张洋
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 供职机构：广州中医药大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 川芎嗪对t-BHP致PC12细胞损伤的保护及机制被引量：3
- 2019年
- 目的:研究川芎嗪(TMP)对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路的影响。方法:培养PC12细胞,孵育不同浓度的川芎嗪(10,25,50,100,200μmol·L^(-1)),12 h后采用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)确定川芎嗪的保护浓度。随后将PC12细胞分为空白组,t-BHP组,TMP组。空白组加入培养基,t-BHP组加入t-BHP(200μmol·L^(-1)),TMP组加入TMP(25,50,100μmol·L^(-1))预处理12 h后加入t-BHP(200μmol·L^(-1))。共作用6 h后采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、活性氧(ROS)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),Akt,磷酸化Akt(p-Akt)及m TOR,p-mTOR的表达情况。结果:与空白组比较,t-BHP组细胞生存率降低(P<0.01),与t-BHP组比较,25,50,100μmol·L^(-1)的川芎嗪促进细胞增殖(P<0.05,P<0.01),其中50μmol·L^(-1)组的细胞增殖率最高(P<0.01);与空白组比较,t-BHP组LDH的释放量,ROS和MDA含量显著增加(P<0.01),SOD和GSH-Px的活性显著降低(P<0.01),与t-BHP组比较,TMP组LDH的释放量,ROS和MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),SOD和GSH-Px的活性显著升高(P<0.05,P<0.01);Western blot表明与空白组比较,t-BHP组中p-Akt,p-mTOR蛋白表达水平明显下降(P<0.01),Bcl-2/Bax值明显降低(P<0.01),与t-BHP组比较,TMP(50μmol·L^(-1))组中p-Akt,p-mTOR蛋白表达水平明显上升(P<0.05),Bcl-2/Bax值明显上升(P<0.05)。另外LY294002(PI3K蛋白抑制剂)处理减弱了这些变化。结论:川芎嗪通过激活PI3K/Akt/m TOR信号通路保护t-BHP诱导的PC12细胞损伤。
- 黄伟李涵李本岳张洋关莉王奇
- 关键词：川芎嗪PC12细胞
- 补阳还五汤对脑缺血再灌注后星形胶质细胞connexin43影响机制的研究被引量：13
- 2017年
- 目的:探讨补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注后星形胶质细胞缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)的影响机制。方法:运用线栓法建立大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,补阳还五汤治疗1 d后ELISA法检测细胞因子[白细胞介素-1 beta,(IL-1β)和白细胞介素-10,(IL-10)]的表达,通过使用NF-κB激动剂增强炎症反应后,比较海马CA1区Cx43的表达,同时,使用HE染色观察细胞形态学改变。在补阳还五汤治疗7 d后,免疫组织化学染色法观察b FGF的表达情况,联合使用b FGF中和抗体后比较各组海马CA1区Cx43的表达同时HE染色观察细胞形态学改变。结果:同模型组相比,补阳还五汤组脑缺血再灌注1天后,IL-1β减少IL-10增加(P<0.05);联合使用NF-κB激动剂后补阳还五汤对海马CA1区Cx43的下调作用被抑制(P<0.05),HE染色显示联合组较补阳还五汤组神经元损伤加重。脑缺血7 d时补阳还五汤增强b FGF和Cx43的表达;联合使用b FGF中和抗体后海马CA1区Cx43的表达较补阳还五汤组降低(P<0.05),HE染色显示同补阳还五汤组比,联合组神经元状态更差。结论:补阳还五汤在脑缺血后1 d可能是通过抑制炎症下调Cx43发挥保护作用,而在脑缺血后7 d可能通过上调b FGF增强Cx43促进修复。
- 郭建超苏宁刘微吴绍锋周乐全关莉张洋李小英
- 关键词：补阳还五汤脑缺血再灌注星形胶质细胞连接蛋白43BFGF
- 柚皮苷对脑缺血再灌注损伤的保护作用被引量：6
- 2017年
- 目的研究柚皮苷(Naringin,NRG)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及星形胶质细胞是否参与其中。方法柚皮苷连续灌胃7 d后进行大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO),缺血2 h后拔出线栓进行再灌注。24 h后TUNEL染色观察凋亡细胞数量,苏木精-伊红(hematoxyli-eosin,HE)染色观察形态学改变,免疫荧光染色分别检测星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)。结果同模型组相比,柚皮苷预干预后凋亡细胞数量显著减少(P<0.05),细胞损伤明显减轻。免疫染色显示柚皮苷可以减轻星形胶质细胞的激活程度,同时Cx43的表达也有所降低(P<0.05)。结论柚皮苷预干预可有效减轻脑缺血再灌注损伤,该保护作用同降低星形胶质细胞Cx43表达密切相关。
- 刘微张洋郭建超练鹏影吴敏华丁文婷
- 关键词：柚皮苷缺血再灌注星形胶质细胞CX43
- 补阳还五汤对脑缺血后3天和15天miRNA表达的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨补阳还五汤对大脑中动脉栓塞后不同时间大鼠脑内微小核糖核酸(miRNA)表达的影响。方法建立大脑中动脉栓塞的脑缺血模型,芯片方法观察miRNA的表达差异,RT-PCR进行验证。结果与3天模型组相比,补阳还五汤组miRNA有2个上调,1个下调;与15天模型组相比,补阳还五汤组miRNA有5个上调,4个下调。随后,选取3个miRNA使用RT-PCR验证各组大鼠脑内miRNA差异表达,同芯片结果相符。结论补阳还五汤对脑缺血后3天和15天miRNA均能产生影响,提示补阳还五汤对脑缺血急性期和修复期都具有治疗作用。另外,相比较而言,补阳还五汤对脑缺血后15天miRNA影响的数量更多,可能其促进修复的作用更具有优势。
- 刘微丁文婷郭建超张洋周乐全关莉林锐珊
- 关键词：脑缺血补阳还五汤MIRNA
