孙天旭
- 作品数：10 被引量：7H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅资助项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 一种猪蓝耳病重组疫苗
- 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗，将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联，构建了融合基因<i>ORF3-ORF5</i>，插入真菌特异性双T-DNA安全表达载体pCB130NG中，获得一种表...
- 李海燕李晓薇李玉王法微赵竟男李校堃王琦刘秀明姚娜孙天旭董园园王南王秀然卢天成王岩孙喆
- 文献传递
- 高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂
- 本发明公开了高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，通过构建真菌特异性表达植酸酶<I>phyA</I>基因的安全表达载体pCB130NG‑phyA，并转入蛹虫草原生质体，再生获得转基因蛹虫草子实体后，以子实体为母种，培养...
- 李海燕陈欢李晓薇李玉王法微李晰亮刘秀明姚娜董园园王南王琦王秀然卢天成王岩孙喆孙天旭
- 文献传递
- 一种融合抗菌肽及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种融合抗菌肽及其制备方法和应用，是将天蚕素抗菌肽B（cecropin B,CB）和鲎素抗菌肽tachyplesin I（TP I）串联构建了一种融合抗菌肽CB-TP I，通过优化天蚕素抗菌肽CB基因与鲎素抗...
- 李海燕李晓薇李玉王法微张敏李校堃刘秀明姚娜董园园王南王琦王秀然卢天成王岩孙喆孙天旭
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- PEG法介导蛹虫草遗传转化体系的建立被引量：6
- 2017年
- 由于真菌的遗传转化体系中一般以原生质体作为受体细胞,因而对蛹虫草原生质体制备的各种因素进行比较研究。结果表明,蛹虫草原生质体制备的最佳体系为:液体培养4天的蛹虫草菌球,以0.8 mol/L甘露醇作为稳渗剂,加入含1.5%蜗牛酶+1.5%溶壁酶复合酶,在34℃酶解蛹虫草菌球4 h时,原生质体得率达到1.0×10~7个/ml。潮霉素筛选压实验表明,蛹虫草原生质体在PDA固体培养基上的潮霉素最低筛选浓度为650 mg/L。采用正交试验的方法,设计PEG介导蛹虫草原生质体转化,将质粒p SB130-GFP转化蛹虫草原生质体,在荧光倒置显微镜下观察比较,得到最佳的转化体系为:PEG浓度为25%,冰浴时间为10 min,室温时间为20 min,质粒质量为30μg,原生质体个数为10~7个/ml。最终得到PEG法介导蛹虫草遗传转化的转化频率约为100~200个/μg(抗性转化子/质粒+10~7个原生质体)。转化子在含潮霉素的培养基上经4代以上的继代培养后仍可以表达潮霉素抗性并稳定遗传。为通过基因工程手段定向、快速改良蛹虫草药用品质,利用蛹虫草发酵方法生产一些具有重大经济价值的外源蛋白等奠定基础,并且有助于进一步了解蛹虫草这一大型真菌中基因的表达调控机制。
- 孙丹张敏解长睿郭晓威徐赫韩高红桃李晓薇孙天旭李海燕
- 关键词：蛹虫草潮霉素
- 一种猪蓝耳病重组疫苗
- 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗，将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联，构建了融合基因<I>ORF3‑ORF5</I>，插入真菌特异性双T‑DNA安全表达载体pCB130NG中，获得一种表达载体pCB130NG‑...
- 李海燕李晓薇李玉王法微赵竟男李校堃王琦刘秀明姚娜孙天旭董园园王南王秀然卢天成王岩孙喆
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- 高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂
- 本发明公开了高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，通过构建真菌特异性表达植酸酶phyA基因的安全表达载体pCB130NG-phyA，并转入蛹虫草原生质体，再生获得转基因蛹虫草子实体后，以子实体为母种，培养制得转基因蛹虫...
- 李海燕陈欢李晓薇李玉王法微李晰亮刘秀明姚娜董园园王南王琦王秀然卢天成王岩孙喆孙天旭
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- 提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白
- 提高S‑腺苷‑L‑半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白，涉及蛋白免疫原性领域，其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为：4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h；...
- 王秀然许春晓卢天成王晓龙王浩王岩李海燕李校堃孙喆李晓薇孙天旭王法微杨晶王艳芳刘秀明付玉芹
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- 红花二氢吡啶二羧酸合酶基因片段的分离及表达分析被引量：1
- 2017年
- 目的克隆红花Carthamus tinctorius赖氨酸合成途径关键酶二氢吡啶二羧酸合酶(dihydrodipicolinate synthase,DHDPS)基因并研究其在不同发育时期红花籽粒中的表达量。方法根据红花转录组文库注释信息筛选出与红花DHDPS(Ct DHDPS)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花总RNA的反转录产物为模板,采用RT-PCR技术克隆Ct DHDPS基因片段,连接p EASY-T1克隆载体,经PCR和酶切鉴定,筛选阳性克隆并测序。同时利用荧光定量PCR技术对其在红花籽粒不同发育时期基因表达量进行分析。结果分离到长度为396 bp的Ct DHDPS基因片段,系统发育树分析表明该基因与其他物种的DHDPS基因具有较高的同源性。结论克隆了Ct DHDPS基因的核心片段,根据Ct DHDPS基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行基因表达量分析,Ct DHDPS基因在红花品种川红1号初花后14 d表达量最高。
- 张玲王艳芳麦迪张伟胡振林杨晶杜林娜孙天旭雷锋杰姚娜李海燕李校堃
- 关键词：红花同源性
- 一种猪瘟重组疫苗
- 本发明公开了一种猪瘟重组疫苗，通过构建猪瘟病毒E2基因和Erns基因串联的真菌特异性双T-DNA安全表达载体；利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体，所述的食药用真菌为金针菇、平菇和蛹虫草、灵芝；经鉴定...
- 李海燕李晓薇李玉王法微杨贺李校堃王琦刘秀明姚娜孙天旭董园园王南王秀然卢天成王岩孙喆
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- 提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白
- 提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白，涉及蛋白免疫原性领域，其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为：4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH？6.0的PBS中反应1h；...
- 王秀然许春晓卢天成王晓龙王浩王岩李海燕李校堃孙喆李晓薇孙天旭王法微杨晶王艳芳刘秀明付玉芹
