于楠楠
- 作品数：9 被引量：18H指数：2
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- Prx Ⅱ基因对小鼠毛囊发育的影响
- 2018年
- 为了比较野生型与过氧化物酶Ⅱ（PrxⅡ）基因敲除型小鼠毛囊发育的差异,探究PrxⅡ基因对小鼠毛囊发育的影响,试验采用石蜡切片及苏木精-伊红（H.E.）染色的方法,在毛囊不同发育时期（胚胎期第16. 5天、出生第2天、出生第50天）,比较野生型与PrxⅡ基因敲除型小鼠皮肤厚度、毛囊数量,并采用蛋白免疫印迹方法检测皮肤组织中β-连环蛋白（β-catenin）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、C-Myc癌基因表达水平。结果表明：与野生型小鼠相比,胚胎期第16. 5天、出生第2天PrxⅡ基因敲除型小鼠皮肤厚度无明显变化;胚胎期第16. 5天PrxⅡ基因敲除型小鼠毛囊数量无明显变化,出生第2,50天PrxⅡ基因敲除型小鼠毛囊数量明显增加;胚胎期第16. 5天PrxⅡ基因敲除型小鼠β-catenin、Cyclin D1和C-Myc癌基因表达水平无明显变化,出生第2天PrxⅡ基因敲除型小鼠皮肤组织中β-catenin、Cyclin D1和C-Myc癌基因表达水平明显上升。说明在PrxⅡ基因敲除小鼠皮肤组织中,β-catenin、Cyclin D1、C-Myc癌基因表达水平上升,参与毛囊发育过程,调节毛囊数量。
- 于楠楠张永青杨学谦殷华钦韩英浩金美华
- 关键词：皮肤厚度细胞周期蛋白D1C-MYC癌基因Β-连环蛋白
- β-拉帕醌通过下调过氧化物酶V诱导SW480结肠癌细胞凋亡被引量：10
- 2016年
- 过氧化物酶V(peroxiredoxin V,Prx V)是过氧化物酶(peroxiredoxin)家族中的一员,广泛存在于线粒体、溶酶体及细胞质中,具有有效地清除细胞内一氧化氮(nitric oxide,NO)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)的功能。该文阐明β-拉帕醌(β-lapachone)引起SW480结肠癌细胞凋亡过程中Prx V的作用及其机制。该研究利用β-拉帕醌处理SW480细胞系,通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法、荧光显微镜照相、流式细胞术、蛋白质免疫印迹分析等方法检测细胞存活率、细胞内ROS水平、细胞凋亡情况以及凋亡相关蛋白质水平的变化。结果表明,β-拉帕醌通过抑制Prx V水平,致使细胞内ROS水平升高,激活线粒体依赖性凋亡途径,导致SW480结肠癌细胞凋亡。研究结果初步揭示了β-拉帕醌诱发SW480结肠癌细胞发生凋亡的机制,为结肠癌的治疗提供了新思路。
- 刘悦焦冰洋于楠楠王闯韩英浩金成浩孙虎男
- 关键词：活性氧细胞凋亡
- 盐酸苯胺诱导小鼠皮肤快速衰老模型的建立被引量：3
- 2017年
- 为研究皮肤衰老机制和抗皮肤衰老药物的筛选奠定基础。采用腹腔注射盐酸苯胺160 mg·kg-1,每3天一次,注射5次的方法建立皮肤衰老小鼠模型。结果显示:注射盐酸苯胺后,Prdx2基因敲除小鼠与野生型小鼠外周血含海因茨小体红细胞数量均上升(P<0.001);小鼠血液活性氧水平升高(P<0.01);皮肤组织中Cyclin D1,Cyclin E,p21,p16的表达量和p38,ERK的磷酸化程度均升高(P<0.01);小鼠真皮层厚度减少。表明酸苯胺可诱导小鼠皮肤提前衰老,且Prdx2可延缓这一作用。
- 刘军邱美玉于楠楠崔玉东韩英浩
