韩甜甜
- 作品数：7 被引量：52H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 稳定表达CDC50A的卵巢癌细胞株的建立及鉴定
- 2022年
- 目的以分子克隆技术建立稳定表达人细胞周期调控蛋白50A(CDC50A)的SKOV3细胞株。方法通过分子克隆技术将CDC50A定向连接到表达载体pLVX-IRES-GFP上。pLVX-CDC50A-GFP表达质粒经慢病毒包装,稳定转染SKOV3,建立稳定表达CDC50A的SKOV3细胞株,通过流式细胞测量术、免疫印迹、免疫荧光分析其Flag标签蛋白表达。结果通过电泳及酶切鉴定证实了pLVX-CDC50A-GFP表达载体的构建,荧光显微镜定性观察病毒感染效率,流式细胞测量术检测感染效率为86.5%,免疫印迹法只检测到pLVX-CDC50A-GFP表达质粒的SKOV3细胞株有Flag标签蛋白表达,阴性对照组无蛋白表达。结论成功构建了CDC50A的表达载体,并通过慢病毒感染建立了过表达CDC50A的SKOV3细胞株,为开展CDC50A在卵巢癌中的机制研究奠定了基础。
- 韩甜甜尹婕曾靖金滢李艳潘凌亚
- 关键词：过表达卵巢癌
- 阑尾切除术在恶性和交界性卵巢黏液腺瘤手术治疗中的研究进展被引量：1
- 2017年
- 卵巢黏液性肿瘤是卵巢上皮性肿瘤中一类较少见且具有独特生物学特征的亚型，其中黏液腺癌占卵巢上皮癌的2％～4％，交界性黏液腺瘤占卵巢交界性肿瘤的30％-50％。目前黏液腺癌的病因尚不明确，卵巢因解剖结构上不具有正常黏液性上皮的成分，卵巢皮质的上皮细胞黏液化生也非常罕见，卵巢黏液肿瘤的腺上皮与胃肠道上皮细胞在病理形态上相似，基于以上几点，尽管总体而言卵巢黏液性肿瘤预后较好，交界性肿瘤总体生存率可达到100％，黏液腺癌5年无病生存率可达80％～90％，但是考虑卵巢黏液性肿瘤可能起源于阑尾或者其他消化器官，故一旦考虑为卵巢黏液性肿瘤，需首先排除胃肠道肿瘤来源，特别是结肠来源，均需预防性切除阑尾。
- 韩甜甜李雷
- 关键词：卵巢黏液性肿瘤阑尾切除术手术治疗腺瘤肠道上皮细胞无病生存率
- 人上皮性卵巢癌细胞系侧群细胞的肿瘤干细胞样细胞生物学特性及膜蛋白差异表达的鉴定被引量：5
- 2022年
- 目的鉴定上皮性卵巢癌细胞侧群细胞(SP细胞)肿瘤干细胞样细胞生物学特性,并检测侧群细胞内差异蛋白质的表达。方法流式分选上皮性卵巢癌细胞系SKOV3和A2780具有外泌Hochest33342染料生物学特性的侧群细胞,鉴定其肿瘤干细胞样细胞相关生物学特性。运用细胞培养稳定同位素标记(SILAC)的定量蛋白质组学技术,检测SP细胞中差异表达膜蛋白。结果运用流式分选技术,成功分选出上皮性卵巢癌细胞系SKOV3和A2780细胞占比0.5%的SP细胞,经过多次分选,SP细胞比例逐步升高,并能够逐步分化成非SP细胞,说明SP细胞具有一定的增殖与分化能力。体外实验证实SP细胞具有更强的细胞克隆形成能力,且对紫杉醇、顺铂等化疗药物敏感性差;反转录PCR实验显示SP细胞内干细胞相关基因(如Oct-4、β-catenin、ABCG2)表达水平升高。此外,SP细胞具有较强的小鼠体内成瘤能力。运用SILAC技术,以非SP(NSP)细胞作为对照,检测出SKVO3和A2780细胞SP细胞内差异表达膜蛋白分别1561和1989个,以SKOV3为基准,两种SP细胞共同差异表达上调蛋白12种,共同差异表达下调蛋白13种。结论上皮性卵巢癌细胞系SP细胞具有肿瘤干细胞样细胞生物学特性,并检测出SP细胞差异表达膜蛋白,为后续深入探索上皮性卵巢癌肿瘤干细胞样细胞表面标记蛋白提供基础。
