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小鼠CD4T细胞转化的双阴性T细胞的效应分子研究: 2017年; 目的研究小鼠CD4T细胞转化的CD4-CD8双阴性T细胞的功能特点，进一步明确双阴性T细胞的免疫抑制作用机制。方法应用转录组测序和蛋白质质谱技术分析了小鼠转化的双阴性T细胞基因表达谱。应用流式细胞术等技术验证了细胞活化分子CD44、CD69和OX40的表达水平并应用CFSE染色法验证双阴性T细胞的杀伤功能。结果小鼠转化的双阴性T细胞表达了与其他成熟CD4T细胞不同的细胞表型。小鼠转化的双阴性T细胞明显高表达细胞表面活化分子CD44、CD69和OX40，以及颗粒酶、穿孔素等细胞杀伤相关基因。穿孔素基因敲除的双阴性T细胞抑制淋巴细胞增殖的能力明显降低。结论小鼠CIMT细胞转化的双阴性T细胞是与其他成熟CD4T细胞不同的T细胞终末分化亚群。小鼠转化的双阴性T细胞高表达细胞活化分子和免疫杀伤类细胞因子，并主要通过穿孔素途径发挥免疫抑制功能。; 田丹孙广永刘锴田月施文王天琪金华张春盼张栋; 关键词：T淋巴细胞双阴性T细胞细胞转化转录组测序

NHERF表达对宫颈癌细胞耐药性的影响: 2016年; 目的探讨钠氢交换调控因子(NHERF)表达对宫颈癌细胞耐药性的影响。方法检测顺铂处理下He La细胞NHERF表达量的差异。干扰He La细胞中NHERF的表达,检测He La细胞在顺铂处理下细胞活力的变化。并在NHERF表达减少的情况下,检测顺铂、紫杉醇及甲氨喋呤处理对He La细胞凋亡的影响。结果顺铂处理下He La细胞中NHERF表达量下降。干扰NHERF表达的He La细胞耐顺铂活力增加。顺铂及紫杉醇处理组中,NHERF表达下降可以减少细胞凋亡。结论 NHERF表达下降可以增加宫颈癌细胞的多药耐药性。; 施文陶涛杨晓梅贺俊崎; 关键词：宫颈癌细胞耐药性

OX40基因对卵清白蛋白诱导的小鼠哮喘模型的影响机制研究: 2020年; 目的研究OX40基因对卵清白蛋白(OVA)诱导的小鼠哮喘模型中的影响及其机制。方法选取6~8周龄雄性C57/BL6小鼠20只,应用腹腔注射OVA致敏和雾化吸入OVA的方式诱导野生型和OX40基因敲除小鼠产生过敏性哮喘。通过苏木精-伊红染色、迪夫快速染色、肺气道呼吸阻力测试等方法验证哮喘疾病严重程度。通过流式细胞术检测肺泡灌洗液和肺实质中嗜酸性粒细胞、CD4 T细胞、滤泡辅助T(Tfh)细胞和CD11b^+CD8^-树突状细胞亚群比率。结果OX40基因敲除明显减轻了OVA诱导的小鼠过敏性哮喘的疾病症状和嗜酸性粒细胞在肺部的浸润。与野生型哮喘小鼠相比,OX40基因敲除的哮喘小鼠肺脏中CD4 T细胞和Tfh细胞亚群比率明显降低,CD11b^+CD8^-树突状细胞比率也明显降低。结论OX40基因促进了OVA诱导的小鼠哮喘疾病进程,并显著增高了Tfh细胞和CD11b^+CD8^-树突状细胞比率。; 田丹施文田月金华张春盼张栋; 关键词：小鼠哮喘树突状细胞

OX40调控双阴性T细胞的转化及抑制功能研究: 2017年; 目的探讨免疫共刺激分子OX40对双阴性T细胞(DN T细胞)转化、抑制功能的影响及可能的作用机制。方法通过中和抗体及基因敲除的方式将OX40作用阻断,检测在这一过程中DN T细胞的转化效率、抑制功能的变化及OX40对DN T细胞存活的影响。结果通过DN T细胞的转化实验发现,将OX40阻断,DN T细胞的转化效率分别从20.2%、29.1%降为10.5%、15.9%。同时与CD4 T细胞相比,OX40在DN T细胞中高表达,其阳性率为27.0%。通过DN T细胞的体外抑制实验发现,OX40敲除后的DN T对CD4 T细胞的抑制作用明显减弱。通过Annexin V染色发现,OX40敲除后DN T细胞的凋亡率分别从14.6%、22.3%增加为21.1%、35.1%,同时OX40敲除使DN T细胞抗凋亡基因表达降低。结论 OX40敲除能降低DN T细胞的转化效率,减弱其对CD4 T细胞抑制功能,这有可能与OX40敲除所致DN T细胞凋亡增加有关。; 孙广永孙晓静刘锴田月施文张栋; 关键词：双阴性T细胞 OX40 凋亡

双阴性T细胞的转化扩增方法: 本发明公开了一种双阴性T细胞的转化扩增方法，包括如下步骤：(1)提取起始样品中的单个核细胞，去除该单个核细胞中的CD8<Sup>+</Sup>T细胞和NK细胞；(2)将步骤(1)得到的样品在体外用包含T细胞刺激剂及细胞因...; 张栋李新民赵新颜孙广永刘锴田丹田月施文孙晓静许虎峰

双阴性T细胞通过抑制外周和局部炎症反应治疗小鼠缺血性脑卒中的机制研究: 缺血性脑卒中后,继发的炎症反应加重了病灶区的组织损伤、阻碍了神经细胞功能的恢复。因此,有效控制继发炎症反应对改善缺血性脑卒中的损伤和预后至关重要。双阴性T(DNT)细胞是一类新型免疫抑制性细胞,我们前期研究发现DNT细胞...; 田丹潘雨花蕾赵羽商王欢田月孙广永王崧施文李铭扬黄诗扬朱彦兵张栋; 关键词：缺血性脑卒中双阴性T细胞巨噬细胞调节性T细胞

抗胸腺细胞血清与CD4-CD8-T调节细胞联合应用逆转NOD小鼠自身免疫性糖尿病的实验研究: 目的:预防性输注由CD4+T细胞体外转化而来的CD4-CDS-T(DN T)调节细胞可明显延缓并降低NOD小鼠自身免疫性糖尿病的发病时间和发病率.对已发生自身免疫性糖尿病的NOD小鼠,单次注射4×106 DN T细胞仅能...; 刘天会丛敏王萍田月施文尤红张栋

白细胞介素-2对CD4+T细胞转化的CD4-CD8-双阴性T细胞的增殖与免疫调节功能的作用研究: 目的:CD4-CD8-双阴性T细胞(Double Negative T cells,DN T细胞)在器官移植排斥反应、自身免疫性疾病中发挥着重要的负性调节作用.我们的前期实验发现,CD4+T细胞可以转化为DN T细胞,而...; 丛敏刘天会王萍田月施文尤红张栋

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施文