色素P450和葡萄糖醛酸转移酶亚型绝对定量分析被引量：2: 2014年; 利用蛋白质组学方法,将大鼠肝微粒体样品进行胰蛋白酶水解;再利用液相色谱-串联质谱法(LCMS/MS),采用多反应监测模式(MRM),通过测定蛋白质水解后产生的特征酶切肽段,实现同时对大鼠肝微粒体内药物代谢酶P450和UGT的绝对定量。本实验首先建立标准工作曲线,对肝微粒体样品中P450和UGT进行定量,在线性范围内,相关系数r>0.995,线性关系良好,定量限≤10 nmol/L;以合成的稳定同位素标记特征肽段作为内标,对UGT1A1进行定量分析。结果表明,同位素标记特征肽段与未标记肽段色谱行为与质谱响应一致,在基质溶液中同位素标记肽段线性关系良好,利用标准曲线法和稳定同位素稀释法测得UGT1A1含量分别为17.30和18.23 nmol/g,两种方法所得结果基本一致,但稳定同位素稀释法操作简便,更适用于复杂样品的高通量测定。; 刘喜东朱俊丛宇婷胡良海叶明亮顾景凯邹汉法; 关键词：葡萄糖醛酸转移酶多反应监测肝微粒体细胞色素P450 气相色谱-串联质谱

一种用于O糖基化肽段及其完整糖链的鉴定方法: 本发明涉及一种用于O糖基化肽段及其完整糖链的鉴定方法，具体是将糖基化蛋白样品首先通过PNGase F酶切去除N糖基化修饰的干扰，然后经过亲水作用色谱的富集，最后通过飞行时间质谱进行分析的技术流程。所述的方法流程具有操作简...; 邹汉法朱俊程凯叶明亮; 文献传递

离心辅助的糖蛋白微反应器用于N-糖蛋白组学: ＜正＞糖蛋白组学的样品预处理包括三个部分:蛋白酶解,糖肽富集和去糖基化。传统的预处理方法往往将这三部分逐一进行,而每两步之间需要对样品进行除盐,冻干等操作,容易造成样品损失,因此不适合用于微量样品。近年来一些研究人员通过...; 朱俊王方军陈锐程凯叶明亮邹汉法; 文献传递

人血清内源性多肽无标记定量分析新策略被引量：1: 2010年; 多肽组学(Pepti domics)以其在疾病标志物发现中所起的重要作用正受到越来越多的关注.然而,目前尚缺少针对多肽组学的高效定量方法.本文建立了一种基于纳升液相色谱与四极杆飞行时间质谱联用(μLC-Q-TOF-MS/MS)系统的色谱峰面积无标记多肽定量方法.该方法首先对两组样品中的多肽进行相对定量,然后选取相对量大于2或小于0.5的多肽,用纳升液相色谱与串联二级质谱(μLC-MS/MS)的选择性数据依赖模式(DDA)进行序列鉴定.将不同量标准样品牛血清白蛋白(BSA)酶解液加入到相同量的正常人血清样品中,然后用该方法进行定量分析,得到的定量结果平均相对偏差为6.42%.该方法分别被用于健康人血清与肝细胞癌(HCC)以及乳腺癌病人血清中内源性多肽的定量比较分析,并成功鉴定了血清中一些与HCC和乳腺癌相关的内源性多肽.由于Q-TOF-MS/MS的高分辨率和宽质量检测范围,价态高达+5和分子量超过4000的多肽也可被可靠地进行定性和定量分析.实验结果进一步表明在多肽组学分析中μLC-Q-TOF-MS/MS比传统的MALDI-TOF-MS具有更高的检测灵敏度.; 朱俊王方军董小莉叶明亮邹汉法; 关键词：血清肝细胞癌乳腺癌

一种用于O糖基化肽段及其完整糖链的鉴定方法: 本发明涉及一种用于O糖基化肽段及其完整糖链的鉴定方法，具体是将糖基化蛋白样品首先通过PNGase？F酶切去除N糖基化修饰的干扰，然后经过亲水作用色谱的富集，最后通过飞行时间质谱进行分析的技术流程。所述的方法流程具有操作简...; 邹汉法朱俊程凯叶明亮; 文献传递

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朱俊