李新琼
- 作品数：6 被引量：10H指数：3
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- 一种同时检测艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的试剂盒
- 本发明提供了一种同时检测艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的试剂盒，属于多重PCR检测技术领域。本发明的试剂盒含有分别针对艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的特异性引物对和一对内参引物，特异性引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID...
- 李群郑翰王红熊衍文李新琼张正东刘祥张玲邹年莉闫国栋
- 艾伯特埃希菌快速鉴定方法比较研究被引量：4
- 2017年
- 目的评价目前用于快速鉴定艾伯特埃希菌方法的特异性。方法利用51株艾伯特埃希菌及其他对照菌株,分别评价基于clpX、lysP和mdh基因的三重聚合酶链式反应(PCR);基于EA0134基因的单重PCR;基于EACBF2103-EACBF2104基因的巢式PCR。结果 51株艾伯特埃希菌三重PCR均为阳性,鉴定吻合率为100%;巢式PCR两轮结果均为阳性,鉴定吻合率为100%,对照组第1轮PCR结果全部为阴性,但第2轮出现非特异条带。51株中49株EA0134基因为阳性,鉴定吻合率为96.08%,对照菌株中伤寒沙门菌和肠出血性大肠埃希菌O157∶H7扩增出大小类似的片段。结论 EA0134基因在一些菌株中缺失,会造成漏判,同时在部分肠道菌株中存在非特异性扩增,会造成误判。三重PCR和巢式PCR的第1轮扩增均具有高特异性,可作为目前艾伯特埃希菌分离株的PCR快速鉴定方法,为艾伯特埃希菌相关的临床诊断和突发公共卫生事件处置,提供准确快速的诊断依据。
- 刘祥张玲李新琼闫国栋邹年莉张正东李群熊衍文王红
- 关键词：特异性评价
- 艾伯特埃希菌多重PCR检测方法的建立
- 2018年
- 目的建立一种快速检测艾伯特埃希菌的多重PCR检测方法。方法根据lysP和EA0134基因建立多重PCR反应体系,并对引物浓度、反应时间及温度等反应条件进行优化,同时评价其灵敏性和特异性。运用该方法对实验室分离的63株艾伯特埃希菌菌株及增菌液和非艾伯特增菌液进行了检测。结果两对引物均能特异性扩增相应的基因,其灵敏性均为25 CFU/反应(500 CFU/ml)且非常特异。对本实验分离的艾伯特埃希菌增菌液和非艾伯特埃希菌增菌液的检测结果与之前传统方法的一致。结论本研究建立的多重PCR方法可用于艾伯特埃希菌的初步筛查和分离株的鉴定,为艾伯特埃希菌的快速鉴定和鉴别提供了一种新的检测方法。
- 李新琼张正东熊衍文许彦梅刘祥张玲闫国栋邹年莉李群王红
- 关键词：多重PCR基因
- 自贡地区艾伯特埃希菌的筛查及菌株特征分析被引量：7
- 2017年
- 目的 了解自贡地区人群、动物源性食品、家禽及鸟类携带艾伯特埃希菌情况及菌株特征.方法 采集市售牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉、鸭肉、鸭肠及鸡肠,不同鸟类粪便及腹泻患者和密切接触人群粪便,经EC肉汤增菌后,PCR检测eae基因,阳性增菌液接种麦康凯琼脂,挑取不发酵乳糖、eae阳性菌落进一步通过16S rDNA测序及多位点序列分型分析（MLST）,确定为艾伯特埃希菌,并对菌株进行eae、cdtB多态性分析及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型分析.结果 本研究共鉴定51株艾伯特埃希菌（19株来源于鸭肠及其内容物、18株来源于鸡肠及其内容物、3株来源于腹泻患者粪便、3株来源于密切接触人群粪便、1株来源于白鹭粪便、3株来源于鸡肉、2株来源于鸭肉、1株来源于猪肉、1株来源于羊肉）.eae分为6种亚型,分别为sigma、rho、iota2、epsilon3,nu及N5,而51株艾伯特埃希菌均具有Ⅱ/Ⅲ/ⅤcdtB亚型,其中3株菌同时具有Ⅰ/ⅣcdtB亚型.51株分离株共分为40种PFGE带型,呈多态性分布.结论 首次在中国腹泻患者、密切接触人群、野生白鹭、家禽和动物源性食品中证实了艾伯特埃希菌的存在,对进一步深入开展艾伯特埃希菌病原学、流行病学研究具有重要实际意义.
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- 关键词：动物源性食品多位点序列分型脉冲场凝胶电泳
- 一种同时检测艾伯特埃希氏菌O1-O7血清型的试剂盒
- 本发明提供了一种同时检测艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的试剂盒，属于多重PCR检测技术领域。本发明的试剂盒含有分别针对艾伯特埃希氏菌O1‑O7血清型的特异性引物对和一对内参引物，特异性引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID...
- 李群郑翰王红熊衍文李新琼张正东刘祥张玲邹年莉闫国栋
- 文献传递
- 四川自贡地区健康人群中艾伯特埃希菌的分离鉴定被引量：4
- 2017年
- 目的了解长期从事鸡鸭等家禽养殖及屠宰人员等健康人群艾伯特埃希菌的携带情况。方法收集家禽养殖、屠宰人群及其他健康人粪便,经EC肉汤增菌后PCR检测eae基因,阳性样品接种麦康凯琼脂,挑选不发酵乳糖菌落,通过16SrDNA序列分析和多位点序列分型(MLST)对菌株进行鉴定。分离株进行紧密粘附素亚型和cdtB亚型分析,并通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析与动物来源艾伯特埃希菌菌株间的相关性。结果从189份从事鸡鸭宰杀人员的粪便中,分离到2株艾伯特埃希菌,从58份其他健康人群粪便中分离到1株菌,而138份家禽养殖场人员粪便中未分离到菌株。3株菌株的紧密粘附素亚型分别为sigma,iota 2,nu,cdtB亚型均为Ⅱ/Ⅲ/Ⅴ亚型。PFGE显示三株菌之间的带型相似性小于80%,并且与鸡鸭等来源的艾伯特埃希菌带型不同。结论从事鸡鸭屠宰等健康人员中存在一定程度的艾伯特埃希菌携带率,但其与家禽携带艾伯特埃希菌的关系,仍需进一步研究。
- 张玲刘祥许彦梅李新琼王红熊衍文
- 关键词：EAEMLSTPFGE