- 关键词：皮肤衰老动物模型小鼠
- 奶牛脂肪间充质干细胞体外分离培养与鉴定被引量：2
- 2020年
- 探讨奶牛脂肪来源的间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,AD-MSCs)体外分离培养方法及其生物学特性。采集不同部位奶牛脂肪,选用0.25%胰蛋白酶消化,并进行贴壁培养,获取原代奶牛AD-MSCs,通过传代培养进一步纯化扩增。显微镜观察细胞形态及生长特征,并采用MTT法绘制2种AD-MSCs生长曲线,利用免疫荧光化学染色法检测其表面标志物,对该细胞进行了向成骨及成脂诱导分化培养试验,采用油红O和钙盐染色法对其分化能力进行鉴定。比较研究了不同部位脂肪的形态,2种不同部位的AD-MSCs均呈长梭形、纺锤形或多角形贴壁生长,且2个部位来源的AD-MSCs的生长曲线无明显差异(P>0.05)。分离培养的AD-MSCs的表面标志物CD44和CD73呈阳性表达,而CD34和CD45呈阴性表达。在诱导分化培养试验中呈现出较强的成脂和成骨分化能力。本试验选取不同部位的脂肪组织,成功的分离并鉴定了奶牛AD-MSCs,为纯化鉴定奶牛AD-MSCs提供了依据。
- 鲁文赓徐郑美刘庆于楠楠于佳斌李维龙毛莹莹曹立明杜珍珍司淋清付世新韩英浩
- 关键词：奶牛间充质干细胞体外分离培养体外诱导分化
- 沉默Prx Ⅱ基因促进5-FU诱导HepG2细胞凋亡研究
- 2019年
- 旨在探究Prx Ⅱ对5-FU诱导HepG2(人肝癌细胞系)细胞凋亡的影响,阐明沉默Prx Ⅱ基因提高5-FU促进HepG2发生细胞凋亡的作用。利用慢病毒介导的shRNA干扰技术建立Prx Ⅱ基因沉默的HepG2细胞系、MTT法检测细胞存活率、荧光显微照相测定凋亡情况、蛋白质免疫印迹检测凋亡相关蛋白表达水平。结果表明Prx Ⅱ基因沉默的HepG2细胞系构建成功;MTT检测发现在1mmol·L^-15-FU处理下,shPrx Ⅱ组细胞存活率明显低于Scramble组;荧光显微照相结果表明shPrx Ⅱ组细胞凋亡率明显高Scramble组;蛋白质免疫印迹结果表明PrxⅡ基因沉默的HepG2细胞中凋亡标志物PARP、促凋亡蛋白Bad的表达水平明显升高,抗凋亡蛋白Bcl-xL表达水平明显下降。研究表明,沉默PrxⅡ基因能提高HepG2对5-FU促凋亡作用的敏感性,导致HepG2细胞凋亡水平上升,研究结果可为提高肝癌细胞对于5-FU的敏感性提供新的潜在靶目标。
- 毛莹莹冯琳于楠楠陈冬勤刘芳美任晨曦金美华
- 关键词：HEPG2细胞系SHRNA干扰
- Prx Ⅱ缺失的真皮间充质干细胞提前衰老加速皮肤老化进程研究被引量：2
- 2019年
- 通过比较野生型和Prx Ⅱ(Peroxiredoxin Ⅱ)基因敲除型小鼠皮肤老化情况,阐明皮肤老化过程中Prx Ⅱ对真皮间充质干细胞的保护作用。体内试验采用病理组织切片,蛋白免疫印迹等方法检测两种129/SvJ小鼠皮肤组织及生理功能的差异;体外试验采用SA-β-gal染色对比两种真皮间充质干细胞衰老情况。结果表明同月龄的PrxⅡ基因敲除型小鼠与野生型小鼠相比真皮厚度层变薄,伤口愈合速度减慢,皮肤组织中P16、p21表达水平增加,PCNA表达水平降低;同代数的PrxⅡ基因敲除型的真皮间充质干细胞与野生型相比衰老细胞数量明显增多。综合分析,Prx Ⅱ基因敲除小鼠皮肤细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子表达上升,皮肤发生提前老化,与真皮间充质干细胞的细胞衰老存在相关性,为通过Prx Ⅱ延缓皮肤老化,减少因皮肤老化而引发的多种疾病提供基础理论。
