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小鼠骨髓和脾来源树突状细胞的分离与扩增培养被引量：38: 1999年; 目的：探索树突状细胞（ＤＣ）及其前体的分离纯化及其体外扩增的方法。方法：无菌制备ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓和脾细胞；先后用红细胞裂解液、抗鼠ＣＤ４、ＣＤ８、Ｂ细胞单抗（ＭｃＡｂ）和补体溶液，依次去除红细胞，Ｔ、Ｂ细胞，粒细胞和单核巨噬细胞等混杂细胞而获得纯化的ＤＣ及其前体；又在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）和白细胞介素（ＩＬ４）协同诱导下培育，ＤＣ前体分化发育成ＤＣ或郎罕细胞（ＬＣ）并扩增，同时阻抑巨噬细胞发育生长。结果：ＤＣ／ＬＣ细胞数增加，其形态在光镜下多为特征性星形，也有梭形和多角形；扫描电镜下观察其绝大多数为特征性星形，且有１～４级不等的树突状突起，其纯度高达９５％以上。ＤＣ／ＬＣ在功能上明显刺激同种异体混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）。结论：①结果所得细胞的形态和功能符合ＤＣ／ＬＣ；②建立连续排异结合ＧＭＣＳＦ＋ＩＬ４联合诱生培育的方法，可获得大量高纯度的ＤＣ／ＬＣ。; 杨洪艳张义国董子明董子明吴皓; 关键词：树突状细胞细胞培养肿瘤骨髓小鼠

小鼠骨髓来源树突状细胞与NS_1骨髓瘤细胞的融合瘤苗研制被引量：14: 1999年; 目的：为了提高肿瘤的免疫原性，有效地引发并增强宿主体内抗肿瘤免疫应答，特研制小鼠骨髓树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｓ，ＤＣｓ）与ＮＳ１骨髓瘤细胞的融合瘤苗。方法：利用特异的ＣＤ４、ＣＤ８、Ｂ２２０单克隆抗体和补体缓冲液及ＤＣｓ的半粘附性，直接从骨髓细胞中分离出高纯度的ＤＣｓ及其前体；再联用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）和白细胞介素（ＩＬ）４体外培育，协同诱导ＤＣｓ及其前体分化增殖，以获得大量高纯度的ＤＣｓ；然后用聚乙二醇（ＰＥＧ），使其与８氮杂鸟嘌呤（ＡＧ）处理过且处对数生长期的ＮＳ１骨髓瘤细胞融合，并用次黄嘌呤氨基蝶呤胸腺嘧啶核苷（ＨＡＴ）选择培养基筛选融合细胞，观察融合细胞的生长特性和体内致瘤性；最后直接从ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠尾静脉免疫接种活的融合细胞，再观察其诱导宿主抗肿瘤的免疫效果。结果：①融合细胞也有刺激混合淋巴细胞增殖反应的能力，其在体外能分裂增殖，但明显低于肿瘤细胞，无体内致瘤性；②接种活融合细胞的免疫小鼠能抵抗野生肿瘤攻击长达９０ｄ未见诱发肿瘤；③对照组小鼠１００％出现诱发肿瘤。结论：融合细胞可能加工处理并表达尚未鉴定的肿瘤特异抗原，进而激发宿主体内抗肿瘤免疫反应，使?; 张义国董子明杨洪艳郑智敏赵明耀吴皓; 关键词：肿瘤疫苗树突状细胞骨髓肿瘤细胞融合小鼠

转输树突状细胞疫苗免疫脾淋巴细胞对小鼠骨髓瘤的继承性免疫防治作用被引量：3: 1999年; 目的：研究树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｓ，ＤＣ）类瘤苗免疫小鼠脾淋巴细胞对实验性骨髓瘤的继承性免疫预防与免疫治疗的作用。方法：先前用骨髓ＤＣ作为佐剂，研制了ＤＣ与肿瘤细胞的融合瘤苗，以及用灭活肿瘤细胞及其裂解产物体外脉冲的ＤＣ疫苗，并成功地诱导宿主产生抗肿瘤的免疫保护性反应，且对荷瘤动物具有免疫治疗作用。在此基础上，本研究用ＤＣ融合瘤苗及肿瘤抗原脉冲ＤＣ疫苗免疫的脾淋巴细胞作为免疫效应细胞，继承性转输到宿主体内，以观察其免疫预防与治疗的效果。结果：继承性免疫预防试验表明，转输免疫脾淋巴细胞后２组宿主均能够抵抗野生性肿瘤细胞的多次攻击，＞６０ｄ未见皮下移植性肿瘤形成，其６０ｄ存活率为１００％（５／５），与对照组相比，Ｐ＜０．０１。继承性免疫治疗（ａｄｏｐｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ，ＡＩＴ）试验显示：①单用免疫淋巴细胞进行ＡＩＴ的２组，６０ｄ存活率分别为８０％（４／５）和６０％（３／５），其存活时间也明显延长，Ｐ＜０．０５；②先行化疗后进行ＡＩＴ，以及术前或术后再行ＡＩＴ，６０ｄ存活率提高到１００％（５／５），其存活时间显著延长，Ｐ＜０．０１；ＡＩＴ后宿主荷瘤生长明显被抑制，且部分荷瘤消退甚或治?; 张义国董子明赵明耀赵明耀吴皓杨洪艳郑智敏吴皓; 关键词：骨髓肿瘤树突状细胞小鼠

