低密度脂蛋白(LDL)氧化是引起动脉粥样硬化(AS)的一个主要原因,为了探索恒温超声辅助技术对丁香总多酚的提取效果,及对LDL氧化修饰过程中荧光的抑制,本文采用该技术首先对丁香总多酚提取工艺进行了优化,进而分析其对LDL氧化修饰过程中荧光的抑制效果。结果表明,恒温超声辅助提取丁香总多酚最佳工艺条件为:超声功率270 W、超声频率80 k Hz、超声时间30 min、超声温度50℃、料液比1∶30、乙醇浓度60%,此条件下所提取的总多酚含量为(0.301±0.0043)g/g。通过最优工艺得到的丁香总多酚提取物能有效抑制LDL氧化修饰过程中Trp淬灭、总荧光产物及脂褐素的产生,且抑制效果与浓度成正比,呈现出良好的量效关系。该研究为后续将丁香总多酚研发成抑制LDL氧化功能食品提供依据。
LDL氧化修饰是致动脉粥样硬化的关键性因素。其中,在氧化修饰过程中LDL所含脂类、蛋白及其光谱学性质均会受到影响。前期研究结果发现丁香对LDL氧化修饰具有很强的抑制作用。但是,丁香是否是通过抑制脂类及蛋白氧化来实现,以及丁香是否能抑制LDL氧化修饰后光谱学性质的改变,这些问题目前均不清楚。据此,运用紫外吸收光谱、荧光光谱等方法研究了丁香有效部位(effective fraction from clove,EFC)对LDL氧化修饰的抑制效果。研究结果表明,EFC能有效延缓脂质氧化过程中共轭二烯(CD)增殖及推后其达到最大值,并抑制胆固醇降解;也可抑制蛋白组分apoB100中Trp荧光猝灭及Lys氧化修饰和荧光光谱变化;同时也能抑制LDL中脂质与蛋白过氧化产物-脂褐素的生成;此外,该部位对LDL氧化修饰过程中紫外-可见光谱学特征的改变也有影响。论文将为丁香抗AS功能食品研发提供参考。
低密度脂蛋白(LDL)所含的色氨酸(Trp)、赖氨酸(Lys)发生氧化修饰是导致动脉粥样硬化(AS)形成的重要因素。为反映丁香乙酸乙酯相(EAFC)对LDL氧化过程中Trp、Lys修饰的抑制作用,本文首先对LDL氧化评价孵育体系中氧化剂Cu SO4及底物LDL浓度进行优化;进而以荧光为主要指标对这种抑制效果进行了评价。结果表明,选定CuSO_4浓度1.25、25μmol/L与LDL浓度500μg/m L为配比做后续实验。20μg/m L EAFC能抑制Trp降解导致的荧光淬灭,抑制作用显著高于1μg/m L阳性对照(2,6-二叔丁基对甲基苯酚,BHT)(p<0.01)。3μg/m L EAFC能抑制高反应活性醛修饰Lys,10μg/m L EAFC能显著抑制Lys与4-HNE共价结合(p<0.01)。15μg/m L EAFC能有效抑制Lys与MDA交联,抑制效果强于1μg/m L BHT。15μg/m L EAFC能显著抑制脂褐素形成(p<0.01)。本文为后期解析EAFC抑制LDL氧化修饰作用方式、抑制氧化LDL与清道夫受体之间识别等作用机理提供参考。