- 于楠楠毛莹莹冯琳刘军韩英浩
- 关键词：PEROXIREDOXIN皮肤老化细胞衰老
- Prdx1调节HO-1翻译水平促进巨噬细胞清除脾脏沉积血红素被引量：1
- 2018年
- 为研究Prdx1在AH(Aniline Hydrochloride)诱导溶血性贫血小鼠模型中调控巨噬细胞清除脾脏沉积血红素的作用及其相关分子变化,腹腔注射AH,采用倒置显微镜、流式细胞仪、动物血液分析仪检测小鼠的溶血性贫血症状;通过免疫组织化学、Western Blot方法和RT-PCR技术检测Prdx1调控巨噬细胞清除脾脏沉积血红素的相关信号分子变化。结果表明,AH通过抑制HO-1的翻译水平诱导的Prdx1-/-小鼠脾脏血红素沉积显著高于野生型小鼠,HO-1的mRNA水平显著提高从而负反馈调节Nrf2的转录水平,引起Nrf-2/HO-1信号通路阻滞。
- 孔令祖王春丽甄兴张永青于佳斌于楠楠韩英浩
- 关键词：溶血性贫血巨噬细胞
- 低浓度H2O2预处理对犬ADSCs抗凋亡能力的影响
- 2020年
- 为了探究低浓度过氧化氢(H2O2)预处理对犬脂肪间充质干细胞(ADSCs)抗凋亡能力的影响,试验采用流式细胞术鉴定干细胞表面标志物,诱导成骨分化、成脂分化鉴定干细胞分化能力,MTT Assay检测H2O2处理后细胞存活能力,Western-blot检测凋亡和抗氧化蛋白质[抗相关死亡促进因子(Bad)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶前体(Pro-caspase3)、剪切后含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cle-caspase3)、超氧化物歧化酶2(SOD2)]表达水平。结果表明:所提取细胞为ADSCs,提取的犬ADSCs具有良好的分化能力,可以分化成脂肪细胞及骨细胞。低浓度(1.5,2,2.5μmol/L)H2O2可以促进或显著促进细胞增殖(P<0.05或P<0.01),高浓度(15,25,35μmol/L)H2O2可以显著或极显著抑制细胞增殖(P<0.05或P<0.01)。低浓度(10μmol/L)H2O2预处理后,高浓度(35μmol/L)H2O2诱导的促凋亡相关蛋白质Bad表达水平的升高被抑制,抗凋亡蛋白质Bcl2、Pro-caspase3表达水平的降低被抑制,抗凋亡蛋白质Cle-caspase3表达水平的升高被抑制,抗氧化蛋白质SOD2表达水平升高。说明低浓度过氧化氢预处理可提高犬ADSCs抗凋亡能力。
- 韩英浩孙虎男金美华于佳斌张永青于楠楠刘悦
- 关键词：过氧化氢氧化应激
- 干细胞分泌因子凝胶剂对老化皮肤创伤愈合的影响
- 2020年
- 采用真皮间充质干细胞分泌因子治疗老化小鼠皮肤创伤,旨在阐明干细胞分泌因子对老化小鼠皮肤创伤治疗效果及其相关调控机制。体内实验采用病理组织切片,观察创面皮肤组织学变化。体外实验采用MTT assay、蛋白质免疫印迹法检测含有干细胞分泌因子的条件培养基对小鼠真皮成纤维细胞增殖的影响。结果表明,干细胞分泌因子组与对照组相比能够明显促进老化皮肤创伤愈合;干细胞分泌因子组真皮成纤维细胞存活率更高,增殖相关蛋白PCNA,Cyclin D1表达水平上升,P-ErK蛋白表达水平上升。综上所述,干细胞分泌因子能够通过ErK信号通路促进真皮成纤维细胞增殖,进而加速老化皮肤创伤愈合。研究为治疗老化皮肤创伤提供新思路,为干细胞制剂的临床应用提供理论基础。
- 冯琳王媛范春桃王宝奇贺鑫梅于楠楠毛莹莹练旭冬韩英浩
- 关键词：真皮间充质干细胞创伤愈合真皮成纤维细胞条件培养基