- 尹婕潘凌亚温仪萍黄虹曾靖李晓莹韩甜甜金滢李艳
- 关键词：卵巢癌侧群细胞
- 人ATP11A和ATP11B克隆、表达及鉴定
- 2022年
- 目的构建人P4型磷脂转移酶11A或11B(ATP11A或ATP11B)表达载体,并检测其上调ATP11A或ATP11B的效果。方法根据ATP11A或ATP11B序列设计引物,克隆到克隆载体(EZ-T^(TM)Cloning Vector)上,通过酶切鉴定,并经测序验证。分别将ATP11A和ATP11B序列酶切、定向连接到表达载体pLVX-IRES-mCherry、pLVX-IRES-RFP上。然后利用脂质体将重组带有免疫荧光蛋白的表达质粒转染至HEK-293T,最后通过测序、荧光显微镜检、流式细胞测量术分析、免疫印迹对重组细胞株进行表达验证。结果通过电泳及酶切鉴定证实了ATP11A、ATP11B表达载体的成功构建,荧光显微镜定性观察质粒转染效率,流式细胞测量术检测转染效率分别为38.9%、41.9%,免疫印迹法只检测到转染表达质粒的细胞有标签蛋白而对照组均无蛋白表达。结论成功构建了人ATP11A、ATP11B的表达载体,并可有效上调其表达水平,为将来应用ATP11A或ATP11B进行机制研究奠定了基础。
- 韩甜甜曾靖尹婕李晓莹金滢李艳潘凌亚
- 关键词：过表达分子克隆
- 子宫内膜癌淋巴结转移的危险因素及预后分析被引量：36
- 2017年
- 目的探讨子宫内膜癌腹膜后淋巴结转移的高危因素及淋巴结转移对于预后的影响。方法回顾性分析2005年1月至2010年12月期间在北京协和医院妇产科进行诊治的289例行腹膜后淋巴结切除的子宫内膜癌患者的临床病理资料,对影响子宫内膜癌腹膜后淋巴结转移的高危因素和影响子宫内膜癌患者预后的因素进行统计分析。结果 1)289例患者中位发病年龄55岁,Ⅰ期224例(77.5%),Ⅱ期13例(4.5%),Ⅲ期45例(15.6%),Ⅳ期7例(2.4%)。289例行盆腔淋巴结切除,30例(10.4%)有盆腔淋巴结转移;96例行腹主动脉旁淋巴结切除,11例(11.5%)有腹主动脉旁淋巴结转移。复发21例(7.3%),死亡11例(3.8%),中位随访时间37个月,中位无瘤生存时间34个月。2)单因素分析显示术前CA125≥35 U/m L、非子宫内膜样癌、组织学分级为G3、深肌层浸润、肿瘤≥2 cm、宫颈间质受累、腹腔冲洗液细胞学阳性及阴道或宫旁受累是淋巴结转移率的高危因素(P<0.05)。多因素分析显示术前CA125值≥35 U/m L、低分化、肌层浸润深度≥1/2是淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05)。3)Kaplan-Meier单因素分析显示,腹腔冲洗液细胞学阳性、阴道或宫旁受累、附件受累及淋巴结转移缩短无瘤生存时间(P<0.05);非子宫内膜样癌、低分化、肌层浸润深度≥1/2、腹腔冲洗液细胞学阳性、附件受累及淋巴结转移缩短总生存时间(P<0.05)。COX回归多因素分析显示,腹膜后淋巴结转移是5年无瘤生存率的独立预后因素(未转移者92.1%vs转移者65.3%,P=0.002,95%CI 0.078~0.552);虽不是5年总生存率的独立预后因素,但无淋巴结转移者的5年总生存率有高于淋巴结转移者的趋势(未转移者96.1%vs转移者70.0%,P=0.086,95%CI 0.039~1.238)。结论本研究发现:1)肿瘤分化程度和肌层浸润深度对淋巴结转移有预测意义,能够指导子宫内膜癌患者是否进行淋巴结切除术,为个体化治疗奠定理论基础。2)淋巴�
