杨莹
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
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- Wnt信号调控骨髓源巨噬细胞参与肾脏纤维化的作用及机制被引量：4
- 2018年
- 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对骨髓来源巨噬细胞(BMDM)的影响,探讨Wnt信号调控该过程的作用与机制。方法无菌分离获取小鼠BMDM,以集落刺激因子(M-CSF)作为刺激因素,于37℃、5%CO_2培养箱中培养7d,倒置相差显微镜观察细胞形态改变,流式细胞仪鉴定BMDM纯度。后以TGF-β1作为干预因素,分别设立对照组(A组:a-MEM高糖培养基+M-CSF)、实验组(B组:a-MEM高糖培养基+M-CSF+TGF-β1),M-CSF浓度为60 ng/ml,TGF-β1浓度为5 ng/ml。以α-SMA作为肌成纤维细胞表面标志物,以F4/80作为巨噬细胞表面标志物,3 d后流式检测α-SMA^+F4/80^+细胞比例、Western blot测定各组Wnt3a、DVL(dishevelled蛋白)、β-catenin蛋白的表达。应用SPSS 19.0统计软件进行数据处理。结果 M-CSF刺激骨髓细胞7 d后流式检测BMDM比例最高,纯度达(94.44±6.11)%。以M-CSF诱导7d为分组时间点,与对照组相比较,3 d后实验组α-SMA^+F4/80^+细胞比例明显升高(t=6.365,P=0.0007),Wnt3a、DVL、β-catenin的蛋白表达也显著增高(t_(Wnt3a)=12.06,P<0.0001;t_(DVL)=8.168,P=0.0002,t_(β-catenin)=6.752,P=0.0005)。结论TGF-β1可刺激BMDM向肌成纤维细胞转化;Wnt信号通路可能参与调控BMDM的纤维化过程;通过降低巨噬细胞Wnt信号通路的活性可能成为延缓纤维化发生的潜在治疗思路。
- 冯晓剑杨莹王利华袁瑞霞
- 关键词：肾脏纤维化WNT信号通路
- Fabry病并发甲状腺功能减退症一例
- 2017年
- Fabry（Anderson-Fabry）病是一种罕见的X染色体伴性遗传疾病。其发病机制是由于α-半乳糖苷酶A编码基因发生突变或缺失,引起体内α-半乳糖苷酶A（alphagalactosidase A,GLA）部分或全部缺乏,造成其代谢底物三己糖酰基鞘脂醇（globotriaosylceramide,Gb3）和相关的鞘糖脂不能分解,进行性的在肾脏、心血管系统、神经系统等部位堆积,进而引起多个系统脏器的损害[1]。近期的研究表明,内分泌功能障碍,
- 杨莹乔晞王利华
- 关键词：FABRY病伴性遗传Α-半乳糖苷酶鞘糖脂内分泌功能障碍鞘脂
- 巨噬细胞在急性肾损伤向慢性肾脏病转变中的作用
- 2023年
- 急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是高发病率、高死亡率的肾脏病。早期认为AKI是可逆性疾病,但近年研究表明,损伤较轻的AKI患者,仍可能进展为(chronic kidney disease,CKD)。多种类型的细胞参与AKI的病理生理学越来越清楚,但目前AKI向CKD转变的具体机制不完全清楚,可能涉及线粒体功能障碍、氧化应激、缺氧、表观遗传修饰、细胞周期停滞、组织细胞衰老、炎性细胞(巨噬细胞)等[1]。
- 吉春风杨莹王利华
- 关键词：线粒体功能障碍急性肾损伤慢性肾脏病巨噬细胞表观遗传修饰细胞衰老
- FoxO1转录因子在巨噬细胞中的表达与炎症的关系被引量：6
- 2016年
- 目的通过研究叉头框蛋白1(forkhead transcription factors of O class 1,FoxO1)转录因子mRNA水平和蛋白水平在巨噬细胞的表达以及检测Foxo1干扰和过表达后巨噬细胞分泌的炎症因子含量,从炎症进展的角度探讨FoxO1转录因子与炎症之间的关系。方法①利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬细胞Ana-1制作炎症模型,ELISA测炎症因子IL-6、TNF-α的浓度;②采用Real-Time PCR,Western Blot测FoxO1转录因子在mRNA水平以及蛋白水平的含量;③利用脂质体2 000将Fox O1 si RNA转染Ana-1细胞,采用ELISA检测对照组和干扰组分泌的炎症因子IL-6、TNF-α的含量;④利用脂质体2 000将FoxO1过表达质粒转染Ana-1细胞,采用ELISA检测LPS组和过表达组炎症因子IL-6、TNF-α的含量。