吕志华
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 供职机构:大理大学农学与生物科学学院更多>>
- 发文基金:国家马铃薯产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 马铃薯RSAP-PCR反应体系的建立及优化
- 2016年
- 本研究以云南地方品种羊角洋芋为材料,采用单因素与L16(45)正交设计相结合的方法,对影响RSAPPCR反应体系的Mg2+浓度、Taq酶量、d NTPs浓度、模板DNA量和引物浓度进行优化,综合选取得到最佳反应体系。结果表明:马铃薯RSAP-PCR最佳反应体系为:20μL体系中,Mg2+浓度4.00 mmol/L,Taq酶2.00 U,d NTPs浓度0.45 mmol/L,模板DNA 60 ng,引物浓度0.50 mmol/L。应用该体系对退火温度进行优化,得到RSAP的两步最佳退火温度分别为35℃和51℃。利用10个马铃薯品种验证所得PCR体系,证明该体系稳定,可靠,重复性好,可为今后利用RSAP分子标记评价马铃薯的遗传多样性、开展品种选育、构建遗传图谱提供技术支持。
- 吕志华郭华春李彩斌杨慧菊王琼
- 关键词:马铃薯退火温度