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多抗用于快速比较未纯化酶/突变体的比活性: 酶的分子工程是生物技术领域研究的焦点，目前主要包括合理设计和定向进化。突变体的合理设计需要建立在了解酶的活性-构效关系的基础上，不仅在技术上具有挑战性，而且需要巨大的计算量;因此，通过建立起始酶突变体文库的定向进化更常用...; 冯一然; 关键词：尿酸酶多抗免疫比浊; 文献传递

一种均相定量比较未纯化酶及其突变体比活性的方法: 一种均相定量比较未纯化酶及其突变体比活性的方法，涉及如下步骤：重组表达需比较比活性的起始酶及其突变体；超声、化学裂解或冻融裂解宿主细胞，离心上清液用0.22μm滤膜过滤后的滤液为样品；用纯化后起始酶或某个突变体为免疫原，...; 廖飞杨晓兰胡小蕾冯一然种慧敏李雨薇; 文献传递

磁珠固定多抗预测最大吸附活性识别阳性突变体: 2017年; 目的考察磁珠固定多抗吸附细胞裂解液中酶/突变体,分析吸附酶活性对样品蛋白量响应曲线预测最大吸附活性(Vs)用于比较识别阳性突变体的可靠性。方法纯化重组表达大肠杆菌碱性磷酸酶(ECAP)及绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(PAAS)为免疫原;兔抗血清用33%硫酸铵分级和DEAE-纤维素层析纯化得多抗。磁珠羧基活化后固定多抗;用对硝基酚显色底物,碱终止后测定405nm吸收增量反映酶活性;分析吸附响应曲线预测Vs。结果多抗磁珠吸附酶的容量约2.0mg/g磁珠。ECAP比活性超过PAAS比活性70倍。ECAP突变体R168K较野生型比活性提高约50%,用2.5μg多抗磁珠反应10min即可预测Vs识别此阳性突变体;用PAAS突变体G138S为起始酶,用10μg多抗磁珠测定吸附酶反应20min后吸收预测Vs,能识别活性提高20%以上的PAAS弱阳性突变体。结论只要被吸附酶活性能可靠测定,优化磁珠固定多抗的用量能预测低活性酶/突变体Vs进行比较识别阳性突变体。; 种慧敏冯一然杨晓兰廖飞; 关键词：多抗突变体磁珠

一种均相定量比较未纯化酶及其突变体比活性的方法: 一种均相定量比较未纯化酶及其突变体比活性的方法，涉及如下步骤：重组表达需比较比活性的起始酶及其突变体；超声、化学裂解或冻融裂解宿主细胞，离心上清液用0.22μm滤膜过滤后的滤液为样品；用纯化后起始酶或某个突变体为免疫原，...; 廖飞杨晓兰胡小蕾冯一然种慧敏李雨薇; 文献传递

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冯一然