目的 利用生物信息学方法预测分析铁死亡相关蛋白SLC7A11的理化、结构及抗原表位等性质并检测SLC7A11与GPX4在热射病(heat stroke,HS)大鼠心肌组织及H9C2心肌细胞中的表达水平,为临床中热射病的治疗提供新的潜在靶点。方法 利用多种工具预测分析SLC7A11蛋白的基本理化性质、信号肽跨膜区和跨膜结构域、蛋白质翻译后的磷酸化位点和N-糖基化位点、二级结构和三级结构、SLC7A11的抗原决定簇及与其相互作用的蛋白。体内实验分为对照组(n=6)、HS组(n=6),体外实验分为对照组、铁死亡抑制剂(Liproxstatin-1)组、HS组和HS+Liproxstatin-1组。利用Western blot和RT-qPCR检测大鼠心肌组织与H9C2心肌细胞中SLC7A11、GPX4 m RNA和蛋白水平。结果 SLC7A11为稳定疏水性蛋白,预测在第29~30位氨基酸存在信号肽,并含12个跨膜螺旋结构;SLC7A11存在40个磷酸化位点、12个N-糖基化位点;SLC7A11蛋白的二、三级结构主要由α螺旋、β-折叠及无规卷曲构成;SLC7A11含有15个抗原决定簇区域;SLC7A11可与GPX4等蛋白相互作用;与对照组比较,HS组大鼠心肌组织中SLC7A11(P<0.05)和GPX4(P<0.01)mRNA和蛋白质表达均降低;Liproxstatin-1组与对照组H9C2心肌细胞中SLC7A11和GPX4 m RNA和蛋白水平比较差异无统计学意义(P均>0.05),HS组SLC7A11与GPX4 m RNA和蛋白水平降低(P均<0.01);与HS组相比,HS+Liproxstatin-1组SLC7A11(P<0.05)和GPX4(P<0.01)m RNA和蛋白水平均有所改善。结论 SLC7A11为疏水性跨膜蛋白,存在大量磷酸化和N-糖基化位点,并含有15个抗原决定簇。HS大鼠心肌组织与高温干预的H9C2心肌细胞中铁死亡相关蛋白SLC7A11与GPX4表达减少,在细胞水平加入铁死亡抑制剂Liproxstatin-1后,SLC7A11与GPX4表达得到改善。