结果①ELISA实验显示,在LPS的浓度为50 ng/mL时巨噬细胞分泌的炎症因子IL-6、TNF-α含量分别为2 190、1 124 ng/mL,干预时间为36 h时分别为2 190、1 995 ng/mL。此条件下炎症因子含量最高;②Real-Time PCR实验和Western blot实验结果显示,在LPS组FoxO1转录因子mRNA水平是对照组的0.36倍,蛋白水平的表达量是对照组的0.58倍;③Foxo1 siRNA干扰实验结果显示,与对照组相比,干扰组巨噬细胞分泌炎症因子TNF-α含量从782 ng/mL上升到1 290 ng/mL,IL-6的含量从161 ng/mL上升到251 ng/mL;4.脂质体转染过表达FoxO1质粒实验显示,与LPS组相比,过表达组巨噬细胞分泌炎症因子TNF-α的含量从1 785 ng/mL下降到1 329 ng/mL,IL-6含量从486 ng/mL下降到317 ng/mL。结论LPS刺激巨噬细胞Ana-1产生炎症反应,导致炎症因子的释放,同时下调Foxo1转录因子在mRNA水平和蛋白水平的含量,特异性FoxO1基因沉默可上调炎症因子的释放。过表达FoxO1可以使炎症反应减轻,证明Foxo1转录因子参与巨噬细胞引起的炎症反应。
- 张娜张紫燕赵凌霞姚怡杨莹张建林郑国平
- 关键词：巨噬细胞炎症反应
- 叉头框蛋白O3a表达下调对人肾小管上皮细胞EMT的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:研究叉头框蛋白O3a(forkhead box protein O3a,Fox O3a)下调对人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间质转化(EMT)的影响和机制。方法:体外培养HK-2细胞,10 ng/m L TGF-β1诱导HK-2细胞建立EMT细胞模型,Western blot检测E-cadherin、α-SMA表达,证明细胞EMT模型建立成功。Western blot检测在EMT细胞和正常细胞中转录因子Fox O3a的表达变化。敲低正常HK-2细胞中的Fox O3a后,Western blot检测细胞的EMT程度。Western blot检测EMT细胞与低表达Fox O3a细胞中β-Catenin的表达变化。结果:TGF-β1处理HK-2细胞作用后E-cadherin表达量显著减少(P<0.01),α-SMA蛋白表达量明显增加(P<0.05),证明EMT细胞模型建立成功。与正常HK-2细胞相比,EMT细胞中转录因子Fox O3a显著减少(P<0.01)。敲低HK-2细胞中的Fox O3a后,E-cadherin表达量显著减少(P<0.01),α-SMA蛋白表达量明显增加(P<0.05),出现EMT现象。相比于正常细胞,EMT细胞的β-Catenin表达增加(P<0.05);Fox O3a敲低的细胞中β-Catenin表达也显著增加(P<0.01)。结论:HK-2细胞通过降低转录因子Fox O3a的表达,从而上调β-Catenin,促进细胞上皮-间质转分化。
- 姚怡张建林赵虹刘志贞杨莹张紫燕赵凌霞郑国平
- 关键词：肾小管上皮细胞FOXO3AΒ-CATENIN上皮-间质转化
- 肾脏纤维化中转化生长因子β1对骨髓源巨噬细胞向肌成纤维细胞转化的调控机制被引量：1
- 2017年
- 探究骨髓源细胞转化为肌成纤维细胞的主要细胞类型及转化生长因子β1（TGFβ1）参与调控其转化过程的机制.取绿色荧光蛋白标记C57小鼠骨髓移植于辐照清髓小鼠体内,经骨髓再造12周,制作单侧输尿管结扎（UUO）模型,简单随机法随机分为假手术组、UUO3d组、UUO5d组、UUO7d组、UUO7d＋ TGFβ1组,每组4只.流式检测骨髓源各型细胞的转化情况.结果显示,随UUO造模时间的延长,小鼠肾组织中GFP＋ CD14^＋ α-SMA＋细胞、GFP^＋CD44^＋CD105^＋α-SMA＋细胞、GFP^＋ F4/80^＋α-SMA＋细胞表达逐渐增多,其中UUO7d最多,GFP^＋ F4/80^＋α-SMA^＋细胞在3种细胞中所占比例最多,是主要的细胞类型.UUO7d^＋ TGFβ1组GFP^＋ F4/80^＋α.-SMA＋细胞表达水平高于假手术组和UUO7d组,提示TGFβ1促进骨髓源巨噬细胞转化为肌成纤维细胞.UUO7d^＋ TGFβ1组小鼠肾组织病理表现为肾小管和肾间质中胶原纤维明显增多,F4/80、胶原蛋白Ⅰ表达明显增多,α-SMA表达明显增多.骨髓源单核细胞、间充质干细胞、巨噬细胞均有转化为肌成纤维细胞的可能,其中骨髓源巨噬细胞是主要的转化细胞类型.TGFβ1促进骨髓源巨噬细胞向肌成纤维细胞转化,从而加重肾脏纤维化及肾功能恶化.
- 杨莹冯晓剑刘新艳王利华郑国平
- 关键词：转化生长因子Β1肾脏纤维化
