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间充质干细胞源性外泌体提取鉴定方法研究被引量：1: 2018年; 目的:探讨间充质干细胞源性外泌体的成功提取方法。方法:应用试剂盒二次提取huc-MSCs外泌体,凝胶电泳法及BCA蛋白定量法检测两次提取外泌体蛋白纯度与含量的不同;电镜及流式细胞仪鉴定外泌体。结果:凝胶电泳法及BCA蛋白定量法证实二次提取后外泌体蛋白纯度提高,形态特征明显,并高表达CD63及CD81蛋白。结论:间充质干细胞外泌体经过二次提取纯化后,纯度提高,可以更准确的开展后续实验。; 杨前甘国胜袁紫林王刚陈力陈力张宜刁波; 关键词：干细胞外泌体纯化

军民急救新器材关键技术及应用: 张宜樊光辉刁波米永巍唐忠志陶军李达程青沈刚喻晶; 现代战争及重大交通事故等突发公共事件伤员众多、伤情严重，如果不及时救治，立即危及生命。战现场急救是战创伤救治中最重要的环节和手段，为实现快速、大量、高效的战现场抢救，现代战争急救理念有必要由“以卫生员为中心”的战伤救治模...; 关键词：; 关键词：急救器材创伤救治

JAK-STAT信号通路、IL-1β和IL-6在X射线辐照诱导PC12细胞损伤中的调控作用被引量：6: 2017年; 目的:探究JAK-STAT信号通路及炎症因子IL-1β、IL-6是否参与X射线诱导的PC12细胞辐射损伤。方法:采用X射线分别以2、4和8 Gy剂量照射PC12细胞,照射后24 h通过酶联免疫法检测IL-1β和IL-6的表达水平;Western blot检测p-JAK1、p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3和p-STAT5的蛋白水平。结果:与正常对照组相比,细胞经不同剂量X射线照射24 h后,IL-1β和IL-6的表达水平均升高,且与辐照剂量呈剂量依赖性;p-JAK1、pJAK2、p-STAT1、p-STAT3和p-STAT5的蛋白水平均升高,且上调程度与辐照剂量呈剂量依赖性。结论:JAK-STAT信号通路、IL-1β和IL-6可能参与X射线照射诱导PC12细胞的损伤调控。; 喻晶张宜刁波; 关键词：X射线 PC12细胞 JAK-STAT信号通路 IL-1Β

痛风模型动物的选择被引量：1: 2017年; 痛风病动物模型是生物医学研究中所建立的可模拟人类痛风病特征的动物实验对象和材料。通过对痛风病动物模型的研究,有利于更全面深刻地认识人类痛风病的发生、发展规律和制定防治措施。笔者就其造模动物的选择及高尿酸血症动物模型、急性痛风关节炎动物模型两种痛风病动物模型的研究进展进行了系统的介绍和讨论,为认识痛风病的发病机制及防治提供借鉴。; 王丽平朱以良陈芳刘琴张宜; 关键词：痛风

悬浮组织块法分离培养SD大鼠脂肪干细胞的实验研究被引量：4: 2017年; 目的:建立SD大鼠脂肪干细胞悬浮组织块分离培养法。方法:取正常SD大鼠股沟处脂肪组织,用悬浮组织块法和组织块贴壁法分离培养SD大鼠脂肪干细胞,观察细胞的生长状况及形态特征。取第3代对数期细胞,CCK-8法绘制其生长曲线;免疫荧光法检测其表面抗原CD29、CD44、CD45的表达情况;分别用成脂、成骨诱导培养液进行诱导分化,油红O、茜素红染色定性鉴定。结果:两种方法体外培养得到的SD大鼠脂肪干细胞形态为梭形纤维样,生长力旺盛,生长曲线为典型的"S"型;免疫荧光法检测显示第3代细胞强表达CD29、CD44,CD45表达阴性;细胞成脂诱导培养14 d后,油红O染色为阳性;成骨诱导培养14 d后,茜素红染色为阳性。结论:悬浮组织块法可以分离培养出SD大鼠脂肪干细胞,方法简便,为体外分离培养SD大鼠脂肪干细胞提供了一种新的方法。; 刘琴王丽平陈芳李晓明朱以良张宜

互联网上的化学结构看图软件资源: 目前,供免费下载的2维和3维分子看图软件品种繁多,看图软件运行后,可在网页上显示化学结构式。综合评价可参考相关网站(http://www.indiana.edu/- cheminfo/mvts.html)。; 张宜; 文献传递