- 曾靖李艳金滢单莹王永学尹婕韩甜甜宋晓潘凌亚
- 关键词：子宫内膜癌淋巴结影响因素预后
- 术前诊断为子宫内膜不典型增生的子宫内膜癌患者的处理被引量：5
- 2017年
- 目的分析和总结术前诊断为子宫内膜不典型增生的子宫内膜癌患者的临床特点及治疗方法。方法 2005年1月至2010年12月北京协和医院妇产科行全子宫切除术后病理诊断为子宫内膜样癌的患者共计404例,其中44例术前子宫内膜活检病理提示子宫内膜不典型增生(AEH),回顾性分析这些患者的临床特点,采用SPSS 13.0统计学软件进行分析。结果 44例术前诊断为AEH的患者中,39例(89%)患者未行子宫内膜癌分期术,子宫切除术后病理均为高分化子宫内膜样癌(100%),14例(32%)年轻患者保留了双侧卵巢,9例(20%)患者给予辅助放疗。中位随诊时间52个月,无复发病例。和绝经后患者相比,绝经前患者术后深肌层浸润(1/22及4/22)及淋巴血管间隙浸润(0/22及3/22)更少,但无统计学差异。比较AEH组和术前诊断为子宫内膜样癌的患者(EC组),AEH组高分化子宫内膜样癌的比例明显高于EC组(P=0.000);辅助化疗率和复发率明显低于EC组(P=0.003和0.019)。结论术前诊刮为AEH的子宫内膜癌患者预后好,年轻患者充分评估后可以考虑保留卵巢,绝经后患者AEH伴发子宫内膜样癌的风险增高,且更容易合并深肌层浸润、淋巴血管间隙受累等高危因素。
- 单莹金滢李艳王永学曾靖韩甜甜宋晓潘凌亚
- 关键词：子宫内膜不典型增生子宫内膜样癌
- 子宫内膜癌腹水细胞学阳性的危险因素和预后意义被引量：5
- 2017年
- 目的探讨子宫内膜癌患者腹水细胞学阳性的危险因素和预后意义。方法收集2005年1月1日至2010年12月31日北京协和医院收治的486例初治子宫内膜癌患者的临床资料进行回顾性分析,单因素及多因素分析腹水细胞学阳性对预后的影响。结果 1)子宫内膜癌患者中腹水细胞学检查阳性率为4.8%。2)非子宫内膜样癌(P=0.000)、FIGO分期(2009)为Ⅲ-Ⅳ期(P=0.000)、子宫深肌层受累(P=0.001)、宫颈间质浸润(P=0.018)是子宫内膜癌腹水细胞学阳性的影响因素。3)子宫内膜癌腹水细胞学阳性患者的5年无进展生存率(70.9%vs90.0%)、5年总生存率(72.2%vs 96.0%)均低于腹水细胞学阴性患者;单因素分析腹水细胞学阳性对无进展生存时间和总生存时间的影响,差异均具有统计学意义(P=0.005,P=0.000);4)多因素分析显示腹水细胞学阳性并不是无进展生存时间、总生存时间的独立危险因素(RR=3.812,95%CI 0.897~16.200,P=0.070;RR=3.426,95%CI 0.800~14.673,P=0.097)。结论子宫内膜癌的腹水细胞学阳性与非子宫内膜样的病理类型、FIGO分期(2009)、深肌层浸润、宫颈间质浸润相关。腹水细胞学阳性不是子宫内膜癌的独立预后影响因素。
- 宋晓金滢李艳单莹王永学尹婕曾靖韩甜甜潘凌亚
- 关键词：子宫内膜癌腹水细胞学预后