贴壁树突状细胞群经瘤细胞裂解物脉冲的瘤苗及其抗瘤效应被引量：2: 1999年; 目的：进一步探讨贴壁树突状细胞群经骨髓瘤细胞裂解物体外脉冲的瘤苗的抗肿瘤效应。方法：从骨髓细胞和脾细胞中分离扩增培育出大量贴壁生长的树突状细胞群，进而研制了一种经骨髓瘤细胞裂解物体外脉冲的树突状细胞瘤苗，后进行动物整体实验探讨该类脉冲瘤苗的抗肿瘤效应。结果：该贴壁树突状细胞群的形态鉴定具异质性，但仍能刺激混合Ｔ淋巴细胞增殖反应。该脉冲瘤苗免疫预防效应的动物实验显示，树突状细胞的脉冲瘤苗免疫的动物能够产生且保持其特异抗肿瘤免疫保护效应，１２０ｄ内反复多次攻击后未见皮下移植瘤形成。瘤苗免疫治疗效应的动物实验表示，树突状细胞的脉冲瘤苗主动免疫治疗的荷瘤动物能够获得长期生存期，荷瘤生长被抑制直至完全消退，其治愈率达１００％（ｎ＝１０），之后１２０ｄ内未见肿瘤复发（ｎ＝５），且多次再攻击后也未见移植瘤形成（ｎ＝５）。经常规病理学尸解与镜检，实验动物皮下接种原位及其他器官均未发现骨髓瘤细胞存在，同时也未发现其他组织学异常。结论：这些结果说明脉冲的树突状细胞瘤苗具有高效的抗肿瘤预防效应、且可治愈荷瘤动物并获得免疫保护。进而提示该脉冲瘤苗主动免疫能够诱发或加强宿主体内免疫系统的抗肿瘤排斥功能，可完全抵御肿瘤细胞攻击或杀灭肿?; 张义国董子明杨洪艳赵明耀吴皓郑光郑光陈宁; 关键词：树突状细胞瘤苗骨髓肿瘤

活化B淋巴细胞与NS_1瘤细胞融合瘤苗的抗肿瘤免疫治疗被引量：2: 1999年; 目的：观察活化Ｂ淋巴细胞与ＮＳ１骨髓瘤细胞融合瘤苗对荷ＮＳ１瘤ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠免疫治疗作用。方法：用灭活ＮＳ１瘤细胞及其裂解物免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠活化的Ｂ淋巴细胞；以５０％ＰＥＧ为融合剂，将免疫脾Ｂ淋巴细胞与野生型ＮＳ１骨髓瘤细胞融合，经ＨＡＴ选择性培养、筛选融合细胞，以融合细胞作为瘤苗，免疫治疗荷ＮＳ１瘤小鼠２次。结果：融合细胞体在宿主体内的致瘤性降低；融合细胞瘤苗免疫治疗荷瘤小鼠的肿瘤组织体积逐渐减小、最终完全消失，小鼠存活期显著延长。结论：活化的Ｂ淋巴细胞与ＮＳ１细胞融合瘤苗能有效诱导小鼠体内的抗肿瘤反应。; 赵明耀董子明杨洪艳杨洪艳郑智敏张义国陈宁郑智敏赵勤; 关键词：B细胞骨髓肿瘤细胞融合

癌基因、抑癌基因、细胞凋谢与癌肿被引量：6: 1995年; 癌基因、抑癌基因、细胞凋谢与癌肿吴逸明，孟爱民，吴皓（河南医科大学，郑州铁路中心医院）正常的生理调节中，程序细胞死亡发挥着极其重要的作用。过去人们在研究恶性肿瘤发生时，注意力几乎完全集中在细胞内部控制细胞分裂的通路上，认为是该过程的失控，引起癌细胞无...; 吴逸明孟爱民吴皓; 关键词：癌症癌基因抑癌基因细胞凋亡

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吴皓

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