冻存SD大鼠脂肪组织中脂肪干细胞的分离培养和鉴定: 2017年; 目的研究从冻存SD大鼠脂肪组织中分离培养脂肪干细胞(ADSC)的可行性。方法取健康SD大鼠股沟处脂肪组织,用100 m L/L二甲基亚砜联合900 m L/L胎牛血清(FBS)作为冻存剂,冻存于液氮中。3个月后复苏冻存的脂肪组织,进行ADSC的分离培养,观察细胞的生长状况及形态特征。取第3代细胞,CCK-8法绘制其生长曲线,免疫荧光技术检测CD29、CD45、CD90的表达;分别用成脂、成骨诱导培养液进行诱导分化,油红O、茜素红染色鉴定细胞分化情况。结果从冻存SD大鼠脂肪组织中分离得到的ADSC形态为长梭形纤维样,具有较好的增殖能力,生长曲线为典型的"S"型;免疫荧光技术证实细胞强表达CD29、CD90,CD45阴性;分离的细胞经成脂诱导后油红O染色为阳性,经成骨诱导后茜素红染色为阳性。结论从冻存SD大鼠脂肪组织中能够分离出ADSC。; 刘琴王丽平陈芳张宜; 关键词：SD大鼠脂肪组织冻存

叶酸联合成体神经干细胞治疗创伤性脑损伤大鼠的实验被引量：2: 2012年; 目的观察叶酸联合成体神经干细胞对创伤性脑损伤大鼠的治疗作用,探讨其可能作用机制。方法 120只Wistar大鼠随机分为6组,正常组,模型组,假手术组,叶酸注射组,成体神经干细胞移植组,成体神经干细胞移植+叶酸注射组。倒置显微镜下观察神经干细胞形态学变化;流式细胞仪检测神经干细胞表面标记物CD105、CD45、CD44、CD29的表达;免疫荧光法检测神经元特异性烯醇酶(NSE成熟神经元的特异性标志)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP胶质细胞的标记物)的表达;平衡木实验检测大鼠运动协调与整和能力;Morris水迷宫实验测试各组大鼠的学习记忆能力;HE染色及Brdu免疫组化实验观察脑组织形态学变化;酶联免疫吸附试验检测大鼠脑组中脑源性神经生长因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达;蛋白质印迹法检测脑组织中凋亡相关蛋白BCL-2、Bax、Caspase-3的表达。结果分离所得细胞能在体外传代培养,流式细胞仪检测发现细胞阳性表达CD44、CD29,阴性表达CD105、CD45,细胞经胎牛血清诱导分化后能形成NSE或GFAP阳性细胞。实验表明,叶酸与成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠模型后能显著改善其行为学变化,减轻脑组织的炎症反应,恢复受损神经细胞,增加脑组织内BDNF、NGF的含量,上调BCL-2的表达,下调Bax、Caspase-3的表达。结论叶酸联合成体神经干细胞干预创伤性脑损伤大鼠能显著改善中枢神经功能,对维持神经元微环境稳态具有重要的作用。; 刁波刘琴王丽萍张宜; 关键词：叶酸成体神经干细胞创伤性脑损伤

佐剂性关节炎模型兔成纤维样滑膜细胞的培养被引量：2: 2017年; 背景:目前研究者多采用酶消化法从类风湿性患者和佐剂性关节炎大鼠的滑膜组织中分离培养成纤维样滑膜细胞,采用组织块贴壁法体外培养佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞较少见。目的:建立佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞的培养方法并观察细胞的生物学特性。方法:采用多点多次注射佐剂的方法制备佐剂性关节炎兔动物模型,取膝关节滑膜组织,用组织块贴壁法分离培养成纤维样滑膜细胞,观察细胞形态特征。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,并用免疫荧光法检测波形蛋白的表达。结果与结论:倒置显微镜观察原代培养的关节炎兔滑膜细胞形态均为长梭状纤维样,符合成纤维样滑膜细胞的生长特征,且表达波形蛋白的细胞达98%。说明采用组织块贴壁法成功分离培养了佐剂性关节炎兔成纤维样滑膜细胞。; 王丽平刘琴陈芳陈利锋张宜; 关键词：佐剂性关节炎成纤维样滑膜细胞

影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素研究进展: 2017年; 目的总结影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素,为脂肪干细胞成脂分化研究提供参考。方法广泛查阅近年来国内外有关影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素相关研究报道,并进行总结。结果影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素很多,其中有很多因素仍存在争议,如供体年龄、健康状态、脂肪组织取材部位等,有待进一步研究。结论需进一步深入研究影响脂肪干细胞成脂分化的供体因素和实验因素,明确存在争议的事项,为脂肪干细胞在脂肪组织工程中的应用奠定基础。; 刘琴陈芳王丽平张宜; 关键词：脂肪组织工程脂肪干细胞成脂分化

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张宜

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